3．
实时荧光定量PCR(qPCR)实现了PCR从定性到定量的飞跃。TaqMan探针是qPCR技术中一种常用的探针(如图1),其5'末端连接荧光基团(R),3'末端连接淬灭剂(Q)。当探针完整时,R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在qPCR扩增过程中,当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q,R发出的荧光信号被相应仪器检测到,荧光信号的累计与PCR产物数量完全同步(如图2)。请回答下列问题:
图1
图2
(1) 与质粒相比,TaqMan探针中除荧光基团、淬灭剂外,特有的化学成分是________。
(2) 加入到PCR反应体系的物质,除图中所示引物、酶、模板DNA外,还应包括Mg2+、扩增缓冲液和____________。
(3) 根据TaqMan探针功能分析,探针中碱基序列的设计应主要依据______________,同时要避免与____发生碱基互补配对。
(4) 根据图2,Taq酶的功能有______________、____________。
(5) 若每分子探针水解释放的R基团荧光强度为a,加入的目的基因为b个,请根据图示过程,试用数学公式表示反应体系中荧光信号强度(Rn)与扩增次数(n)之间的关系:____________。