研究表明从母瘤分离脱落的癌细胞首先要与正常细胞粘附才能转移。为研究物质X对癌细胞同毛细血管内皮细胞间粘附的影响，请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：培养瓶若干个、液体培养基、物质X、癌细胞细胞株、内皮细胞悬液、CO₂培养箱、

胰酶、PBS溶液（用于洗去未粘附的细胞）

(要求与说明：不考虑培养液成分变化对培养物的影响；实验条件适宜）

(1)实验思路：

①取培养瓶若干个均分为三组，分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液，置于37°C的CO₂培养箱中培养24h，使培养瓶中铺满单层内皮细胞。

②________________________________________________________________________

③同时分别____________________________________。置于37°C的CO₂培养箱中培养一段时间。

④用PBS溶液洗去未贴壁的细胞，测定相关值并计算细胞粘附率。

⑤对实验数据进行分析与处理。

(2)下图为实验所测得的细胞粘附率，请根据图示结果，用文字描述该实验结果并得出实验结论:

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 (3)分析与讨论

①实验用的癌细胞细胞株可以通过________________________法建立。获取癌细胞时需用_________处理癌细胞株，将癌细胞转入含内皮细胞的培养瓶后所进行的培养称为________________培养。

②导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是___________________。根据实验可推测：物质X可能是通过减少肿瘤细胞同毛细血管内皮细胞的粘附率，来达到___________________的作用。

    （1）同一个体各种体细胞都来源于受精卵的分裂与分化。正常情况下，体细胞核遗传信息相同的原因是___________________________。

    （2）通过检测原癌基因X控制合成的____________和____________可判断其是否转录和翻译。检测成人多种正常组织后，发现原癌基因X只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达，这说明_____________________________。

    （3）根据以上信息，可推测原癌基因的主要功能是______________________________。

    （4）苦马豆素(SW)因从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果：

    a．将等量的小鼠肝癌Hepal-6细胞悬液，分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中；

    b．将培养瓶放于37℃、5％CO₂培养箱中培养24 h，静置、去除上清液；

    c．分别加入等量但含不同浓度SW的培养液，于37℃、5％CO₂培养箱中继续培养；

    d．分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线如图所示。

    步骤c中需要设置对照组，对照组的处理方法应为___________________________。步骤c中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计平均值，这是为了___________________，使实验结果更准确。

癌症是一种由于基因突变的细胞发生异常大量累积而形成的。癌症基因疗法几乎没有耐药性，因此即使患者在化疗和放疗过程免疫力低下的情况下，也同样可以接受基因治疗。研究人员设计了三种治疗方案：

(1)方案一：研究人员从病人体内提取“T细胞”，利用______________技术在体外完成基因的转移，然后将成功转移的细胞进行______________增加细胞的数量，最后将这些改变了的“T细胞”成功移植回到患者体内，这些改变了的“T细胞”识别攻击癌细胞。

(2)方案二：研究人员利用修饰的腺病毒5号作为______________，将Endostatin基因和Interferon基因等有治疗效果的基因导入癌细胞内。对腺病毒进行修饰的目的是使病毒______________，但能够复制增加相关基因的数量。

(3)方案三：新型基因疗法JG-1是结合CDC6shRNA活性基因和癌抑制基因pl6这两种基因的强有力的疗法。“CDC6shRNA活性基因”的使用原理着眼于癌细胞具有______________的特性，它能消灭在癌细胞里存在的一种被称为CDC6的DNA的复制因子。然后通过pl6来修复抑癌基因Rb路径上的起效机制，并促使癌细胞在刚开始增殖阶段即停止增殖。

(4)对癌细胞进行体外培养时，可以形成____________________层细胞，这是由于癌细胞的细胞膜表面的糖蛋白减少的原因，使癌细胞培养时不具有原代培养的____________和______________的特点。

小肠上皮细胞的细胞膜上有多种功能不同的膜蛋白，如：与 Na^＋ 和葡萄糖转运有关的膜蛋白 A、与细胞黏着性有关的膜蛋白 B、能与某种激素发生结合的膜蛋白 C、水解二糖的膜蛋白 D等。回答下列有关问题：

(1)膜蛋白的合成场所是________，导致四种膜蛋白分子结构差异的根本原因是________________________________________。

(2)膜蛋白 D的特征是________________(写出两点即可)。膜蛋白 C________(填“能”或“不能”)与促甲状腺激素相结合。

(3)发生癌变的小肠上皮细胞的膜蛋白________(填“A”“B”“C”或“D”)减少。将发生癌变的小肠上皮细胞用含³H 标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸的培养液培养一代后，移至普通培养液中培养，不同间隔时间取样，检测到被标记的癌细胞比例减少，出现上述结果的原因是________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

很多癌症只有当个别细胞脱离主要的肿瘤，通过血液循环到达身体中其他的地方才会形成继发性肿瘤，造成致命的危害。研究者利用小鼠进行了活体实验，将癌细胞通过静脉注射入小鼠体内，发现不同类型的癌细胞均能“杀死”血管壁中的特定细胞(内皮细胞)并跨越内皮细胞屏障，从而离开血管建立起转移癌(如图l所示)。

(1)为证实该发现，研究者在离体条件下做了细胞培养实验加以验证：

①将葡萄糖、氨基酸、无机盐等物质加入培养瓶中，该培养基往往还需添加________等特殊物质，以保证营养成分的全面。

②向实验组培养液中加入适量的________细胞和内皮细胞；向对照组中加入________，一段时间后，用显微镜直接计数法统计两组细胞的死亡率。

(2)研究者进一步揭示了癌细胞诱导内皮细胞死亡的机理(如图2所示)，请据图回答：

①在血管壁内皮细胞表面存在一种信号转导分子——DR6(死亡受体6)，当癌细胞接触到内皮细胞时，癌细胞表面的信号转导分子——________便会激活DR6，这标志着癌细胞开始对血管壁进攻。

②与坏死不同，程序性细胞死亡是一种由死亡受体介导，细胞主动死亡的过程，需要依赖________(细胞器)参与才能完成细胞自吞噬。

(3)研究者推测：癌细胞诱导内皮细胞死亡的过程为程序性死亡，且该过程能够被细胞信号转导抑制剂阻断。

①欲证明该推测成立，研究者利用两种细胞信号转导抑制剂设计了三组实验，其中的两个实验组中应分别添加________和________的抑制剂。

②通过观察，若出现________的实验现象，则证明研究者的推测正确。

据报道，近年来儿童中白血病患者人数有增加的趋势。而某儿童医院的一份调查显示，最近就诊的白血病儿童患者中，90%的家庭曾进行过豪华装修。

（1）在家庭装修中，有哪些因素可造成造血干细胞产生癌变？____________________、_______________________（写出其中两种）。这些因素是如何使造血干细胞癌变转化成癌细胞的？____________________________。

（2）治疗白血病的方法之一是化学疗法，其中化学药品羟基脲、阿糖胞苷等能干扰DNA的合成，对恶性肿瘤细胞有杀伤作用，对上述药物最敏感的是处于____________期的恶性肿瘤细胞，原因是_______________________________________________________________________________________________。

某生物兴趣小组对一种抗癌新药进行实验时，以动物肝癌细胞为材料，测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响。请回答下列有关动物细胞培养的问题。

(1)在动物细胞培养时，通常在培养基中还需要加入适量____等一些天然成分。细胞培养应在含5% CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是____。

(2)若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要用________处理。

(3)在细胞生长过程中，当细胞贴壁生长到一定程度时，其生长会受到抑制，这种现象称为________。

(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的________。

请结合所学知识回答下列问题：

（1）癌症是威胁人类健康的最严重的疾病之一。细胞癌变后，细胞表面的糖蛋白减少，使细胞粘着性降低，但增加了一些癌细胞特有的蛋白成分，所以可用________________的方法来鉴定细胞是否癌变。

（2）丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、________（气体条件）的培养箱中培养24h，静置、去掉上清液；

②实验组用0.02％二甲亚砜溶解的0.5ug／mL、lug／mL、1.5ug／mL的丹参酮溶液，对照组用________，再加入等量的培养液，在适宜环境条件下继续培养；

③培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数。本实验的自变量是________。

为减少误差，实验中每组细胞培养瓶不止一个，统计每组各瓶数据并________。

（3）设对照组癌细胞增殖率为100％，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（％）＝[（用药组各时段癌细胞数－用药组开始癌细胞数）／（对照组各时段癌细胞数－对照组开始癌细胞数）]×100％。得到以下数据：

据此推测，丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于________期。丹参酮可能通过促进HepG2内________的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。

（5）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响．除了上述丹参酮用药组外，还应设置等实验组才能得出结论。