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            • 1.

              近期统计数据显示,癌症已经成为我国城乡居民的首要死因。请根据提供的材料回答问题:

              (1)体外分别培养癌细胞和正常体细胞,上图中代表癌细胞生长曲线的是___________。在体内,癌细胞可能侵袭周围正常组织,说明癌细胞具有 _______________ 的特性。
              (2)端粒酶是与染色体末端结构相关的一种细胞组分。表中数据显示细胞癌变可能与端粒酶的活性有关,请完成下面的探究实验:


              实验目的:探究端粒酶与细胞癌变的关系。
              实验材料:癌细胞、端粒酶抑制剂、细胞培养液等。
              实验步骤:
              ①将癌细胞平均分成A、B两组。
              ②A组加入端粒酶抑制剂,B组_________________,在______________________条件下进行培养。
              ③记录并比较A、B两组细胞的增殖代数。

              结果预测及分析:

              ②若A组细胞比B组细胞增殖代数少,说明_______________________________________

              ②若A组细胞仍然无限增殖,说明________________________________________________

            • 2.

              生物制剂W和X均能显著抑制癌细胞增殖,且X效果更好。欲研究联合使用两种生物制剂对癌细胞增殖作用的效果,请根据下列材料与用具,完善实验分组和实验思路,预测实验结果并进行分析。

              材料与用具:肝癌细胞悬液、培养液、W溶液、X溶液、培养瓶、血细胞计数板、显微镜等。

              (要求与说明:细胞计数的具体操作过程不作要求;不考虑加入W和X后的体积变化等误差;只进行原代培养且培养条件适宜;各组实验结果均有明显差异)

              请回答:

              (1)实验分组:

              W组:肝癌细胞悬液+培养液+W溶液

              X组:肝癌细胞悬液+培养液+X溶液

              C组:肝癌细胞悬液+培养液+               

              D组:             

              (2)实验思路:



              (3)结果预测:下表中已填写了1种可能的结果和相应的结论,请添加若干行,并将其他可能的结果和相应结论填入表中。结果用数轴表示,各组癌细胞的数目从左往右依次增加,字母间距大小不作要求。

              联合使用生物制剂W和X对肝癌细胞增殖效果实验结果预测及分析表

              结果预测

              相应结论

               

              生物制剂W和X联合使用能抑制癌细胞增殖,作用效果比单独使用W强,较单独使用X弱

            • 3.

              已知0.5mg/ml范围内的二氯二乙胺可抑制癌细胞增殖,且效果与浓度正相关。又有科研发现二氯二乙胺与药物H同时作用效果更加明显。现提供下列材料,请对上述现象进行验证。

              材料:小鼠肝癌细胞、0.5mg/ml二氯二乙胺溶液、a浓度药物H溶液、蒸馏水、生理盐水、培养瓶、全营养培养液及相关培养和计数设备。

              (1)完善实验思路:

              ①取培养瓶若干,编号1、2、3……

              ②分组及加样:请用表格表示,并注明添加的成分,用“+”表示添加,空格表示不添加;(注:若各组添加某一相同成分时,应注意“等量且适量”。)

              ③将上述培养瓶置于        环境中培养一段时间;

              ④从各培养瓶中取等量的培养物,用         对其进行计数。若发现压在方格上的细胞,应         

                        
              实验结果:见下

              (2)结合所学知识,请分析:

              ①研究表明二氯二乙胺作用一段时间后,可使细胞停留在G1/S临界处,则其可能干扰了一种酶的作用,这种酶是          

              ②再经药物H作用后,又发现有部分细胞中染色体数与核DNA的比值为0.5,则药物H的作用机理可能是         

            • 4.

              日本福岛核泄漏问题引起全世界的高度关注,核辐射会使人群中的癌症、畸变等疾病的发生率增加,影响几代人的健康。请回答:

              (1)一般而言,一个正常的细胞一旦到了其寿命,它会“自杀身亡”,这种过程属于________。而核辐射会使细胞发生基因突变,导致正常细胞的_________________失控而变成癌细胞。

              (2)某科研单位研制出一种新型药物X,据说对核辐射引起的恶性肿瘤有较好的疗效。某医院为验证其疗效,设计了如下的实验方案。请你补充完成下列实验方案:

              a.将配制的培养液均分为两组,并标号为A、B;

              b.A组加入一定量的药物x,B组不加,将_________________肿瘤细胞置于两组培养液中;

              c.两组放在相同适宜的条件下培养一段时间,显微观察并记录______________________。

              结果预测及结论:_____________________________________________________________________________。

            • 5.

              苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得,为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用,学者做了大量研究,相关实验过程及结果如下:

              ① 取小鼠肝癌Hepal-6细胞;

              ② 制成单细胞悬液,等量接种于多孔板,加入等量细胞培养液,每组设5个平行孔;

              ③ 于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h;

              ④ 加入等量不同浓度的SW溶液,于37℃、5%CO2培养箱中培养;

              ⑤ 分别在24 h、48 h、72 h时摇匀后吸取培养液,观察并记录结果,得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线,如图所示;


              ⑥ 将培养48h的培养液离心,细胞染色,在荧光显微镜下观察拍照,记录癌细胞和凋亡细胞的数目,并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况,汇总统计结果见下表。

              培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达水平

              SW/μg·mL-1

              癌细胞数目

              凋亡细胞数目

              Bax蛋白

              Bcl-2蛋白

              0

              ++++

              +

              +

              ++++

              0.5

              +++

              ++

              ++

              +++

              1

              ++

              +++

              +++

              ++

              2

              +

              ++++

              ++++

              +


              注:“+”的数量表示相对值的大小。

              请回答下列问题:

              (1) 实验中进行小鼠肝癌Hepal-6细胞培养的原理是____。培养箱中要有适量的无菌空气,原因是______________。肝癌细胞数量增多扩展时,细胞能相互重叠向三维空间发展,形成堆积物,可能的原因是________。 

              (2) 实验步骤③中“于37℃、5%CO2培养箱中培养24h”的目的是____________。 

              (3) 分析图中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是____________________________________________。 

              (4) 表中结果表明SW可以诱发细胞____,从而抑制肿瘤细胞生长。从两种蛋白质的表达水平来看,Bax蛋白和Bcl-2蛋白对癌细胞凋亡的作用分别是________。 

            • 6.

              BAK基因是近年来发现的一种促凋亡基因,癌细胞内的BAK基因表达异常。将体外扩增的BAK基因导入癌细胞,有望成为癌症治疗的新途径。请分析回答:

              (1)正常细胞生命历程包括________等过程,细胞凋亡是由________所决定的细胞自动结束生命的过程。

              (2)癌变是在致癌因子的作用下,细胞内的________发生了突变而导致的。在癌变细胞内,BAK基因的表达水平明显________。

              (3)实验小组为验证导入BAK基因在胃癌细胞中大量表达对胃癌细胞产生的影响,进行如下操作,并得到如图的结果,请补充完整实验步骤。


              ①用胰蛋白酶处理胃癌组织使之分散成单个细胞;

              ②将分散的单个细胞,等量分为甲、乙、丙三组,甲组细胞________,向乙组细胞中导入不携带BAK基因的载体,向丙组细胞导入________;

              ③在相同且适宜的条件下培养5d,统计各组活细胞数,并从分子水平上比较BAK蛋白的含量。

              实验结果:丙组细胞数明显少于甲组和乙组,原因是________。

            • 7.

              细胞周期失控是癌症的一个标志性特征,细胞周期素依赖性激酶(CDK)4和6是细胞周期的关键调节因子,CDK4/6在许多细胞中均过度活跃,导致细胞增殖失控。在雌激素受体阳性乳腺癌中,CDK4/6的过度活跃也非常频繁。I brance是一种口服CDK4/6抑制剂。为了验证I brance对乳腺癌细胞体外生长的作用,请根据以下提供的实验材料,完善实验思路,并回答以下问题。

                  说明:细胞的数量通过测定相应培养瓶的吸光度值表示,具体操作过程不做要求;细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值);CDK4/6活性可用抗原抗体法进行检测,具体检测过程不做要求。

                  材料和用具:细胞培养瓶、乳腺癌细胞(MCF-7)悬液、乳腺癌细胞培养液、MTT仪器(测定细胞培养液的吸光度)、不同浓度的I brance溶液(用生理盐水配制)、生理盐水、CDK4/6活性检测试剂

                  (1)实验思路:

                  实验结果:①实验组细胞的抑制率高于对照组,在三组实验组中,I brance浓度越高抑制率越大。

                  ②CDK4/6活性在对照组中最高,在三组实验组中,I brance浓度越高CDK4/6活性越低。

                  (2)根据(1)中的思路和结果,设计一张表格用以记录实验结果。


                  (3)研究发现实验组处于细胞周期S期细胞的比例均显著减小,且随着药物剂量增加,S期细胞的比例减少,由此推测CDK4/6在细胞周期中的作用机理是________________。虽然药物I brance抑制乳腺癌细胞的生长十分有效,但在后期的临床研究中,发现其也可引起患者中性粒细胞数目显著下降,根据这一结果,推测其可能影响免疫系统的第________________(选填“一”“二”或“三”)道防线。

            • 8. W药物能够促进肺癌细胞凋亡,但长期使用会使肺癌细胞出现耐药性,若与双氢青蒿素配合使用,则不出现耐药性。为验证上述事实,请根据以下提供的实验材料与用具,完善实验思路,预测实验结果并进行分析。
              实验材料和用具:耐药性肺癌细胞系、W药物、双氢青蒿素溶液、生理盐水、细胞培养液、胰蛋白酶、二氧化碳培养箱、培养瓶若干,细胞凋亡和增殖测定仪等。
              (要求与说明:以细胞凋亡率和增殖抑制率为指标,具体测量方法及实验中有关具体用量不作要求) 请回答:
              (1)实验思路
              ①实验分组情况:
              甲组:耐药性肺癌细胞+细胞培养液+W药物
              乙组:耐药性肺癌细胞+细胞培养液+生理盐水
              丙组:耐药性肺癌细胞+细胞培养液+______。
              每组设置______。
              ②将各组培养瓶置于______的环境中培养。
              ③一段时间后将每组中样品经胰蛋白酶处理后,测定细胞凋亡数和增殖数,并记录。
              ④将获得的数据进行处理,并计算______。
              (2)预测实验结果(以双纵坐标柱状图形式表示实验结果)______。
              (3)分析与讨论
              ①步骤③中用胰蛋白酶处理样品的目的是______,在吸取样液用于测定时需______,以减少误差。
              ②欲确定双氢青蒿素是否通过解除细胞耐药性而发挥作用,在上述实验基础上还需再增加一组实验,其操作思路为______。
            • 9. 端粒酶是一种与染色体末端的端粒有关的细胞组分,该酶在癌细胞中有活性,在正常体细胞中无活性。有人用下列试剂和材料做了相关实验,并得到如下结果。
              (一)实验材料:癌细胞、端粒酶抑制剂、生理盐水、细胞培养液等。
              (二)实验处理和结果:
              细胞类型 处理 增殖情况
              癌细胞 细胞培养液+端粒酶抑制剂 增殖50~60代
              癌细胞 细胞培养液+等量的生理盐水 无限增殖
              请回答下列问题:
              (1)上述实验的目的是______,自变量是______。
              (2)根据上述实验的结果,治疗癌症的新思路是:______。
              (3)端粒是染色体末端的一段______,随着细胞分裂次数的增多而变短,当染色体末端没有端粒时细胞停止分裂。由此推知端粒酶是促进端粒______(合成/水解)。
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