5．
研究表明从母瘤分离脱落的癌细胞首先要与正常细胞粘附才能转移。为研究物质X对癌细胞同毛细血管内皮细胞间粘附的影响，请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。
材料与用具：培养瓶若干个、液体培养基、物质X、癌细胞细胞株、内皮细胞悬液、CO2培养箱、
胰酶、PBS溶液（用于洗去未粘附的细胞）
(要求与说明：不考虑培养液成分变化对培养物的影响；实验条件适宜）
(1)实验思路：
①取培养瓶若干个均分为三组，分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液，置于37°C的CO2培养箱中培养24h，使培养瓶中铺满单层内皮细胞。
②________________________________________________________________________
③同时分别____________________________________。置于37°C的CO2培养箱中培养一段时间。
④用PBS溶液洗去未贴壁的细胞，测定相关值并计算细胞粘附率。
⑤对实验数据进行分析与处理。
(2)下图为实验所测得的细胞粘附率，请根据图示结果，用文字描述该实验结果并得出实验结论:
(3)分析与讨论
①实验用的癌细胞细胞株可以通过________________________法建立。获取癌细胞时需用_________处理癌细胞株，将癌细胞转入含内皮细胞的培养瓶后所进行的培养称为________________培养。
②导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是___________________。根据实验可推测：物质X可能是通过减少肿瘤细胞同毛细血管内皮细胞的粘附率，来达到___________________的作用。