日本福岛核泄漏问题引起全世界的高度关注，核辐射会使人群中的癌症、畸变等疾病的发生率增加，影响几代人的健康。请回答：

（1）一般而言，一个正常的细胞一旦到了其寿命，它会“自杀身亡”，这种过程属于________。而核辐射会使细胞发生基因突变，导致正常细胞的_________________失控而变成癌细胞。

（2）某科研单位研制出一种新型药物X，据说对核辐射引起的恶性肿瘤有较好的疗效。某医院为验证其疗效，设计了如下的实验方案。请你补充完成下列实验方案：

a．将配制的培养液均分为两组，并标号为A、B；

b．A组加入一定量的药物x，B组不加，将_________________肿瘤细胞置于两组培养液中；

c．两组放在相同适宜的条件下培养一段时间，显微观察并记录______________________。

结果预测及结论：_____________________________________________________________________________。

BAK基因是近年来发现的一种促凋亡基因，癌细胞内的BAK基因表达异常。将体外扩增的BAK基因导入癌细胞，有望成为癌症治疗的新途径。请分析回答：

(1)正常细胞生命历程包括________等过程，细胞凋亡是由________所决定的细胞自动结束生命的过程。

(2)癌变是在致癌因子的作用下，细胞内的________发生了突变而导致的。在癌变细胞内，BAK基因的表达水平明显________。

(3)实验小组为验证导入BAK基因在胃癌细胞中大量表达对胃癌细胞产生的影响，进行如下操作，并得到如图的结果，请补充完整实验步骤。

①用胰蛋白酶处理胃癌组织使之分散成单个细胞；

②将分散的单个细胞，等量分为甲、乙、丙三组，甲组细胞________，向乙组细胞中导入不携带BAK基因的载体，向丙组细胞导入________；

③在相同且适宜的条件下培养5d，统计各组活细胞数，并从分子水平上比较BAK蛋白的含量。

实验结果：丙组细胞数明显少于甲组和乙组，原因是________。

蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。请同答：

(1)在工蜂毒腺细胞的核糖体上，蜂毒素是以                        为模板合成的。

(2)在适宜的条件下进行体外培养，癌细胞能够                        ，在此过程中细胞内的DNA含量将持续出现周期性的变化。如图表示癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液中培养几小时后,DNA含量不同的细胞数。据此推测，蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的   期。

(3)研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡。科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。请完善实验并回答问题。

①方法步骤：

a．取4只相同的培养瓶，编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量的离体胃癌细胞。

b．1号培养瓶为空白对照，向2～4号培养瓶中分别加入       _μg/mL蜂毒素溶液。

c．培养48 h后，检测并统计                           ，结果如图甲所示。

d．重复a、b步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图乙所示。

②分析讨论：

a．图甲表明                          。

b．图甲、图乙表明：                                   。

从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与有关。当Bel-2蛋白/Bax蛋白的比值出现       趋势时，将会诱导胃癌细胞凋亡。

【加试题】蓝莓果实中富含花青素，研究表明花青素对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用。为了研究不同浓度、不同时间的花青素的抑制效果，请利用以下材料进行探究。

实验材料：癌细胞悬液（含培养液）、蓝莓花青素（浓度200μg/ml)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜）

(1)实验思路：

……

(2)请设计一个表格用于记录实验数据。

(3)①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用__________测定癌细胞培养液的浑浊度。

②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？__________。

A.保留，继续求平均值B.舍弃，其他组别求平均值

C.重新实验得到实验数据D.取中间值

杂志7月18日刊登了北大生命科学院教授邓宏魁团队的研究成果——使用4个小分子化合物的组合，把成年鼠的体细胞逆转为“多潜能性干细胞”。它为未来应用再生医学治疗重大疾病带来了新的可能，但是这种诱导是否会引发肿瘤或其他安全性问题还没有解决。请回答下列问题：

（1）该团队利用这种干细胞培育出多只健康的小鼠。

 ①干细胞分化过程中，随着细胞体积增大，其_________________减小，从而限制细胞的长大。

 ②干细胞分化产生的各种体细胞核遗传信息相同的原理是______________。

（2）如果4个小分子化合物是核糖核苷酸。采用³²P对尿嘧啶核糖核苷酸进行标记，可检测到放射性的具膜细胞器为______________，观察该细胞器可以使用___________________染色。

（3）如果这种诱导引发肿瘤，与正常体细胞相比，癌细胞具有的特征包括_________（多选）。

A.细胞膜上的糖蛋白减少          B.细胞膜上的甲胎蛋白(AFP)减少

C.含有的基因组与体细胞相同        

D.细胞生长、分裂迅速

（4）研究发现，青蒿素能抗癌，并有可能彻底改变癌症的方法。研究人员从青蒿中提取出青蒿素，加入细胞培养液中培养人乳腺癌细胞，检测青蒿素对细胞增殖的影响。青蒿素浓度和实验结果如图所示。

此实验中还有一组对照实验，其处理是__________。如图结果说明青蒿素能____________,且青蒿素作用的效果受__________的影响。

某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：

(1)若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24小时后取一滴稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”是等量的)观察，发现有64个肿瘤细胞，则此肿瘤细胞的细胞周期约为________小时。

(2)化疗是抑制癌细胞增殖的一种方法，其原理是用药物抑制癌细胞的________，使细胞分裂停止在分裂间期。

(3)某科研单位研制出一种新型药物X，请设计实验：探究新型药物X对抑制癌细胞的增殖是否有疗效，并预测可能的实验结果，得出相应的结论。

实验材料：锥形瓶两个、显微镜、载玻片、盖玻片、培养箱、培养液、新型药物X、生理盐水、肿瘤细胞等。

实验步骤：

①取两个消毒后的洁净锥形瓶，标号A、B。

②a.分别在两个锥形瓶中加入______________。

b．在A中加__________，B中加______________________________。

c．____________________________________________________________。

d．制成装片在显微镜下观察______________________________________。

③可能的实验结果与相应的结论：

a．__________________________________________________________。

b．___________________________________________________________。

c．___________________________________________________________。

细胞培养已经成为生物化学、医学、制药等领域研究和生产不可缺少的技术。回答下列有关动物细胞培养的问题。

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_________。

(2)在动物细胞培养过程中，首先要保证无菌、无毒的环境，对培养液要进行无菌处理外，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________，作用是__________________。动物细胞培养还需要的其他条件是___________、____________、____________。

(3)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现____________________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面的糖蛋白的量________。

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。

请回答与实验有关的问题：

   某同学从资料获知，二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，并设计了如下实验加以验证，请根据实验方案回答问题。

   实验材料：二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，细胞培养液（内有小鼠肝部肿瘤细胞），试管等。

   实验的主要步骤如下表所示：

结论：第一，                                                ；

     第二，                                                。

为研究药物二甲双胍、TRAIL在抗人膀胱癌中的作用，科研人员取适量人膀胱癌细胞进行了以下实验。

(1)细胞癌变后，细胞周期将变_____(填“长”或“短”)。

(2)研究表明：有氧情况下，癌细胞从内环境吸收并用于细胞呼吸的葡萄糖是正常细胞的若干倍，但产生的ATP总量无明显差异。这说明：

①癌细胞内的_______基因的结构发生了改变并被激活，进而改变了代谢途径。

②与正常细胞相比，癌细胞的______(填“有氧”或“无氧”)呼吸加强。

(3)若要单独研究二甲双胍的作用，应将人膀胱癌细胞随机分为两组，A组每天腹腔注射用生理盐水配制的二甲双胍溶液，B组注射______，连续给药48h，每隔2h记录癌细胞数量。

①由图分析，两种癌细胞中对TRAIL高度抵抗的是_________，判断依据是_________。

②实验结果表明，联合用药比单独用药对253J细胞的增殖_________。

③根据药物对两种癌细胞的不同作用效果，推测二甲双胍对TRAIL抗癌起辅助作用的前提是_________。

骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向。实验过程如下：

步骤1 用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5% CO₂培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。

步骤2 取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～200 ng·mL^-1）的培养基继续培养24h。

步骤3 对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1。

步骤4 分别提取TSA浓度为0 ng·mL^-1、25 ng·mL^-1、50 ng·mL^-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2。分析回答：

（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是                            。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是                     ，细胞培养箱中保持5% CO₂的作用是                  。

（2）步骤2中，设置0 ng·mL^-1 TSA实验的主要目的是                         。

（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是                                  。

（4）图1所示结果表明                                  。

（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中          基因过度表达会加速细胞凋亡。