8.
丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物,其作用机制之一是诱导细胞凋亡.以下是相关的实验研究过程及结果:
实验材料:人肝癌细胞(HepG2),培养液,W溶液(作为溶剂),用W溶液溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液,培养瓶等.
步骤如下:
①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液,分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中;将培养瓶放于适宜条件下培养24h,静置、去掉上清液;
②_ _ _,再加入等量的培养液,于相同且适宜的条件下继续培养;
③培养72h,每24h 用细胞计数仪检测癌细胞数.
请完善上述实验步骤中相关内容:
(1)本实验的自变量是
.实验验中,每组细胞培养瓶不止一个,统计后
,目的是减小误差.
(2)设对照组癌细胞增殖率为 100%,用下面公式计算各给药组癌细胞增殖率:
增殖率(% )=[(给药组各时段癌细胞数-给药组开始癌细胞数):(对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数)]×100.得到如表数据:
表1 丹参酮 对HepG2细胞增殖率的影响%
组别 | 培养时间/h |
24 | 48 | 72 |
对照组 | 100 | 100 | 100 |
100给药组ug/mL | 0.5 1.0 1.5 | 78 68 48 | 62 26 12 | 48 21 5 |
通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是:
和
(3)将培养48h的培养液离心,去除上清液后经过一系列的处理及分析,得到对照组和给药组48h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表所示:
组别 | G1 | S | G2+M | 凋亡率 | bax | Bcl-2 |
对照组 | 55% | 36% | 9% | 5.6% | 28% | 53% |
实验组 | 67% | 24% | 9% | 32.6% | 37% | 38% |
据此推测,丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于
期.丹参酮可能通过促进HepG2内
的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长.
(4)顺铂(DDP)是一种DNA损伤药物,也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物.若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响,应还需设置
和
给药组才能得出结论.