6.
正常细胞中含有抑癌的P53基因,能表达抗病毒蛋白,帮助修复轻度变异的基因,也能使重复变异的细胞发生凋亡而避免肿瘤的发生;若它失活而不能表达,则基因突变的细胞易形成肿瘤。基因治疗肿瘤是根本的方法,腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体。野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因,以及病毒复制基因E1,因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒。图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点。
(1)人体DNA的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由___________________________________连接。
(2)DNA解旋酶直接作用于脱氧核苷酸之间的 键(化学键);DNA限制酶直接作用于脱氧核苷酸之间的 键(化学键)。
(3)构建重组腺病毒时,限制酶最好选择 ,理由是:既可以去除 _基因以防止病毒复制后损伤健康细胞,同时还能破坏 基因以防止其 。
(4)将目的基因与腺病毒重组时,重组的成功率较低,依然还有大量非重组的野生型病毒的DNA,这是因为 。
(5)某DNA分子片段含有1000个碱基对。经扩增后,分别只用限制酶EcoRⅠ与同时用EcoRⅠ和HalⅢ两种方法切割,其电泳结果如图丙所示,可推断限制酶HalⅢ在该DNA片段上的切点有 个。