在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下：
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请回答下列有关问题：
(1)配制培养基时，各成分含量确定的原则是________                                   ________________。不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是__________________________________。
(2)倒平板的适宜温度是50℃左右，原因是_______________________________。待平板冷凝后，要将平板倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止________________________。
(3)纯化菌株时，若使用稀释涂布平板法进行接种，应选择的涂布工具是图中的________；若使用平板划线法进行接种，应选择的接种工具是图中的________。

(4)划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

胡萝卜素是常用的食品色素，可以用于治疗某些疾病，甚至有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用，因此提取胡萝卜素具有重要的意义。胡萝卜素可以从植物中提取和养殖的岩藻中获得，还可以利用微生物发酵产生。如图为提取胡萝卜素的流程示意图，请回答下列问题：

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(1)胡萝卜素在人体内可以被氧化成________，有利于治疗夜盲症、干皮症等疾病；炒胡萝卜时要多加________，以利于胡萝卜素的溶解，从而更易被人体吸收。工业生产上，用养殖的岩藻作为原料获得胡萝卜素时，________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(2)新鲜胡萝卜干燥时温度不能太高、时间不能太长，目的是________________________________。萃取时一般选用的萃取剂是________，影响萃取效率的因素有_____________________________________________________________________(答出三项即可)。萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_________________。鉴定萃取液中是否含有胡萝卜素时，通常可采用________法，并以________________样品作为对照。

(3)利用微生物发酵生产胡萝卜素时，培养微生物的培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为微生物提供________和________。采用________法接种时需要先灼烧接种环，以防止杂菌污染。

为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母菌的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：

(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是________________________________；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该________________。

(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是________________________________________________________________________。

(3)下图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是________。(填序号)

①安全阀、放气阀、压力表　②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表　④放气阀、安全阀、温度表

(4)为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是________________。

(5)为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是___________________________________________________________；研磨时________(填"需要"或"不需要")添加CaCO，理由是______________________________________。

为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：

(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是___________________________；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该_________________________。

(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，基目的是__________________。

①安全阀、放气阀、压力表　　②放气阀、安全阀、压力表

(4)为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是_______。

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_________，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

LB液体培养基和LB固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基，其配方为10 g/L蛋白胨、10 g/L酵母提取物、5 g/L氯化钠等，主要用于培养细菌、扩增菌种数量。某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验，请回答下列问题：

(1)要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有______________和无机盐等。有些微生物对某些特殊营养物质及______________等条件有特殊要求。

(2)将各类微生物用______________从斜面培养基接种于灭菌过的LB液体培养基中，进行扩大化培养。

(3)将含有LB固体培养基(LB液体培养基中加15 g琼脂粉，刚配好，尚未凝固)的锥形瓶放入______________中进行灭菌。灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60 ℃(不烫手的温度)时，用______________擦拭桌面和双手，在超净工作台中的______________旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管中，并做标记。

(4)当试管温度下降到40 ℃(培养基还是液态)时，用灭菌过的移液器吸取0.1 mL的各类微生物悬液加入相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在________条件下使培养基凝固。

为了调查蓉江河的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：

（1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，常需要调节PH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是_______．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是______．

（2）该小组可采用上图②所示的______（方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37据此可得出每升水样中的活菌数为______．

（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是______。

【生物—选修1 生物技术实践专题】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配制了下列培养基，在适宜条件下培养）：

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除________并加入高浓度的________。

（2）步骤Ⅲ应挑取图A中________处的菌落，本步骤的目的是________。

（4）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60－70℃保温一定时间的，其作用是________。

（2）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲,乙两种培养（成分见下表）;培养基甲______（填"能"或"不能"）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________。

（4）在用稀释涂布平板计数法对纤维素分解菌数目进行统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际_______________________。如果探究温度对纤维素酶活性的影响，应该保持______________、______________等不变(至少答两项)

（1）利用橙子的果肉制作果酒时，酵母菌能将葡萄糖等糖类在________________等条件下转化成酒精，另外发酵装置应定时________________。

（2）将等量的酵母菌接种到几组相同的培养基，相同时间后，可通过比较实验前后________进行发酵能力的测试。

（3）某同学在制作果酒之后，欲进一步制作果醋，他先在有氧条件下接种优良的醋酸杆菌，再持续通入无菌空气，进一步发酵几乎未能得到果醋。原因最可能是_________________。

（4）研究发现橙皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，如图是提取橙皮精油和乳酸菌素及抑菌实验的示意图，请据图回答：

①橙皮易焦糊，不适用于提取橙皮精油的方法是________________。

②筛选乳酸菌A时；所用培养基须经________法进行灭菌。

③图中进行抑菌实验时，接种的方法最可能是________________，最终可通过________________来比较橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。