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            • 1． 如表为两种微生物的培养基配方：
              A组
              KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4•7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
              1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g
              B组
              纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4•7H2O KH2PO4 MgSO4•7H2O KCl 酵母膏 水解
              酪素
              5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g
              注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1 000mL．
              （1）从功能上来看，上述两种培养基均属于 ______ 培养基．
              （2）如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择 ______ 培养基（填“A”或“B”），该培养基中的碳源是 ______ ．另一组培养基能够分离何种微生物 ______ ．
              （3）在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入 ______ 指示剂，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现 ______ ．鉴定某种微生物能够分解纤维素，用 ______ 法．
              难度：较易
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            • 2． 如图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题．

              （1）图甲是利用 ______ 法进行微生物接种，图乙是利用 ______ 法进行微生物接种．这两种方法所用的接种工具分别是 ______ 和 ______ ；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是 ______ 和酒精消毒．
              （2）接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ ______ ．
              （3）接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？ ______ ．
              难度：较易
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            • 3． 为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
              （1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是 ______ 和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是 ______ ．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是 ______
              （2）该小组可采用上图②所示的 ______ （方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ______ ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ ．
              （3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是 ______ ．
              （4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是 ______
              A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
              B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
              C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
              D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．
              难度：较易
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            • 4． 为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
              （1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是 ______ ．制备的培养基常用 ______ 法进行灭菌．
              K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂
              0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              （2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行 ______ ，用 ______ 法接种于固体培养基上．接种后的培养基 ______ 状态放入培养箱．
              （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和 ______ 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              （4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的 ______ （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将 ______ 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
              难度：中等
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            • 5． 牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素．牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用．回答下列问题：
              （1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为 ______ ．牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的 ______ 能使纤维素分解成纤维二糖．    
              （2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是 ______ ．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 ______ 附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用 ______ 法进行灭菌．
              （3）为了从牛胃的食麋中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以 ______ 作为唯一碳源．筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是 ______ ．在涂布乎板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 6． （1）在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，需要选育能高效降解该除草剂的细菌．
              请完成下列选育的实验方案：
              步骤一：菌种浸出液的制备：
              从 ______ 中获取一定量的样本，然后置于无菌水中，震荡一定时间，备用．
              步骤二：配置菌种选育培养基并灭菌：
              所配制的培养基的特点是 ______  和 ______ ．
              步骤三：
              ①划线接种
              ② ______ ．
              ③ ______ ．
              （2）某同学在纯化菌株时，划线接种后一段时间后，平板的第一划线区域长满致密的菌苔，第二划线区域无菌落，造成划线无菌落可能的操作失误是 ______ ．
              难度：较易
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            • 7． （1）为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．将分别含有A，B，C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，结果见图根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好选择的抗生素是 ______ ．
              （2）治疗肺结核的常用抗生素是利福平，写出其抑菌机理： ______ ．
              难度：较易
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            • 8． （1）利用 ______ 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．在进行细菌纯化培养过程中，经过培养之后，可以观察到在 ______ （填图1中编号）区域出现单个菌落，产生该菌落的最初细菌数目有 ______ 个细菌．将乳酸菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，要使其正常生长必须给予的条件是 ______ ．

              （2）该接种法使用的工具是（图2） ______ ．
              （3）该工具最合适的灭菌方法是 ______ ．
              A．火焰灼烧   B．高温高压灭菌   C．酒精擦拭    D．紫外线照射．
              难度：较易
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            • 9． 微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术．根据有关微生物的知识，分析回答问题：

              （1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和A： ______ 、B： ______ 等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是 ______ ．
              （2）纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D： ______ 法，其中需用接种环进行操作的是 ______ ．
              （3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的 ______ ，培养基中加入指示剂 ______ 培养后，若变红以鉴定其中含有所需细菌．若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E： ______ 和F： ______ 过程，一般通过观察 ______ 的有无挑选出所需菌种．
              难度：中等
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            • 10．

              【生物——选修1：生物技术实践】 

              欲从土壤中筛选出能产生脲酶的微生物并予以纯化计数，采用了下图所示的基本操作流程，请回答下列问题：

              （1）微生物的培养基为微生物生长提供的营养成分往往包括__________________________和特殊营养物质五大类，取得土样后应先用___________（填试剂）对土壤进行梯度稀释，然后将稀释涂布在平面培养基上，这种选择培养基在营养组成上的重要特点是_____________。在这样的培养基上长出的细菌_________（填“一定”或“不一定”）都能产生脲酶。若在平板中加入酚红，目的菌落出现的变化是________。

              （2）若要对相应微生物进行计数，一个稀释度应涂布2到3个平板，并计算_______。若稀释不够高，所得的数据与实际值比较应__________（填“偏大”“偏小”或“相等”）。经涂布获得的菌落可以采用平板划线法进一步纯化，接种时接种环在使用前要先灼烧，其目的是____________________，每次划线之间也要灼烧接种环，其目的是__________________________________，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其原因是__________________________________。获得的纯化菌种可以保存在试管中，塞上棉塞或盖上封口膜，不能密封，原因是________________________________。

              难度：中等
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