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            • 1.

              在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。

              (1) 下图是利用____________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

               (2) 分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述_______成分,并加入______物质,以补充______源。若用于培养纤维素分解菌,应加入________物质,为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入_______染料,含纤维素分解菌将形成__________圈。

            • 2.

              有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.


              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、____________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________,该实验设计是否合理?为什么?_________________________________________________________________。

            • 3. 下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法,请回答相关问题:

              (1)图甲是利用__________法进行微生物接种,图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是______和_________;对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。

              (2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?___________________。

              (3)接种后,在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养?__________________。

              (4)下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解,其接种方法是____(填“图甲”或“图乙”)。

            • 4.

              I:回答与微生物有关的问题:

              (1)泡菜在发酵过程中,起作用的微生物主要是_____和乳酸菌,其发酵产物中含有有机酸和_____等.

              (2)腌制的食物中往往含有少量的亚硝酸盐,对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与_______偶联成_____色化合物.在实验过程中,测定的是_____值,以反映溶液中亚硝酸的含量.

              (3)培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌.检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用_______进行一系列的梯度稀释.
              (4)将稀释后的水样分别用玻璃刮刀____到LB固体培养基,_____于恒温培养箱,在37℃条件进行培养.用该方法统计样本菌落数时_____(填需要或不需要)设置对照组,统计的结果一般_____(低于、高于)实际值.

              (5)若存在杂菌污染,欲消除污染的杂菌,最简单的方法是________

              (6)在培养大肠杆菌过程中,有关操作正确的是_____.

              A.玻璃刮刀和接种环一样,只需灼烧灭菌

              B.培养基分装到培养皿后进行灭菌

              C.倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

              D.获得的菌种如果需要保存,可置于37℃恒温保存.

              II:回答与基因工程有关的问题:如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径.据图结合所学知识回答下列问题:


              (1)①过程称为________,该过程中常用的酶有_________________,为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来,所选择的质粒上应该具________.

              (2)培育转基因羊的过程中,科研人员通过_______技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,受体细胞A应该是_______(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵).

              (3)莴苣为双子叶植物,过程②常用的方法是___________,导人该细胞后,需对该细胞进行培养,经_________过程形成愈伤组织,再分化成幼苗长成转基因莴苣植株,此过程涉及的细胞工程技术是__________,该技术的原理是 ________________。

              (4)过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌,使其易于吸纳重组质粒M.

            • 5.

              结合以下图表分析,有关说法正确的是( )


              A.青霉素和利福平能抑制DNA的复制 
              B.环丙沙星和红霉素分别抑制细菌的①②和③ 

              C.结核杆菌的④和⑤都发生在细胞质中  

              D.①~⑤可发生在人体健康细胞中

            • 6. 22、研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。


               

              (1)柚皮易焦糊,宜采用_________法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

              (2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________法进行接种。对新配制的培养基灭菌时所用的方法是_______________。实验前需对超净工作台用____________进行消毒处理。

              (3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供____________。在对该菌种进行培养时,与常规培养基相比,还需要额外在培养基中添加          

              (4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

            • 7. (8分)胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取。下图为某同学利用酵母菌R获得胡萝卜素的部分流程。请回答下列问题:

              (1) 与乳酸菌相比,酵母菌在结构上的主要区别是。培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供。

              (2)采用平板划线法接种酵母菌R时,需先灼烧接种环,其目的是。培养基通常采用的灭菌方法是。 

              (3)为了验证萃取物是否是胡萝卜素,该同学将叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含叶绿素b、叶绿素a、叶黄素和胡萝卜素)依次点样在滤纸的1、2、3、4、5位置(如图甲所示),并进行层析,滤纸条上各色素带的位置为(填字母)时,即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。


              (4)酵母菌R能分泌A、B两种酶,下图是某课题组关于这两种酶的实验结果:


              ①图中结果显示,在40℃至60℃范围内,热稳定性较好的酶是。高温条件下酶容易失活,其原因是。

              ②由图可知,若要从酵母菌R种群中筛选出能产生热稳定性高的酶的菌株,应在的条件下培养。

            • 8. 泡菜是中国人喜欢的食品,每年到了白菜、青菜、萝卜收获的季节,各家各户都会选恰当的时间,腌浸过冬食用的泡菜。请回答下列有关问题:

              (1)泡菜制作时发挥主要作用的微生物是乳酸菌,常见的乳酸菌有________两类。泡菜具有独特的酸味,主要是因为________,该反应过程中,底物所含的稳定化学能的主要去向是________。

              (2)实验室可采用________法进行乳酸菌菌种纯化,在对该菌种进行培养时,与常规微生物培养基相比还需要额外在培养基中添加________。实验室测定泡菜中亚硝酸盐的含量时,亚硝酸盐首先与________发生反应,随后再通过相关反应形成玫瑰红色染料,再与已知浓度的________进行比色。

              (3)市场上购买的真空包装泡菜,在没有发生漏气的状态下发生了“胀袋”现象,甲同学怀疑是杂菌污染导致的,乙同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说明理由:________。

            • 9.

            • 10. (11分).(1)某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤,并回答有关问题:

              ⑴主要步骤:

              ①制备两种培养基:一种是____培养基,另一种_____的培养基。分别分成两份,依次标上A,A的B,B,备用。

              ②分别向A、B培养基中接种______。

              ③接种后,放在恒温箱中培养3~4天。

              ④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到A、B培养基中。

              ⑤接种后,把A、B培养基放入恒温箱中培养3~4天。

              ⑵回答问题:

              在步骤①中,为保证无杂菌污染,实验中应采用的主要措施有__________、______________、_____________。

              第④⑤两个步骤的目的是_____________________。

              (2)用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

              PCR反应体系

              50ul

              缓冲液

              5ul

              脱氧核苷酸

              1ul

              引物A      

              0.5ul

              引物B      

              0.5ul

              DNA聚合酶   

              0.5U

              模板DNA     

              1-2ul

              加去离子水补足至50 ul

              反应条件

              温度

              时间

              变  性

              95 ℃

              30s

              复  性

              55 ℃

              30s

              延  伸

              72 ℃

              1min

              30个循环后

              适宜

              5-10min

              保  温

              4 ℃

              2h

              ①从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是                                                        

                   此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________           ________________。

              ②下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

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