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            • 1. 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1) 酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_______。 


              (2) 将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步_____,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加____。 

              (3) 图为连续划线法示意图,在图中____(填图中标号)区域更易获得单菌落。 


              (4) 采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为____________。 

              管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度/(mg·L-1)

               

               

               

               

               

              1


              如果废水为50 mg·L-1苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释____(填标号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。 

            • 2.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

              (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_  _______,这种培养基属于________培养基。

              (2)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____  ____,实验需要振荡培养,由此推测目的菌的代谢类型是异养________型。(填“需氧”或“厌氧”)

              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液,接入新的培养液中连续培养,使目的菌的数量________。(两空均填“增加”或“减少”)

              (4)在上述实验操作过程中,获得纯净目的菌的关键是防止____            ___。

              (5)转为固体培养基时,常采用                        进行接种,所用的接种工具分别是________________和               。

              (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行__________处理才能倒掉,以防止微生物的扩散。

              (7)通常情况下,培养基用                  方法灭菌,培养皿用         灭菌。待培养基冷却到        ℃(填20、30、40、50)左右时,在                     附近倒平板,等平板冷却凝固后将平板倒置,可以防止                     ,以免造成污染。
            • 3. 腐乳是我国独特的传统发酵食品,是用豆腐发酵制成,民间老法生产腐乳均为自然发酵,现代腐乳生产多采用优良的毛霉菌种进行发酵。现代化生产流程如下:

              (1)毛霉的生长需要豆腐提供水、无机盐、________________四大类基本营养物质。此外,还需要一定的温度、湿度等环境条件。

              (2)民间制作腐乳时__________(填“需要”或“不需要”)灭菌,发酵好的豆腐上布满了菌落,这些菌落___________(填“属于”或“不属于”)同一物种。

              (3)流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基中加入了________________________。

              (4)当豆腐上长出毛霉后,对豆腐要进行____________________。腐乳制作的后期要加入酒精和多种香辛料配制的卤汤,酒精的浓度要控制在12%,原因是______________________________________________________________________。

            • 4.

              为获取可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌,研究人员进行了如下实验:

              ①制备含3%NaCl的固体培养基,以及含3%、5%和7%Nacl以高盐度工业废水中有机物为碳源的液体培养基;

              ②将高盐度废水采用平板划线法接种到含3%NaCl的固体培养基,如图一。然后置于适宜条件下培养一段时间,观察形成的菌落特征;

              ③将分离纯化后的菌株接种到固体斜面培养基上,适宜条件下培养适当时间,将试管置于4℃冰箱中保藏待用;
              ④取固体斜面上的菌株制成菌液,取等量菌液,分别加入到步骤①中制备的3组液体培养基中摇床培养35小时,定时取样统计活菌数目。测定结果如图二所示。

              回答下列问题:
              (1)配制培养基时,灭菌、添加NaCl溶液和调节pH的先后顺序是________________________。
              (2)步骤②平板划线操作过程中,第一次划线前灼烧接种环的目的是防止杂菌污染,第二次及之后的几次划线前灼烧接种环的目的是________________。完成图一所示操作,至少需要灼烧接种环__________次。
              (3)步骤④中常采用_____________法统计活菌数目。直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的,正确的操作是_____________________________________。若每种浓度设3个重复实验,每次统计活菌数目时,需要从_____________个培养瓶中取样。

              (4)由图二可知,该耐盐菌最适合处理含________(浓度)NaCl的废水。用该耐盐菌处理较高盐度工业废水时,需要_________________(合理措施),才能达到理想效果。

            • 5.

              人们的日常生活与发酵技术密切相关。柿子经过发酵可制成柿子醋,以下是柿子醋制作的流程:柿果→挑选→清洗→去皮→去核→脱涩处理→切块→压榨→柿汁→灭菌→酒精发酵→醋酸发酵→灭菌→陈酿→淋醋→过滤→成品。请回答:

              (1)脱涩过程可以用成熟的苹果、梨等水果释放的____________(气体)促进柿子成熟。

              (2)将压榨后的柿汁加热到80℃保持10~20分钟的目的是                                      。酒精发酵可添加活性干酵母进行,发酵的原理是                                                                                           (写出反应式)。

              (3)若醋酸发酵时需扩大培养醋酸菌种,实验室常用的接种方法是____________和______________。接种前应对培养皿、接种环和培养基进行灭菌,方法分别是​                                      ,接种时应在火焰附近进行,同时需设置空白培养基做对照,原因是                                                                                                                  

            • 6.

              某研究小组尝试制作蓝莓果酒和蓝莓果醋,并探讨提取花青素的方法。请回答下列问题:

              (1)为提高果酒的品质,需先获得纯净的酵母菌菌种。吸取1 mL酵母菌样液,在105稀释倍数下统计各平板上生长的平均菌落数为32,涂布时所用稀释液体积为0.1 mL,则1 mL样液中的菌株数________个。

              (2)酿制蓝莓果酒前不需要对蓝莓进行严格的消毒以除去杂菌,这是因为在____________________条件下,绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制。发酵时一般要先通气,其目的是______________________________。果汁发酵后是否有酒精产生,可在酸性条件下用橙色的________进行检验,若溶液颜色变成________证明有酒精存在。

              (3)酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现酸味,尤其是气温高的夏天,其原因是_______________________________________。

              (4)查阅资料得知,花青素是水溶性色素,在pH小于3.0条件下比较稳定,在60 ℃以下热稳定性较好。溶剂萃取法是最常用提取方法,萃取剂宜选用________(填“乙醇”或“乙醚”),将萃取相关过程的pH控制在________左右可有效地保障萃取成功。

            • 7.

              尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题:

              成分

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              含量

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              (1)该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_________________。

              (2)该培养基可以选择出分解尿素的细菌,原因是___________________________。

              (3)某同学用0.1ml的稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为:231、212、256,则每克该土壤样品中的菌落数为___________。

              (4)若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,可以向培养基中加入__________________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高,pH升高的原因是__________________________。

              (5)细菌的数目可以通过滤膜法来测定,例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,在该培养基上,大肠杆菌的菌落呈现__________,根据培养基菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。

            • 8.

              请回答下列问题:

                (1)果酒制作过程离不开酵母菌,其新陈代谢类型为________型。葡萄酒的自然发酵过程中,菌种主要来自于附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。如果要从中分离纯化酵母菌,最常用的接种方法是________和稀释涂布平板法。葡萄酒制作成功与否,经发酵后需用酸性条件下的___________来检测。

                (2)泡菜制作离不开乳酸菌,其在无氧条件下,将葡萄糖分解成___________。腐乳制作过程中,卤汤是由酒及各种香辛料配制而成,酒含量一般控制在_________左右。

                (3)醋酸杆菌属于___________核生物,其细胞结构中__________(填“含有”或“不含有”)线粒体。

                (4)有人想提取橘皮精油获取利润,一般提取橘皮精油的方法是_________法,之所以不采取水蒸气蒸馏法,是因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分___________等问题。

                (5)要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法。如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入____________,可用来鉴定分解尿素的细菌。

            • 9.

              我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测,操作简图如图甲,伊红美蓝培养基配方如图乙。


              回答下列相关问题:

              (1)图甲中滤膜的孔径应______(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发,对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌? ____________________________________________。

              (2)配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入_________(一种营养成分),以及_________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从物理状态分,该培养基属于______培养基。从功能上划分,该培养基属于______培养基。

              (3)该小组通过统计______的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际______(“偏高”或“偏低”),理由是____________________________。

            • 10. [生物——选修l:生物技术实践](15分)

              将没有吃完的西瓜,盖上保鲜膜后放入冰箱,是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上,有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,研究细菌的种类和数量。

              (1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有水、碳源、                   。一般采用            法对培养基进行灭菌。

              (2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板           (填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用          法接种。接种时,为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在         附近进行。

              (3)在培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,说明西瓜的浸出液中有                    (填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多,说明西瓜被细菌污染的程度越         (填“高”或“低”)。

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