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          50条信息

            • 1.

              研究人员分别成功地从土壤中筛选到分解纤维素和尿素的微生物,请就从土壤中获得该两种分解菌的过程,回答以下问题。

              (1)对于筛选土壤细菌所用的培养基,常用的灭菌方法是__________。

              (1)纤维素酶是纤维素分解菌中的一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和______酶。细菌可以分解尿素是因为其细胞中能产生__________酶。

              (2)纤维素分解菌分离过程中,完成土壤取样和选择培养后,需经__________,再将样品涂布到用以__________纤维素解菌的培养基上。涂布所用涂布器使用前要进行灼烧以达到__________(消毒/灭菌)的目的。

              (3)为了进一步鉴定尿素分解菌,可在以尿素为唯一__________的培养基中加入__________指示剂,如果指示剂变红,就可以准确鉴定。

            • 2. 纤维素分解性细菌是能分解纤维素的细菌。这类细菌多见于腐植土中,下面是分离纤维素分解菌的实验流程。

              土壤取样→①→梯度稀释→接种到②→挑选产生透明圈的菌落

              (1)以上实验流程中①是_________,①过程中使用的培养基是___________(液体培养基、固体培养基);②是__________________。

              (2)过程②用到的培养基中加入了一种染料与______形成红色复合物,刚果红染色法有两种,一种是先培养__________,再加入刚果红进行颜色反应;另一种是在________加入刚果红。

              (3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶,该酶是一种复合酶至少包括_____________________,并最终把纤维素分解成______________。

              (4)某实验小组为了研究pH对纤维素分解菌产生的纤维素酶活性的影响,将纤维素分解菌分别接种在pH不同的刚果红—纤维素培养基中,通过观察出现透明圈的最早时间和24h后透明圈直径的大小来判断纤维素酶活性的高低,该实验小组设置了pH分别为6、7、8的三组实验进行观察,得到了如下的实验结果:

              pH

              出现透明圈的最早时间(h)

              24h后透明圈的直径(cm)

              6

              6

              4.42

              7

              10

              3.66

              8

              24

              1.33

              通过上述结果可知,该实验的自变量是_______,因变量是________和____________,纤维素分解菌更适合在偏_______(填“酸”、“碱”或“中”)性环境下生长。

              (5)纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_________进行定量的测定。

            • 3.

              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株.回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 _________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于 ________培养基.
              (2)培养基配制好以后在接种前必须进行 ________________,为了检测灭菌效果,应该 ________________________________________________________________________.
              (3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 _________________________________.
              (4)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈越大说明该菌株的降解能力 _______。
            • 4.

              (1)亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物—— _________。

              (2)倒平板时,要将冷凝后的平板倒置的原因是___________________________ 。

              (3)统计微生物数目常用的两种方法是_________________和_________________。

            • 5.

              泡菜是很多人喜爱的美食,泡菜的制作过程离不开乳酸菌。请回答以下相关问题。

              (1)制作泡菜时可用陈年泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。首先用________对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是________。制作泡菜时常用比色法对亚硝酸盐含量进行测定,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色化合物。

              (2)分离纯化所用的固体培养基中往往加入碳酸钙,推测其作用有___________和中和产生的乳酸(或酸)。分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。

              (3) 要测定泡菜液中乳酸菌的数量,可以用抽样检测法或________法,用后一种方法接种培养后可得到下图中_______(A / B)所示的结果。

            • 6.

              实验室通常需要对目的菌种进行纯化。回答以下关于微生物实验室培养的有关问题。

              (1)获得纯净培养物的关键________________________。在无菌技术中,对操作者用酒精擦拭双手属于________,对金属用具、玻璃器皿、培养基等要进行灭菌,其中,培养基只能用__________灭菌。

              (2)通常在某一环境中微生物有多种并混合在一起,若要对某种微生物进行纯化,最常用的方法是平板划线法和__________________。使用平板划线法时,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是______________________。

              (3)制备培养基的操作步骤是_____________________。(用下列字母排序)

              a.倒平板 b.计算     c.溶化      d.称量     e.灭菌

            • 7.

              为了得到普洱茶中产蛋白酶的微生物,研究人员进行了一系列筛选、检测。

              (1)研究人员称取普洱茶1g,加入_____________________,制备稀释102倍的茶叶水。再将茶叶水进行梯度稀释,获得103、104、105倍的稀释茶叶水。取100μL稀释茶叶水,用_______________________法接种到奶粉培养基,37℃条件下培养4—5天,在培养基中选择菌落周围的__________________较大的菌株作为目的菌株。

              (2)将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养。已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质,因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量。先用__________________________绘制标准曲线,再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值,与标准曲线比较,计算出该茶汤中游离氨基酸的量,氨基酸含量高的,即为____________________的菌株。该实验中应测定_________________的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量,作为对照组的数据。

            • 8.


              一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度.各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为 ______
              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是 ______
              (3)接种技术的核心是 ______ .在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步 ______ ,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.实验结果如图显示的A~E五种菌株中, ______ 是最理想菌株.

            • 9.

              某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

              (1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养主要提供了 ________ 和______。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是_____和水。

              (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_______。

              (3)在接种操作过程中,为防止杂菌污染,需对接种空间和操作者的衣着和手等进行________(消毒、灭菌);该小组可采用 ________ 或 ________ (接种方法)检测水样中的细菌含量。在接种前,随机取若干灭菌后的空平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是检测平板培养基_________是否合格;

              (4)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养,温度设定在37℃。为明确培养基的灭菌效果和接种中无菌操作的是否规范,使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

              (5)培养20小时后,观察到平板上有5种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有____种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越_______。

              (6)该小组将得到的某菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的_______的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高培养液中__________的利用率。

              (7)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐_______细菌。

              (8)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

            • 10.

              艾弗里等人的肺炎双球菌体外转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,回答下列问题:

              (1)科研人员在实验室验证了艾弗里的实验,为了更直观的观察到培养基内有无转化发生,用于体外培养肺炎双球菌的培养基应选择___________(“固体”或“液体”),如果选用牛肉膏蛋白胨培养基培养,牛肉膏的作用是___________,接种方法为____________。

              (2)为确保操作环境(接种室、接种箱、超净工作台等)无污染,应采用___________消毒,为加强消毒效果还应喷洒适量的______________等化学抑菌剂。

              (3)接种后经过恒温培养24小时后,可通过________________________现象确定发生了肺炎双球菌的“转化”。

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