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            • 1.

              酵母菌是中学生物实验的常用材料,也是很多发酵食品制作必需的菌种。请回答下列问题:

              (1)酵母菌便于用来研究细胞呼吸的不同方式,原因是            

              (2)如果需要从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分离到较纯的酵母菌,步骤如下:在采集到的土壤中加入           ,搅拌、过滤得到土壤浸出液,取少许土壤浸出液涂布到培养基表面,置于            条件下进行选择培养。

              (3)实验室中制作固定化酵母细胞,配制海藻酸钠溶液时,为了防止海藻酸钠焦糊,最好采用            加热。如果海藻酸钠溶液浓度过低,则制得的凝胶珠颜色偏           ,固定的酵母菌数目偏            

              (4)实验室中用血细胞计数板对培养液中酵母菌进行计数时,为了减少实验误差,采取的措施有            (答两点)。

            • 2. 在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数.
              (1)如图是利用 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面.
              (2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O.若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述 成分,并加入 ,以补充 源.
              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量.在对应稀释倍数为106培养基中,得到以下统计结果:甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,平均值248;乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;在三位同学统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确 .
              (4)若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233,那么每毫升样中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL) 
            • 3. 酵母菌是日常生产和生活中应用极其广泛的一种微生物.下图是有关酵母菌的实验操作.请据图回答:

              (1)实验中试管用滤膜封口,其目的是  , A.C过程所采用的接种方法分别是 .
              (2)E过程利用血球计数板制片时,操作步骤是  , 多余的培养液用滤纸吸去.
              (3)G过程利用酵母菌进行果酒制作,为适当提高果酒的生产速率,进气口应 ,制作好的果酒,还可继续生产果醋,用果酒制作果醋的原理是 (写化学反应式).
              (4)H过程进行酵母细胞固定化的方法是 ,在用注射器将海藻酸钠和酵母细胞的混合液滴加到X溶液中时,应注意控制好
            • 4. 自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐,对水体有一定的净化作用.请回答:
              (1)培养硝化细菌时,将含有固体培养基的培养皿倒置的目的是 .培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长提供 ,培养基中没有加入有机碳,从功能上看这种培养基属于培养基.
              (2)硝化细菌纯化并计数时,对照组应该涂布等量的 .若实验组每个平板中的菌落数都超过了300,应对样本菌液进行 处理.
              (3)实验:探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小.取含铵盐的液体培养基均分成 等分,其PH值可依次调节为 ,培养相同的时间后,可通过测定培养基中的 来判断硝化细菌分解能力的大小.
            • 5. 纤维素酶的成本能否下降,是能否实现乙醇工业化生产的关键因素.纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取.某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养.
              ①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在 环境采集.
              ②以下是一种培养基配方:纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4•7H2O1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4•7H2O0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到1000mL).
              该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度,其原理是培养基中 是主要碳源,有利于纤维素分解菌生长,同时抑制其他微生物生长.
              ③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基上加入刚果红染液,将筛选获得的菌液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上,然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养.
            • 6. 茶饮料主打“健康牌”,极少添加人工合成的色素、香精等添加剂,更多利用从植物中提取的天然成分.请回答:
              (1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料,由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生.纯化菌种时,在固体培养基上常用 法接种菌种.在接种活菌前,将红茶糖液煮沸后冷却,煮沸的目的是 
              (2)茶饮料所用的胡萝卜素,通常采用 法从胡萝卜中提取;提取后常用 法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定.
              (3)茶饮料所用的植物芳香油的提取流程如下:茉莉花+水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→加无水硫酸钠→过滤→茉莉油过程A表示 ,向粗提精油中加入无水硫酸钠的目的是 
              (4)从茶叶中分离提取某种氧化酶,常采用 法,其原理是蛋白质分子的大小、形状和所带 的不同,会产生不同的迁移速度.
            • 7. 某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下.将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用.
              KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂
              1.4 g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g
              (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌? (填“能”或“不能”),原因是 .
              (2)培养基用 方法灭菌,培养皿用 方法灭菌,待培养基冷却到 ℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在 附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止 ,以免造成污染.
              (3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用 法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的 就能大约推测出样品中活菌数.
              (4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染.对于固体培养基应采用的检测方法是 
              (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散.
            • 8. 井冈霉素是我国目前防治水稻纹枯病的主导农药,由于多年的单一使用,部分地区纹枯病菌对其产生了不同程度的抗药性,迫切需要研发有类似效果的新型替代生物农药.从细菌M18中提取的申嗪霉素能有效抑制水稻纹枯菌,与其它农药相比对人体和动物安全性高.为了开发更稳定、高产的新型菌株,科研人员进行了以下研究.请回答下列问题:
              (1)筛选菌株选择 (健康/患纹枯病)的水稻植株的根切成小段放入液体培养基中培养24h后,取适量培养液涂布于琼脂平板上,培养5天后,挑选形态不同的  , 对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,培养3天后,观察纹枯菌的生长,根据 选出编号为P12的理想菌株.
              (2)鉴定菌株P12所属的细菌类型提取P12基因组DNA,扩增其16S rDNA(能体现不同菌属之间的差异),扩增过程需要的酶有 ,还需要特定的  . 对其测序后确定该菌株所属细菌类型.
              (3)检测P12的细胞毒性
              用人肺癌细胞系A549作为指示株系,在37℃恒温培养箱中培养.通入的空气应含 ,培养液中含少量胎牛血清,目的是 .2h后分别将相同浓度的P12、M18和DH5α(人体肠道内共生的大肠杆菌)菌液5μL加入A549细胞培养液中,4h后测定吸光值,以表示乳酸脱氢酶(LDH)的释放量.LDH是活细胞内含有的酶,当细胞受到细菌攻击时,细胞膜的 改变,LDH释放至细胞外.测定结果显示,P12对A549细胞的毒性 
              (4)部分地区的纹枯菌对井冈霉素产生抗药性的原因,是由于 对细菌进行长期的选择,使细菌的 发生了改变的结果.
            • 9. MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”,对青霉素等多种抗生素有抗性.为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响,某兴趣小组的实验设计及结果如表.
              组别培养基中的添加物MRSA菌
              1100µg/mL蛋白质H生长正常
              22µg/mL青霉素生长正常
              32 µ g/mL青霉素+100lµ g/mL蛋白质H死亡
              请回答下列问题:
              (1)青霉素的用量是该实验的 变量.应保持 ,目的是 
              (2)第2组和第3组对比表明MRSA菌对有抗性, 能杀死MRSA菌.
              (3)蛋自质H不是新型抗生素,理由是 .
              (4)测定培养液中MRSA菌的活菌数量,不宜在显微镜下用直接计数,适合选用 法进行计数,原因是直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的RSA菌的总数,而用涂布法进行计数,计数的是菌落数,一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌.
            • 10. 一研究小组测定了某河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作来调查其水质状况.回答下列问题:
              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量.在涂布接种前,随机取若干 后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目是
              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌.操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线.这样做的目的是 
              (3)示意图A和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果.

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养.结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快.分析其原因是:振荡培养能提高培养液的 的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率.
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