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            • 1.

              下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              指示剂

              琼脂

              含量(g)

              10.0

              5.0

              5.0

              2.0

              0.2

              12.0

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____________。

              (2)若根据用途划分,该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?_____________。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基进行________。

              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:________和_________,




              (5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________。

              A.制作果酒  B.由果酒制作果醋    C.制作泡菜     D.制作腐乳

            • 2.

              (I)大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌,请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题:

              (1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时,通常将样品进行一系列的梯度稀释,将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,然后记录菌落数量,这种方法称为_____________。判断下面所示的4个菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是__________________。


              (2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组?__________(填“需要”或“不需要”),其原因是需要判断培养基___________,对于固体培养基应采用的检测方法是将________________的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)处理;操作者的双手需要进行清洗和________________;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使其内蛋白质变性,还能损伤它的____________的结构。

              (4)检测大肠杆菌实验结束后,使用过的培养基及其培养物必须经过________________处理才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              35.(II)   根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

              (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有________和________。

              (2)质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:

              AATTC……G

              G……CTTAA

              为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是________。

              (3)反转录作用的模板是____________,产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用________技术。

              (4)基因工程中除质粒外,________和______也可作为载体。

              (5)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_________________________。

            • 3.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A 。研究人员用化合物 A 、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。



              (1)培养基中加入化合物 A 的目的是             ,这种培养基属于       培养基。 

              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的           。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是               

              (3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是                 。 

              (4)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是__________,操作时采用       灭菌的方法。 

              (5)某同学计划统计污水池中 “ 目的菌 ” 的活菌总数,应用             方法统计,他选用 10-4 、 10-5 、 10-6 稀释液进行平板划线,每种稀释液都设置了 3 个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是                ,此对照实验的目的是                              

            • 4.

              为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:

              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每毫升水样中的活菌数为________。

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。制备培养基前,培养皿最好通过________灭菌。操作时,接种环最好通过________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是________________。

              (3)示意图A和B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种水样培养后得到的结果。

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的________的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高________的利用率。

            • 5.

              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________________为唯一碳源的固体培养基土,从功能上讲,该培养基属于___________培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_________和________。

              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈说明该菌株的降解能力___________。

              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、____________和_________。无菌技术要求试验操作应在酒精灯______________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

            • 6.

              皮肤作为人体最大的器官,拥有达1.8m2的表面积,其主要功能是作为物理屏障,保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时,皮肤也是人体与外界环境接触的部位,因此常驻有各类微生物,包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题:

              (1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同,因此可以利用_________(填“固体”或“液体”)培养基来培养,通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

              (2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______;灭菌后,待培养基冷却至______℃左右时,在酒精灯火焰旁倒平板;待平板冷却凝固后,需要将平板____________。

              (3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中,使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,目的是____________。

            • 7.

              某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

              (1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养主要提供了 ________ 和______。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是_____和水。

              (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_______。

              (3)在接种操作过程中,为防止杂菌污染,需对接种空间和操作者的衣着和手等进行________(消毒、灭菌);该小组可采用 ________ 或 ________ (接种方法)检测水样中的细菌含量。在接种前,随机取若干灭菌后的空平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是检测平板培养基_________是否合格;

              (4)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养,温度设定在37℃。为明确培养基的灭菌效果和接种中无菌操作的是否规范,使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

              (5)培养20小时后,观察到平板上有5种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有____种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越_______。

              (6)该小组将得到的某菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的_______的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高培养液中__________的利用率。

              (7)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐_______细菌。

              (8)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

            • 8.

              请回答下列问题:

              (1)果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌的代谢类型是________;多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是________,泡菜的制作离不开________;

              (2)醋酸菌发酵过程,当缺少糖源时,醋酸菌将________变成________,再将其变为________;

              (3)在实验室培养微生物时,获得纯净培养物的关键是________;

              (4)在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的________将尿素分解成了________,从而使培养基碱性增强。

              (5)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成________色复合物,用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌对,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________,这种培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。

            • 9. 随着环境污染的加剧和石油危机的出现,越来越多的国家使用乙醇作为替代燃料。生产中玉米和麦草的秸杆可以用来生产燃料乙醇,已知秸秆的主要成分是纤维素,请回答下列问题。
              (1)人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解,纤维素分解菌多分布在______的环境中。该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶,一般包括三种成分:_________、_________.和______。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。(2)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制______培养基,该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的________.
              (3)样品经过梯度稀释后,要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上,在培养基中需要加入的特殊染料是______。当形成菌落以后,可以根据菌落周周围是否产生

              ____________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器______(填“消毒”或“灭菌”)处理。

            • 10.

              酸奶是以牛奶为原料,经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌,经发酵制成的。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题,为检测自制酸奶是否被杂菌污染,进行如图所示操作。回答下列问题:

              (1)制备牛肉膏蛋白胨培养基,倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是________。

              (2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,涂布前要将涂布器_______才能涂布。如果培养基上出现________的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。

              (3)在恒温培养箱中培养一段时间后,3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个,则可以推测酸奶中每毫升含菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是_______________________。

              (4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,可挑取乳酸菌菌落,无菌条件下培养进一步分离纯化,甲同学按下图④进行操作,据图分析,采用的接种方法称为______,其操作的两处不当之处分别是_________、_________。在老师的指导下,该同学按正确的方法重新操作,则经培养后菌落的分布情况最可能是图中的_______。

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