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            • 1． 细菌在自然界中数量多少是环境污染程度的重要指标之一．某校生物兴趣小组为了调查当地一条河流中细菌的污染情况而进行了实验．请回答与此实验相关的问题：
              （1）牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，该小组同学打算配制固态培养，在配制时需添加 ______ 作凝固剂．培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 ______ 和 ______ ．除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 ______ 和 ______ ．
              （2）下列材料或用具中，需要灭菌的是 ______ ；需要消毒的是 ______ ．（填序号）
              ①培养皿      ②玻璃棒、试管、锥形瓶       ③实验者的双手
              （3）实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到灭菌效果．高温灭菌可分为 ______ 和 ______ 两大类，其中 ______ 灭菌效果好．
              （4）若要统计每毫升河水样品中活菌数目，可以根据河水样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 ______ 就能大约推测出样品中活菌数．
              难度：较易
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            • 2． 某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：
              （1）分离纯化乳酸菌时，首先箝要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．梯度稀释的目的是 ______ ．
              （2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用除了可以中和产生的乳酸以外，还可以 ______ ．分离纯化时应挑选出 ______ 的菌落作为候选菌．
              （3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为 ______ 个．
              （4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是 ______ ．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的 ______ ．
              难度：较易
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            • 3． 回答下列有关微生物的问题．
              如表所示为某微生物培养基的配方．
              成分 NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4•7H2O FeSO4 （CH2O） H2O 抗生素
              含量 3g 1g 0.5g 0.01g 0.05g 30g 1000mL 0.1万单位
              （1）依物理性质，该培养基属于 ______ 培养基，依功能看，该培养基属于 ______ 培养基．
              （2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是 ______ ．下列对培养基进行灭菌的最适方法是 ______ 灭菌．
              A．高压蒸汽     B．紫外灯照射     C．加入适量的广谱抗生素     D．过滤
              （3）若用该培养基培养分解纤维素的细菌，应除去的物质有 ______ ，应加入的碳源是 ______ ．
              （4）图甲是细菌纯化培养结果．据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是 ______ ．
              （用编号表示）．产生每个菌落的最初细菌数目是 ______ 个细菌．
              （5）研究者在接种操作培养过程中，得到了一个菌落分布如图乙所示的平板．该接种方法是 ______ ；推测接种时可能的操作失误是 ______ ．
              难度：较易
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            • 4． 请根据所学知识，回答下列问题．
              （1）制作果酒果醋的两类微生物分别是 ______ ．
              （2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的 ______ ．若实验组每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液体进行 ______ 处理．
              （3）制作腐乳的微生物主要是 ______ ，发挥作用时主要利用其产生的 ______ （填酶的种类）．
              （4）将提取的胡萝卜素粗品通过 ______ 法进行鉴定，观察结果时会发现标准样品位于展开剂前沿，萃取样品往往比标准样品多出现一条层析带，其原因是 ______ ．在必修中“叶绿体中色素的提取和分离”的实验中也用到了类似的方法，目的是 ______ ．
              难度：较易
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            • 5． 生活饮用水巳经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物．供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染．因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的．我国生活饮用水水质标准（GB5749-85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L．
              （1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为 ______ ．
              （2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？为什么？ ______
              （3）如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为 ______ ．
              （4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用 ______ 法灭菌， ______ （可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染．
              （5）如果要测定水中的病毒种类，可以用 ______ 技术使其遗传物质扩增，然后用 ______ 技术进行鉴定．
              难度：中等
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            • 6． 从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．
              （1）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 ______ 的培养基，并在 ______ 条件下培养．
              （2）接种前要对培养基进行 ______ 处理．在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在 ______ 条件下进行．
              （3）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．如培养噬盐菌的菌样应从 ______ 环境中采集．
              （4）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法．
              获得图A效果的接种方法是 ______ ，图B效果的接种方法是 ______ ．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 7． 2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学或医学奖的是爱尔兰科学家威廉一坎贝尔和日本药物科学博士聪大村，他们二人的贡献是发现了一种新的药物，名为阿维菌素，其衍生产品降低了河盲症和淋巴丝虫病的发病率，同时还能有效对抗其他寄生虫病，治疗效果显著．聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株，在实验室内通过成千上万链霉菌培养物筛选出一些较有发展前途的菌株，这就是阿维菌素的来源．
              （1）制备链霉菌培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是调整pH和 ______ ，对培养基进行灭菌的常用方法是 ______ ．
              （2）图①是在纯化过程中通过 ______ 法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，共需要灼烧接种环 ______ 次．图②表示的是用 ______ 法接种培养后得到的结果．
              （3）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现，表明菌已分离．在此过程中，正确的操作是 ______ ．
              A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
              B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
              C．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风
              D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
              （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高 ______ 的利用率．
              难度：较易
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            • 8． 科学家把c-Myc等4个关键基因通过逆转率病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多能干细胞-iPS细胞，此类细胞具有和胚胎干细胞类似的功能，可以发育成人体的各种组织和器官，同时规避了胚胎干细胞研究面临的伦理和法律障碍．请回答下列问题：
              （1）iPS细胞在体外培养时要通入的气体除氧气外，还要含有5%左右的 ______ ，起其作用是 ______ ．
              （2）获得胚胎干细胞的方法可用 ______ 技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成 ______ ，并使用从中获得的胚胎干细胞．在培养中要根据需要加入相应的小分子物质以促进其 ______ 得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为 ______ ．
              （3）从免疫学角度分析，异体器官对于受体来说属于 ______ ．iPS细胞培育得到的特殊组织或器官移回病人体内，与异体器官移植相比，最大的优点是 ______ ．
              难度：较易
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            • 9． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10g
              尿素 1g
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？ ______ ，理由是 ______ ．
              （2）培养基中氮源是 ______ ，这种培养基在功能上属于 ______ 培养基，目的是只允许能合成 ______ 的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用 ______ 法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是 ______ 法．
              难度：中等
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            • 10． 根据原料不同，生物乙醇可分为以淀粉类物质为原料的第1代生物乙醇和以秸秆等纤维素为原料的第2代生物乙醇．两者的生产过程都需要多种微生物参与，且在较高温度下反应能提高产率．
              （1）生产第1代生物乙醇时，首先利用微生物或酶将淀粉材料彻底水解为 ______ ，才能利用酵母菌在 ______ 条件下将其转化为乙醇．
              （2）生产第2代生物乙醇时需要纤维素分解菌，为此，某同学设计了两种培养基．甲培养基含纤维素粉5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g、无机盐适量；乙培养基含CMC-Na10g、酵母膏1g、琼脂15g、土豆汁100mL、无机盐适量．
              ①在上述 ______ （填“甲”或“乙”）种培养基上能够筛选出纤维素分解菌的单菌落，筛选该菌落时常需要向该培养基中添加 ______ ；另外一种培养基的作用是 ______ ．
              ②从生态系统的成分上看，纤维素分解菌属于 ______ ；它的同化作用类型是 ______ ．
              （3）在纤维素分解菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 ______ 、酸碱度和渗透压等条件．
              （4）培养纤维素分解菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法 ______ ．
              （5）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过 ______ 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
              难度：较易
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