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            • 1. 请回答下列与玉米秸杆处理有关的问题:
              (1)秸杆的主要成分是纤维素,牛本身没有相应的消化酶,但胃内有一种微生物可以帮助其分解,这种微生物与牛的种间关系为______.尿素并不是牛马的必须营养,过多甚至有害,但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素,据此题的信息你认为尿素的作用是______.
              (2)分离纯化能分解秸秆的微生物时,需对培养基和接种针进行灭菌处理,常用的方法依次是______.
              (3)将玉米秸秆人工收获后,将其铡碎、压实、密封储藏.秸杆经此处理后,气味微酸芳香(主要由乳酸菌代谢产物造成).上述“压实密封”的目的是:人为造就一个______环境,利于乳酸菌的______.用这样处理后的秸杆饲喂牲畜的好处是______.
              (4)下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程图:

              步骤(二)中选择培养基的营养物质的特点是______,步骤(三)中稀释的目的是______.
            • 2.

              酸奶是以牛奶为原料,经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌,经发酵制成。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题,为检测自制酸奶是否被杂菌污染,进行如图所示操作。回答下列问题。


              (1)制备牛肉膏蛋白胨培养基,倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是________。

              (2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,涂布前要将涂布器________才能涂布。如果培养基上出现________的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。

              (3)在恒温培养箱中培养一段时间后,3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个,则可以推测酸奶中每毫升含菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是________。

              (4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,进一步分离纯化乳酸菌的方法是________,该操作中常使用的接种工具是________。若培养后获得的某个平板,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成第一条线上无菌落的可能操作失误有________、________。

            • 3. 农作物收获后,燃烧秸秆会造成大气污染,如何回收利用是我国面临的一个重要问题.某同学设计从土壤中分离纤维素分解菌→分解秸秆,获得糖液→发酵生产乙醇,从而实现再次利用,请回答以下问题:
              (1)将从土壤中获得的微生物培养在以 ______ 为碳源,并在加入 ______ 的培养基上筛选周围有 ______ 的菌落.
              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ 和 ______ .采用固体平板培养细菌时,需要倒置培养,其原因是 ______ .
              (3)发酵阶段需要的菌种是 ______ ,在产生乙醇时要控制的必要条件是 ______ .
            • 4. 反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官--瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源.以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程.

              (1)进行①过程的目的是 ______ ;②过程所使用的接种方法是 ______ .用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目,原因是 ______ .
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,制备该培养基的步骤是:计算→ ______ →灭菌→倒平板.由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供 ______ 的条件.
              (3)酶对化学反应的催化效率称为酶活性,图示的酶活性的高低可用 ______ 中 ______ 的减少量来表示.
              (4)萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热,采用水浴加热的原因是 ______ .
              (5)如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用 ______ 方法,在对外植体进行接种前,需要进行制备MS 固体培养基和 ______ 两项工作.培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 ______ (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化.
            • 5. 回答下列关于微生物和酶的问题.
              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图1所示.

              (1)①过程为梯度稀释其目的是将聚集在一起的微生物分散成 ______ 细胞,②过程的接种方法为 ______ .
              (2)Ⅰ号培养基属于 ______ (按功能分),该培养基中除了加入淀粉外.还需加入另一种重要的营养成分 ______ (选择序号)
              A.琼脂 B.葡萄糖   C.硝酸铵D.碳酸氢钠
              (3)一般对配制的培养基采用 ______ 灭菌.灭菌是为了杀死体内外所有微生物,包括 ______ .
              (4)从Ⅰ号培养基挑出菌落接种到Ⅱ号培养基时,向Ⅰ号培养基加入碘液,选择菌落周围蓝色浅而且范围 ______ 的菌落挑出.
              在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定.图2中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比.将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最适温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图2中的曲线②.

              (5)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是 ______ .
              A.40~50℃B.50~60℃C.60~70℃D.70~80℃
            • 6. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行 ______ 处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在 ______  的培养基中加入 ______ .
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ .
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为 ______ ,该方法往往比活菌的实际数目偏 ______ (高/低).
            • 7. 在工业上常利用微生物将木屑、废纸(主要成分为木质纤维)转化为生物乙醇.基本流程如图所示,请据图回答:
              (1)微生物筛选常用的接种方法是______和______.筛选微生物X菌种的培养基中,应以______为唯一碳源,在培养基中加入______,并根据水解圈的大小来筛选微生物X.
              (2)从微生物X中提取的纤维素酶液可通过______法进一步纯化,判断纯化的蛋白质是否达到要求,可用______法对样品进行纯度鉴定.若想使该酶液能反复利用,常采用______的方法进行固定.
              (3)微生物Y是______.在生产生物乙醇的工艺中常对其进行固定化,采用的方法是______.在酸性条件下,可用______来检测发酵产物中是否含有酒精.
            • 8. 微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能讲解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通过项油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术.以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作.请分析回答:
              (1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自 ______ 的土壤.
              (2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用 ______ 培养基,常用的接种方法是 ______ 或
              ______ .
              (3)接种后,必须密封培养,其原因是该类微生物的异化作用类型是 ______ .培养一段时间后,在培养基上形成降油圈,此时选取降油圈 ______ 的菌落作为高效菌株.
              (4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220,则样品中微生物的数量为 ______ 个/mL.该统计结果 ______ (低于/高于)实际值.
            • 9. 紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用.研究人员从红豆杉中发现了一种具有产紫杉醇能力的内生真菌.为探究制备红豆杉内生真菌原生质体(不含细胞壁)的适宜pH和温度,进行了如下实验:①培养菌株,离心收集菌丝体,并用渗透压稳定剂洗涤两次;②将获得的菌丝体,分别置于不同pH或温度的培养液中,并加入适量酶液,震荡、摇匀后,每隔一段时间,取样、过滤、离心,用渗透压稳定剂洗涤两次后,收集纯化的原生质体.③统计原生质体数量,结果如下. 分析回答:
              (1)步骤②中,加酶液的目的是______,洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是______.
              (2)结果表明,制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是______、______.
              (3)检验原生质体再生能力,需要配制再生固体培养基,培养基灭菌后需要冷却到______℃左右才能用来倒平板.
              (4)实验中将收集到的原生质体浓度为30×106个/mL培养液先稀释104倍,再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养.一段时间后,统计得到的菌落数分别为:27、21、24.则原生质体再生率(能再生的原生质体数占全部原生质体的比例)约为______.
            • 10. 一研究小组测定了某河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作来调查其水质状况.回答下列问题:
              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量.在涂布接种前,随机取若干 ______ 后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目是 ______ ;
              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌.操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线.这样做的目的是 ______ .
              (3)示意图A和B中, ______ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果.

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养.结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快.分析其原因是:振荡培养能提高培养液的 ______ 的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高 ______ 的利用率.
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