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            • 1.
              十九世纪中期,法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今,形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题:
              (1)苹果酒清香、明快,风味清爽,它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生,可用 ______ 来检验。
              (2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物,通常所指的发酵条件不包括 ______ 。
              a温度控制    b溶氧控制    C.pH控制   d酶的控制
              (3)苹果酒在 ______ 的作用下,经过深层发酵可形成苹果醋;在此过程中要适时向发酵液中充气,原因是 ______
              (4)腐乳是用豆腐发酵制成,有多种微生物参与发酵,其中起主要作用的是 ______ 。在腐乳的制作过程中,从微生物培养的角度来看,豆腐应该属于 ______ 。
              (5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,乳酸菌仍然不能正常生长,还需要在培养基中添加 ______ 。应用平板划线法分离乳酸菌时,从第二次划线操作起,每次总是要从上一次划线的末端开始划线,并划线数次,其原因是 ______ 。
            • 2.
              尿素是一种重要的农业肥料,经微生物分解后能更好的被植物利用.某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌).培养基成分如下表所示.
              KH2PO4 NaHPO4 MgSO4•7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
              1.4g 2.1g 0.2g 10g lg 15g
              将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到100mL.实验过程如图所示:
              回答下列问题:
              (1)该培养基能筛选出目的菌的原因是______.
              (2)图中将细菌转到固体培养基上接种时,可采用的方法是______.初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定:在培养基中加入______指示剂,接种并培养初步筛选的菌种,若指示剂变成______色,则可说明该菌种能够分解尿素.
              (3)在实验中,下列材料或用具需要灭菌的是______,需要消毒的是______(填序号).
              ①培养细菌的培养基与培养皿
              ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管
              ③实验操作者的双手
              (4)在进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落.A同学的实验结果产生的原因可能有______(填序号).
              ①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
              (5)实验结束后,使用过的培养基应该进行______处理后,才能倒掉.
            • 3.

              下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              指示剂

              琼脂

              含量(g)

              10.0

              5.0

              5.0

              2.0

              0.2

              12.0

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____________。

              (2)若根据用途划分,该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?_____________。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基进行________。

              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:________和_________,




              (5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________。

              A.制作果酒  B.由果酒制作果醋    C.制作泡菜     D.制作腐乳

            • 4. 创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:_________________________________。

            • 5. 微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图示为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题。

              (1)实验过程中对培养基、培养皿和实验操作者的双手所采用的灭菌或消毒方法依次是___________、___________、___________。

              (2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________。

              (3)图示是利用____________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因是____________。

              (4)关于图示的操作方法和结果正确的是___________

              A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌  

              B.划线操作须在火焰上进行

              C.在5区域中才可以得到所需菌落    

              D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

            • 6.

              酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答:


              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜且容易产生酒味的微生物是___________。
              (2)本实验所用的培养基都需经_________________法进行灭菌。

              (3)在实验室中可采用下图所示的________法进行菌种纯化,在下图中 ______(填图中序号)区域更易获得单菌落.




              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持___________,理由是_________________________________。 
            • 7. 长木蜂有在蜂巢内储存蜂粮(主要是长木蜂咀嚼过的花粉)的习性,其储存的蜂粮在蜂室中能长期保存不变质。研究人员为筛选出蜂粮中具有抑菌作用的微生物,开展实验如下:
              (1)配置培养基。称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等营养物质,再加入                    和适量的水,配置牛肉膏蛋白胨培养基,其中可提供碳源的有                 。另配置适于乳酸菌生长的MRS培养基。
              (2)系列稀释操作。将一批盛有9mL水的试管作               处理:从三个蜂巢采集 蜂粮各lg,分别加入含有9mL水的试管中混匀,再进行梯度稀释处理。在此过程中,为使菌液与水混合均匀,可将移液管上的橡皮头(洗耳球)                           ;移液管不能重复使用的原因除了需要避免混合上一个稀释浓度的残留液会使稀释不准确外,还有原因是                 

              (3)涂布、培养和计数。将各稀释浓度的试管,分别吸取O.lmL,在两种培养 基上涂布均匀,并在适宜条件下培养。根据菌落的                   (至少写出三项) 等特征初步判断微生物的种类。若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51种微生物生长,在MRS培养基上最多有17种微生物生长,则实际蜂粮中的微生物种类                  (填“可能”或“不可能”)大于68种。

            • 8.

              (I)大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌,请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题:

              (1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时,通常将样品进行一系列的梯度稀释,将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,然后记录菌落数量,这种方法称为_____________。判断下面所示的4个菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是__________________。


              (2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组?__________(填“需要”或“不需要”),其原因是需要判断培养基___________,对于固体培养基应采用的检测方法是将________________的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)处理;操作者的双手需要进行清洗和________________;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使其内蛋白质变性,还能损伤它的____________的结构。

              (4)检测大肠杆菌实验结束后,使用过的培养基及其培养物必须经过________________处理才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              35.(II)   根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

              (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有________和________。

              (2)质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:

              AATTC……G

              G……CTTAA

              为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是________。

              (3)反转录作用的模板是____________,产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用________技术。

              (4)基因工程中除质粒外,________和______也可作为载体。

              (5)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_________________________。

            • 9.

              酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

              (1) 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌,其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等,从功能上分析,该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

              (2) 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时,需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

              (3) 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液,分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量___(多于/等于/小于)后者,其原因是________。

              (4) 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时,应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况,从表中看出,海藻酸钠的浓度应选用__g/dL。若利用固定化酶技术,它的优点是___________________。

              海藻酸钠质量浓度(g/dL)

              凝胶强度

              凝胶气泡量

              成球难度

              凝珠形状

              1.0

              没有

              较易

              扁圆形

              2.0

              少量

              圆球形

              3.0

              较多

              稍难

              有托尾

              4.0

              大量

              难成球形

            • 10.

              李斯特菌广泛存在于各类食品中,李斯特菌在李斯特菌显色培养基上培育时菌落会呈现蓝绿色。在目前发现的16种李斯特菌中单增李斯特菌是唯一对人有致病性的一种,与其他李斯特菌相比,单增李斯特菌还能合成并分泌磷脂水解酶,使培养基中的磷脂被分解而在单增李斯特菌菌落周围出现白色晕环。

              (1)与单增李斯特菌相比,其他李斯特菌不能合成并分泌磷脂水解酶的根本原因是_____________________。

              (2)现要检测某食品中是否含有其他李斯特菌和单增李斯特菌,进行了相关实验:

              ①将该食品样品加入经___________灭菌的李斯特菌选择培养液中培养,培养的目的是_________________。

              ②将经过培养的菌液接种到鉴定李斯特菌的培养基上,常用的接种方法有___________________。鉴定李斯特菌的培养与李斯特菌选择培养液相比,还需额外添加显色剂、__________和__________。

              ③将接种后的培养基置于适宜条件下进行培养。一段时间后若培养基上出现___________的菌落,则说明该食品中含有单增李斯特菌。

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