[生物——选修1：生物技术实践]

新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。请回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行________，这样做的理由是________。

（2）分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中会形成________。

（3）若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的________（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”），且要放置在________（填“－5”“－20”或“－100”）℃的冷冻箱中。若要短期保存乳酸菌，可将菌种接种到试管的________（填“溶液中”“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”），菌落长成后，将试管放置在________（填“－4”“0”或“4”）℃的冰箱中保藏。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以       为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于       培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即       和       。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力       。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、        和         。无菌技术要求试验操作应在酒精灯       附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

利用选择培养技术从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物

（1）本实验所需培养基的碳源为___________。

（2）①→③重复培养的目的是：_____________________________。⑥和⑦属于对照组的是_____组。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________________________________。

（4）某小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中__________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高____________的利用率。

（5）科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：

 突变株A不能在一般培养基上生长的原因是____________________。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是_________________________。

苹果酒、苹果醋、苹果汁等是人们餐桌上的常见食品。请结合相关知识回答以下问题： 

（1）如图所示是在苹果酒的基础上制作苹果醋的流程图。

过程②常用的发酵菌是               ，可以在食醋中获得，分离和纯化该微生物的方法如下：第一步：配制培养基。根据物理性质，培养微生物常用的培养基为                     。 

第二步：采用                  法对培养基进行灭菌处理。

第三步：                              。

第四步：培养温度控制在                。

第五步：挑选符合要求的菌落。

（2）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10^－4、10^－5、10^－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是              ，此对照实验的目的是证明              过程中是否被杂菌污染。

（3）苹果泥与果胶酶混合能提高苹果的出汁率并使浑浊的果汁变澄清，其原因是                                   。