人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有 ____________、_____________ 和灼烧灭菌。

（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________附近进行操作．接种后的培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_______培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的______使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_______。

（4）实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的________、________、pH等条件，抑制或阻止其他微生物的生长，能达到此目的的培养基称为________。

（5）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶．其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成____________。

（6）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成___________色复合物．用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的___________。

幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下，请回答：

（1）幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源，是因为能够合成______________________，培养基中加入酚红指示剂，若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现___________环带。

（2）上述培养过程中，能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是_____________________。

（3）采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，其原因是_____________________________________________。

（4）上述实验统计结果往往比原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数_______________（偏大、偏小、相同）。

回答下列(一)、(二)小题。

(一)请回答下列有关微生物培养、发酵过程中的相关问题。

(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用高压蒸汽灭菌方法灭菌，冷却后加入用_________漏斗过滤的尿素溶液。漏斗用后需用适宜浓度的___浸泡，再用蒸馏水冲洗，干燥后保存。 

(2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，可以用___(A.50%乙醇　B.70%乙醇　C.90%乙醇　D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或______中提取，配制这些微生物的培养基时需要将pH调至____。

(3)果酒制作果醋过程中，通入空气需要经过_____过滤。果醋发酵结束的标志是pH_____。 

(二)下图表示动物细胞克隆和制备单克隆抗体的相关过程，请回答相关问题：

(1)过程①常应用____方法导入重组诱导基因后得到干细胞；部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官，说明这些细胞具有____性。在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是__________。

(2)该过程中甲和乙细胞可经过生物诱导剂______的作用形成丙细胞。取一个丙细胞，放在含大量失去____的小鼠成纤维细胞的特定培养体系中培养，最后产生大量的细胞群，这种方法为____法。 

(3)下列关于经③和④过程得到单克隆抗体的叙述，错误的是_____。

A.该过程应用了细胞膜具有流动性的原理    B.该过程应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术

C.丙细胞要具有分泌多种抗体的能力   D.丙细胞的形成先通过筛选得到杂交瘤细胞，再进行抗体检验

如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：

（1）微生物培养时，选取_________________时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目．

（2）若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_________指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH____________，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖_________染液，10～15min后，倒去该染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现__________，说明此细菌能分解纤维素．

（3）在 10⁵ 稀释度下求出 3 个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数为_______________．

生物技术实践]某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）.培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答：

（1）培养基中加入尿素的目的是        ，原理是                                  。

（2）实验需要振荡培养，原因是                             。转为固体培养时，常采用                的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体。其中需要灭菌是                 （填序号）。

（4）分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.甲同学实验结果差异的原因可能有        

①取样不同    ②培养基污染    ③操作失误    ④没有设置对照

（5）以上表培养基培养“目的菌”后，加入指示剂酚红后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。得出该实验结论的理由是                    

（6）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h～48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中           倍的稀释比较合适。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有：高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和________________。

(2)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______________进行操作。接种后的培养皿____________于37℃的________________中培养。

(3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于____________培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的____________使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力______________。

(4)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数( )

A．多     B．少    C．相等      D．几乎为零

某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素和纤维素是否有分解作用，设计了实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌和能分解纤维素的细菌．

（1）分离分解尿素的细菌培养基的主要特点是                          。

在进行该实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的实验结果产生的原因可能有____________(填序号)
 ①由于供体动物不同 ②由于培养基被污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

（2）为了对分离出的分解尿素的菌种作进一步的鉴定，在原配置的选择培养基中加入      ，使其变红色，原因是细菌体内合成的___________将尿素分解为氨和CO₂，pH增高。

（3）在筛选纤维素分解菌的过程中,经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是        ，当形成菌落以后，可以根据菌落周围是否产生           来筛选纤维素分解菌。

（4）甲同学用稀释涂布平板法分离纯化细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最有可能的原因是          。

乙同学在实验时得到了如下图所示的结果,则纤维素分解菌位于         位置。

A.③     B.①②      C.②③            D.①②③