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            • 1. 日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题:

              (1)图中接种细菌的方法是_________。用该方法接种的目的是观察菌落的________和________。

              (2)图中用于培养细菌的培养基能够为细菌提供的基本营养物质是_______________________,为确定马桶按钮上大肠杆菌数目,需在培养基中加入__________________用于鉴别。

              (3)两个电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为可能原因有:

                  ①__________________________      ②____________________________

              (4)根据实验结果为了保证健康我们使用手机一段时间后应对手机进行______________。

            • 2.

              经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:


                  (1)过程①接种的方法是________________。待测培养皿中的培养基是___________(答“基本”或“完全”)培养基。

                  (2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_______________(答“基本”或“完全”)培养基上,原因是____________________。

                  (3)完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_________菌落(答“A”或“B”),原因是___________________。

                  (4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个平板中营养成分的差异是________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是__________,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

                  (5)临时保存该菌种时,可将菌种接种到试管的______上,在合适的温度下培养。长期保存时可采用________的方法。

            • 3.

              营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后,微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏,使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物,为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题:

              (1)过程①的接种方法为__________,与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比,待测培养皿中的特有的成分有__________。

              (2)进行②过程培养时,应先将丝绒布转印至基本培养基上,原因是__________。从__________培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。釆用影印法培养的优点是__________。

              (3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定,实验人员进行了如下操作:

              ①用接种针挑取__________(选填“菌落A”或“菌落B”)接种于盛有完全培养液的离心管中,28℃振荡培养1〜2天后,离心,取沉淀物用__________洗涤3次,并制成菌悬液。

              ②吸取lmL菌悬液加入无菌培养皿中,倾注15mL融化并冷却至___________℃的基本培养基,待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域,标记为A、B、C、D、E。

              ③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示),经培养后,观察生长圈出现的区域,从而确定属于何种氨基酸缺陷型。   

              组别

              所含氨基酸

              A

              组氨酸

              苏氨酸

              谷氨酸

              天冬氨酸

              亮氨酸

              B

              精氨酸

              苏氨酸

              赖氨酸

              甲硫氨酸

              苯丙氨酸

              C

              酪氨酸

              谷氨酸

              赖氨酸

              色氨酸

              丙氨酸

              D

              甘氨酸

              天冬氨酸

              甲硫氨酸

              色氨酸

              丝氨酸

              E

              半胱氨酸

              亮氨酸

              苯丙氨酸

              丙氨酸

              丝氨酸

              在上述鉴定实验中,发现在培养基A、D区域出现生长圈,说明该营养缺陷型菌株属于___________。

            • 4. 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着能降解苯酚的微生物.某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,请回答下列问题:

              (1)②中培养菌株的选择培养基中应加入________作为碳源,②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要测定②中活细菌数量,常采用______________法.

              (2)④为对照,微生物在④中不生长、在⑤中生长,④与⑤培养基的主要区别在于_______________;使用____________法可以在⑥上获得单菌落.采用固体平板培养细菌时进行倒置培养是为了防止                             .

            • 5.

              下图表示微生物培养与利用的相关实验技术,回答下列问题:

               (1)在培养基的制备过程中,A表示____________,B表示灭菌,对培养基灭菌常用的方法是_________。

              (2)D是微生物接种最常用的方法之一,它包括___________和_____________两步操作。

              (3)在筛选土壤中分解尿素的细菌时,所用培养基以尿素作为_______________;在统计菌落数目时,一般选择菌落数在 ___________________的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定,可在选择培养基中加入___________________指示剂,若指示剂变__________,则可初步鉴定该种细菌能够合成___________,分解尿素。

            • 6.

              土壤是“微生物的天然培养基”,下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程,请根据下图回答相关问题:

              (1)能分解尿素的细菌代谢类型为_____________,取样时一般_____(能/不能)从土壤表层取土样。
              (2)为分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用__________________________________的____体培养基进行分离,并加入________指示剂进行鉴别。为了提高实验结果的可信度,还需设置对照组。若要判断选择培养基是否起到了选择作用,对照组的设置是__________________________________;若要判断选择培养基是否被杂菌污染,对照组的设置是__________________________________。

              (3)若取土样5g,应加入___ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大,需要不断加以稀释,配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。随后将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上,用________将菌液铺开。这种接种方法称为_____________。
              (4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计呈_____色的菌落数,结果如下表,其中________倍的稀释比较合适。

            • 7.

              在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题

              (1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

              分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和________物质,以补充其生活所需的碳源和氮源。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,酚红由黄变红,使菌落周围呈现红色。

              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

              在三位同学的统计中,____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。

            • 8.

              塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害,塑料袋的自然分解需要20-1000年不等.2008年7月3日加拿大媒体报道:16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌,能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月,而且分解产物只有水和二氧化碳.伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”.以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程.请回答:

              (l)根据你的生活经验推测,伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于______.
              (2)图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的梯度稀释,目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞.从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个______.接种培养后,统计菌落数,通常活菌的实际数目要比统计的菌落数_______。

              (3)对培养基灭菌的常用方法是________________。接种前需要检测使用的培养基是否被污染,方法是__________________________。

              (4)I号培养基属于______培养基,其作用是使目的菌能“脱颖而出”.如图采用的接种方法为______.

              (5)使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多,若对目的菌进一步培养,则其增长呈____型曲线增长。Ⅱ号培养基中必须包含水、无机盐、______等基本营养成分.从物理性质来看,Ⅱ号培养基中________(填“不能”或“能”)添加琼脂.假设该同学发现培养基上细菌数目过多连成一片,说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因:__________________________;

            • 9.

              在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题:

              (1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得单个菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

              (2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O、琼脂。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和_____________。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,使菌落周围呈现红色。

              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

              在三位同学的统计中只有一位同学的统计结果是相对准确可信的,按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行_____________处理后,才能倒掉。

              (5)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量______,因为_______________. 

            • 10. (一)[生物——选修1:生物技术实践]
              I.苹果是特色水果之一,为对其进行深加工,某厂进行了苹果酒和苹果醋的研制,请回答问题.
              (1)制作果酒利用的菌种是 ______ ,属于生态系统成分中的 _______ .发酵一定时间后,观察到发酵罐内液面不再有______,说明发酵基本完毕.
              (2)若要检测是否产生了酒精可用________ 色的重铬酸钾试剂在_____条件下与乙醇发生反应,如果颜色变为___________色,说明产生了酒精.
              (3)制备果醋利用的菌种是_____________,其呼吸作用类型____________,该细胞结构中_____________(填“含有”或“不含有”)线粒体。在生产过程中,苹果酒和苹果醋发酵温度不同,前者的温度_____________(填“低于”或“高于”)后者。 II.随着社会的发展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严重.为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物,人们不断地进行研究.请回答与此筛选过程有关的问题:

              (1)一般来说,微生物生长过程中需要的营养物质包括________、水、无机盐等.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①一④所用培养基,其组成成分的特点是 __________,这样的培养基可称做_______培养基.其中④-⑤的目的是__________________  ,⑥⑦⑧所示的菌种保存方法是__________       

              (2)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是 _________ .对分离的细菌数目统计时,统计的菌落数目往往比活菌的实际数目偏少,原因是_________________________ 。

              (3)在实验室应采用___________法对培养基进行灭菌处理,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_____________条件下进行.若发现在⑤中菌落过多,无法准确计数,可以将③中取出的菌液_____________________________ .

              (二)[生物——选修3:生物工程技术]

              I下图表示单克隆抗体制备过程示意图。据图回答:

              (1)淋巴细胞是由动物体骨髓中的造血干细胞分化、发育而来得到,B淋巴细胞从小白鼠体内分离之前,应对小白鼠进行的处理是_________________ ,该处理的实质是在小白鼠体内发生_____________过程。骨髓瘤细胞与进行原代培养的细胞相比较,遗传物质发生的主要变化是___________,从而违背了“程序性细胞死亡”规则,打破了细胞产生与细胞死亡的动态平衡。

              (2)____________________技术是单克隆抗体技术的基础,根据培养基的用途分类,图中HAT培养基属于__________培养基,试设想运用生物工程其它领域的技术制备单克隆抗体的另一条途径________________ 。

              (3)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_______________特点,又具备B淋巴胞的_______特点。单克隆抗体与常规的血清抗体相比 ,最大的优越性是_______________,_______________。                                            

              II绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠,下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程:


              (1)①过程需要限制酶切断________________键,使DNA分子断裂,其结果形成_____________。图中过程②常用的方法是_____________ ;过程③利用的生物技术主要是___________________;在进行过程④前,利用______________技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。

              (2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达,也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性作用,因此GFP基因可以作为基因表达载体上_____________。

              (3)获取外源基因若需在短时间内获得大量的某种外源基因,通常采用 _________ 技术.在供体雌鼠发情周期的某一阶段,用______激素处理促使卵巢里大量卵泡成熟并排出,称为超数排卵.在让供体母鼠与健康公鼠交配的同时,让代孕母鼠与结扎公鼠进行交配,使代孕母鼠与供体母鼠的生理条件达到同步或者一致,称为 __________ 处理.将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因生物进行_________________。

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