有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________，该实验设计是否合理？为什么？_________________________________________________________________。

(1)图甲是利用__________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是______和_________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。

(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？___________________。

(3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？__________________。

葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有           。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为           。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为           ，接种乙平板时的操作失误是           。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                      。

如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基，实验操作中的灭菌方法还有_________。

（2）该纯化醋酸菌的接种方法是______________；完成步骤④的操作，接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种；培养过程中，常选择菌落数在__________的平板统计计数。

（3）食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素，该酶是一种复合酶，它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________染料，形成________色复合物，若产生__________，则证明有纤维素分解菌存在。

③统计原生质体数量，结果如下。

分析回答：

（1）步骤②中，加酶液的目的是_______________________，洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是______________________________________。

（2）结果表明，制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是__________、________、_______。

（3）检验原生质体再生能力，需要配制再生固体培养基，培养基灭菌常采用___________ 法，灭菌后需要冷却到_______℃左右才能用来倒平板。

（4）实验中将收集到的原生质体浓度为30×10⁶个/mL培养液先稀释10⁴倍，再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养。一段时间后，统计得到的菌落数分别为：27、21、24。则原生质体再生率（能再生的原生质体数占全体部原生质体的比例）约为________________。

果蝇肠道中有包括醋酸杆菌在内的多种微生物，对其进行了分离、研究。

（1）分离醋酸杆菌：培养基中加入一定浓度甘露醇既可为醋酸杆菌提供________，又能抑制其它肠道微生物的生长，因此可作为___________培养基用于分离醋酸杆菌。实验中剥取果蝇肠道并用__________（蒸馏水/无菌水/生理盐水）冲洗，将所得液体涂布于已制备的培养基中，分离得到醋酸杆菌。

（2）为研究醋酸杆菌对果蝇生长发育的影响，研究者分别使用含肠道微生物（A组）、无菌（B组）、醋酸杆菌（C组）的培养基喂养无菌果蝇，测定蛹形成的平均时间，结果如图。

据图可知，醋酸杆菌对果蝇蛹形成具有_________作用，酵母粉含量为_________时作用最显著。若研究者利用此实验证实醋酸杆菌在肠道微生物中起主要作用，则需补充D组的实验处理为_____________。

（3）从细胞结构来看，醋酸杆菌属于_________生物，可在细胞的_________中将醇类、糖类分解为乙酸。醋酸杆菌可降解纤维素，有助于果蝇消化吸收营养物质，果蝇采食时携带醋酸杆菌，利于其传播，二者形成了__________关系。

（4）研究表明果蝇大脑分泌的一种蛋白类激素——促胸腺激素（PTTH）在果蝇生长发育过程中可促进蛹形成，预测醋酸杆菌可___________（提前/延迟/不影响）果蝇PTTH峰值出现的时间。

（5）综上所述，醋酸杆菌影响果蝇生长发育的原因是：___________________________________

I:回答与微生物有关的问题：

（1）泡菜在发酵过程中，起作用的微生物主要是_____和乳酸菌，其发酵产物中含有有机酸和_____等．

（2）腌制的食物中往往含有少量的亚硝酸盐，对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与_______偶联成_____色化合物．在实验过程中，测定的是_____值，以反映溶液中亚硝酸的含量．

（5）若存在杂菌污染，欲消除污染的杂菌，最简单的方法是________

（6）在培养大肠杆菌过程中，有关操作正确的是_____．

A．玻璃刮刀和接种环一样，只需灼烧灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存．

II：回答与基因工程有关的问题：如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径．据图结合所学知识回答下列问题：

（1）①过程称为________，该过程中常用的酶有_________________，为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具________．

（2）培育转基因羊的过程中，科研人员通过_______技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，受体细胞A应该是_______（填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵）．

（3）莴苣为双子叶植物，过程②常用的方法是___________，导人该细胞后，需对该细胞进行培养，经_________过程形成愈伤组织，再分化成幼苗长成转基因莴苣植株，此过程涉及的细胞工程技术是__________，该技术的原理是 ________________。

（4）过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌，使其易于吸纳重组质粒M．

结合以下图表分析，有关说法正确的是( )

A.青霉素和利福平能抑制DNA的复制 
B.环丙沙星和红霉素分别抑制细菌的①②和③ 

C.结核杆菌的④和⑤都发生在细胞质中  

D.①～⑤可发生在人体健康细胞中

实验人员从环境中分离获得白腐菌，以白腐菌的菌丝或孢子制得固定化白腐菌凝胶颗粒，各取25个两种凝胶颗粒分别处理50 mL染料废水，实验结果如下图1。进一步研究不同数量的凝胶颗粒处理50 mL染料废水结果如图2。据图分析回答：

                    图1                                        图2

(1)从野外采集白腐菌前，先向待采集土壤喷洒适量的染料废水的目的是________。某同学在进行白腐菌分离纯化实验时，划线某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成第一条划线无菌落可能的操作失误是________。将收集到的菌丝或者孢子加入到适量的海藻酸钠溶液中混匀，抽取5 mL混合液，滴加到CaCl₂溶液中，该过程中CaCl₂溶液的作用是______。

(2)现要处理100 L皮革生产过程中产生的染料废水。从实验结果分析，应选用________凝胶颗粒，添加________个凝胶颗粒后，保持________天以上，以达到最好的净化效果。

(3)与向染料废水中直接接种白腐菌相比，在工业生产中使用固定化白腐菌凝胶颗粒的优点主要是_____________________________________________。