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            • 1.

              下面的图甲表示硝化细菌、酵母菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况,图乙表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系,请据图回答:

              (1)图乙中a、b、c三条曲线依次表示图甲中__________号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。

              (2)研究发现,青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物,请设计实验,利用改变培养基成分等培养条件,将酵母菌和硝化细菌分离出来。

              ①主要步骤:

              A.分别配制不含__________的培养基(A)和加入________的培养基(B),分别灭菌。

              B.分别接种混合液放在适宜条件下培养。

              C.观察结果。

              ②结果:在A培养基上生存的是____________,在B培养基上生存的是____________。

              (3)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是________________。

            • 2.

              如图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题:

              (1)步骤①前的一步操作是________。,该操作用到的主要仪器是________。

              (2)实验步骤②的目的是________,步骤②、③之间还需要将接种环________。

              (3)指出步骤④操作不当的地方________。

              (4)分别用三个平板培养三种细菌(E.coli、S.albus、B.subtilis),然后在培养基上打出直径为3mm的孔,并在孔中加入一定浓度的甲抗生素,经过一定时间培养后,可以在孔的周围观察到一圈清晰区,此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径(如图所示),数据如下表。

              细菌

               

              不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径(mm)

              5μg/mL甲抗生素

              7.5μg/mL甲抗生素

              10μg/mL甲抗生素

              15μg/mL

              甲抗生素

              20μg/mL甲抗生素

              E.coli

              7

              10

              14

              16

              16

              S.albus

              5

              8

              13

              17

              B.subtilis

              5

              7

              9

              14

              19

              ①s.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是________。

              ②有人感染E.eoli而患病,医生使用20μg/mL甲抗生素给予治疗,试用生物进化理论解释这种不明智的做法________。

              ③采养殖池中的水样1mL稀释100倍,吸取稀释后的水样1mL,接种于E.coli选择性培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数,重复三次实验结果如图。该养殖池每mL水含有E.coli________个。

            • 3.

              根据下面的实验装置图(图甲、乙)和果酒的生产工艺流程简图(图丙)回答问题:


              (1) 图甲所示装置可用于提取________(填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”)。

              (2) 制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率,进气口应_________;排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是_____________。

              (3)图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图,其中冲洗的目的是_______________.樱桃榨汁前需要除去果柄,此操作是在冲洗之___(填“前”或“后”)进行的.为了提高樱桃的出汁率,在压榨前可加入一定量的____________酶.
              (4)若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用___________培养基.从微生物培养的角度分析,樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和_____________.
              (5)在酒精发酵旺盛时,醋酸菌_______(填“能”或“不能)将果汁中的糖发酵成醋酸.
            • 4.

              回答下列(一)、(二)小题。

              (一)某研究小组欲用苹果汁为原料,利用发酵瓶制作果酒和果醋,请分析回答:

              (1)将苹果汁放入发酵瓶,要预留约________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒,可在果汁中加入一定比例的______。若发酵瓶内持续无气泡产生,则需加入更多的_______,使发酵作用尽快发生。

              (2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜,若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株,可通过获得_______的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目,则常采用_________法。对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基______上低温保存。

              (3)下图是果酒和果醋的发酵装置,关于果醋发酵叙述错误的是_______

              A.发酵前,瓶内酒—冰混合物的pH需调至7.0

              B.发酵过程中,充气口要适时适量充气

              C.发酵过程中,排气口排出醋酸发酵产生的CO2

              D.发酵完成后,出料口的pH值不再减少

               (二)请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。

              (1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱  导剂_____作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与________细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的______培养,获得纯系细胞,同时还要进行________检验,以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。

              (2)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述,正确的是________

              A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长

              C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物

              (3)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体,科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞,该技术的核心步骤是______________,噬菌体是这些关键基因的___________。

            • 5.

              下图表示微生物接种、分离实验中的一些步骤,请回答:

                 

              (1)实验步骤A称为_________。进行步骤A之前,要对培养基进行灭菌,常采用的方法是_________________。

              (2)实验步骤B的目的是_____________,步骤C在沾取菌液前应将接种环_______________。

              (3)上图所示接种微生物的方法是_______,操作过程中,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是________________________。

            • 6.

              乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为:

                玉米秸秆糖液酒精

               (1)玉米秸秆经预处理后,应该选用        酶进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖。

               (2)(多选)从以下哪些微生物中可以提取上述酶?            

                 A.酿制果醋的醋酸菌   B.生长在腐木上的霉菌   C.制作酸奶的乳酸菌   

                 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌                        E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

               (3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物,所需要的培养基为         (按功能分),培养基中的碳源为            

               (4)从生物体提取出的酶首先要检测           ,以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中,为了使酶能够被反复利用,可采用固定化酶技术。

              (5)发酵阶段需要的菌种是           ,在产生酒精时要控制的必要条件是           

            • 7.

              人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。

              为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题:

              (1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是     (填序号)。

              ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

              (2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是                        

              (3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是   

              (4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的       有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是           (填图中序号)。

              (5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株       更适合用于人工瘤胃发酵,理是                         

            • 8.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。专家用化合物A、磷酸盐、镁盐及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解有机化合物A的目的菌,实验步骤如图所示。请分析回答下列问题。

                 (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选             ,这种培养基属于          培养基。

                 (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的             ,实验中需要振荡培养,由此推断“目的菌”的代谢类型是             

                 (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量             的培养液转入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量           

                 (4)转为固体培养时,常采用           法接种,获得单菌落后再筛选。

                 (5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用            的方法进行计数,以时间为横坐标,以           为纵坐标,绘制生长曲线。

                 (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行             处理后,才能倒掉。

            • 9.

              我国家电研究院的洗衣机专家指出,洗衣机内部的环境非常潮湿,洗衣机使用时间越长,内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机其实内部隐藏着一个健康的隐形杀手。某生物兴趣小组的同学,利用内桶背面的污垢进行了相关实验。如图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。


              (1)图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一,该操作称为______      ,若用该培养基培养洗衣机中滋生的细菌时,除考虑各种营养条件外,还要考虑______      和渗透压等条件(至少写两个)。
              (2)在培养洗衣机中细菌的实验中,应在接种前检测固体培养基是否被污染,具体检测的方法是______                                               。
              (3)图2是平板划线法接种操作示意图,操作顺序是A→B→______(用字母和箭头表示);以上操作中存在错误的步骤是______     (用字母表示)。
              (4)在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时,也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液,然后用移液枪取0.lmL菌液滴入平板,并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养,这种方法称为______                   。

              (5)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,此目的是_____    _。

            • 10.

              分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株,并对筛选出的菌株进行了初步研究。


              (1)对培养基进行灭菌的常用方法是___________。为在培养基表面形成单个菌落,若以________为接种工具,则用稀释涂布平板法进行接种。


              (2)先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以_________为唯一碳源的培养基培养2~5天,加入__________溶液后,依据出现的颜色反应进行筛选,观察菌落特征并测量______________。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中,恒温振荡培养8天,观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知,8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是___________。

              注:①DP=(D/d)2,其中d表示菌落直径(cm),D表示透明圈直径(cm)②“+”为滤纸边缘膨胀,“++”为滤纸整齐膨胀并弯曲,“+++”为滤纸不定形“++++”为成团糊状“+++++”为半清状




              (3)为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理,并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。由图分析可知,三种菌株对______的降解最强,与第5天结果相比,第10天秸秆各组分中______的降解率变化最大。

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