知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

2．乳糖主要用于乳品工业，可使低甜度和低溶解度的乳糖转变为较甜的、溶解度较大的单糖。乳糖酶的制备及固定化流程如图，请回答：

（1）缩选产乳糖酶的微生物L时，宜用乳糖作为培养基的唯一______，在此培养基上生长的菌落可以将乳糖水解为______和半乳糖
（2）产乳糖酶微生物L的培养过程中需要将培养瓶放置在摇床上不停振荡培养，其目的是______、______。此培养基中______（填“有”或“无”）菌落生长。
（3）在相同条件下，带电荷相同的蛋白质在特定的缓冲液中迁移的速度越快，说明其分子量越小，根据这一原理，纯化后的乳糖酶可用______法检测其分子量大小。
（4）乳糖酶宜采用化学结合法进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的______确定其应用价值，而酵母细胞固定化宜采用______。

难度：较易

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3．生物技术与人类生活息息相关，比如利用微生物发酵制作的瘸乳味道鲜美，易于消化和吸收，泡菜酸甜香脆，能令人胃口大开：利用酶技术大规模地应用于食品、医药等各个领域，降低成本，提高品质。回答下列问题：
（l）豆腐乳足通过微生物发酵而成，与发酵前相比，发酵后的腐乳营养价值______（填“提高”或“降低”）了，影响豆腐乳风味和品质的因素有______（答出两点即可）。
（2）在测定泡菜亚硝酸盐含量的实验中，通常运用的方法是比色法，其中在配置溶液时氢氧化铝乳液的作用是______。
（3）海藻酸钠是固定化细胞中常用的载体，在固定化酵母细胞的实验中，如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，则说明______。
（3）酶活性是指______，目前，还没有一种固定化技术普遍适用于所有酶，原因是______（答出两点即可）。

难度：较易

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4．葡萄糖异构酶经固定化后，可用于工业化生产高果糖浆。请回答下列问题。
（1）筛选产乳糖酶的微生物时，宜用______作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是作为______剂。从功能上讲这种培养基属于______。培养产乳糖酶的微生物前对培养皿进行灭菌宜采用______方法。
（2）戊二醛是一种化学交联剂，能与葡萄糖异构酶通过化学键交联。将酶液、戊二醛溶液先后加入到海藻酸钠溶液中搅拌均匀，用注射器将混合液注入到______溶液中可得到凝胶珠粒，此过程所用的固化酶方法为______。
（3）1个葡萄糖异构酶活力单位常定义为每分钟产生1μmol______所需的酶量。如图是温度对葡萄糖异构酶的固化酶和游离酶活力的影响曲线，该曲线表明固化酶和游离酶的最适温度______（从“相同”或“不同”选填）；低于或高于最适温度时，固化酶的酶活力______（从“低于”、“等于”或“高于”选填）游离酶。

（4）在用葡萄糖异构酶凝胶反应柱生产高果糖浆时，若糖液在1次流经反应柱后果糖的浓度低于产品标准，对此你提出的改进方案是______（答出2点）

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5．番茄红素是一种具有抗氧化、抗衰老、预防心血管疾病等多种生理功能的天然色素，某小组以番茄组织为材料，探究果胶酶和纤维素酶对番茄红素提取量的影响。研究人员将不同条件下提取到的上清液，在波长472nm处测其吸光度（吸光度与色素提取量成正比），以确定酶的最适用量。实验结果如表所示：

酶的用量/（单位：g/100g）	0.2	0.4	0.6	0.8	1.0
单独使用果胶酶的吸光度	0.40	0.45	0.50	0.55	0.55
单独使用纤维素酶的吸光度	0.32	0.45	0.36	0.35	0.34
混合使用果胶酶和纤维素酶的吸光度	0.70	0.78	0.85	0.85	0.86

回答下列问题：
（1）果胶酶包括______、果胶分解酶和果胶酯酶等，食品加工业中果胶酶制剂通常由______发酵产生。
（2）以上实验在探究酶的最适用量时，温度和pH是实验中的______变量，单独使用纤维素酶时，纤维素酶的用量与番茄红素提取量的关系是______。结合生产成本考虑，提取番茄红素时应加入酶的种类和酶的用量是______。
（3）在大量提取番茄红素的过程中，为了方便回收和再次利用果胶酶和纤维素酶，可使用______技术，一般来说，酶较适合的方法有______。

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6．枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株，分别将浸过不同菌株的提取液（a-e）及无菌水（f）的无菌圆纸片置于平板培养基表面，在37℃恒温箱中放置2-3天，结果如图1．图2是枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据（酶在不同温度下保温足够长的时间后，再测定其最适宜温度下的活性）。请回答问题：
（l）在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、______。培养枯草芽孢杆菌时，常用摇床进行振荡培养，目的是______。
（2）a-e中蛋白酶产量最高的菌株是______（用字母回答），判断依据是______。

（3）在蛋白酶的生产过程中，通常先将发酵液在60-70℃保温一定时间后，再制备酶制剂。保温一定时间的目的是______。
（4）质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量，设计了如图所示实验。如果实验结果是______，则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察______实现。

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7．固定化酶技术在工业生产中已经得到广泛应用，某小组同学尝试在实验室固定α-淀粉酶并检测其活性。回答下列问题：
（1）固定化酶技术是利用物理或化学的方法将酶______的技术。一般来说，与固定细胞相比，酶更适合采用______等方法进行固定。小组同学用石英砂将α-淀粉酶吸附后做成固定化酶柱，将一定量的蒸馏水滴人固定化酶柱并接收流出液，加入双缩脲试剂后呈紫色，原因是______。
（2）用固定化α-淀粉酶水解淀粉时，将淀粉溶液以一定流速缓缓流过反应柱，控制流速的主要目的是______。若要检测反应柱下端的流出液中是否还含有淀粉，方法是______。
（3）α-淀粉酶的活性可以用______来表示。影响固定化酶反应柱中α-淀粉酶活性的因素有______等。

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8．蛋白酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的活性，图中正确的是（　　）

A．

B．

C．

D．

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9．下列有关利用海藻酸钠固定酵母细胞实验的叙述，错误的是（　　）

A．干酵母加蒸馏水活化的时间不宜过长，以防止凝胶珠中酵母细胞代谢减弱

B．在烧杯中完全溶化海藻酸钠后应倒入容量瓶中定容，以保证溶液浓度准确

C．固定化酵母时注射器的推进速度不宜过快，以防止凝胶珠不呈球形

D．固定好的凝胶珠应用蒸馏水冲洗2～3次，以防止凝胶珠硬度过大影响物质交换

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10．反硝化细菌能将硝态氮（如N $%20O_%7B%203%20%7D%5E%7B%20-%20%7D$ ）转化为氮气（2N $%20O_%7B%203%20%7D%5E%7B%20-%20%7D$ +l0e^-+12H⁺→N₂+6H₂O），广泛用于污水处理。科研人员开展好氧反硝化细菌的筛选和固定化研究，主要过程及结果如下。请回答：
步骤1 菌株初筛、纯化和鉴定将1g活性污泥稀释成不同浓度的溶液，各取50μL稀释液均匀涂布到含有溴麝香草酚蓝（BTB）的初筛培养基上（BTB是一种酸碱指示剂，在弱酸性溶液中呈黄色，弱碱性溶液中呈蓝色，中性溶液中呈绿色，初筛培养基呈绿色），在适宜条件下培养获得单菌落，再进行纯化和遗传鉴定。
步骤2 制备固定化细菌配制海藻酸钠等溶液并灭菌。在无菌条件下制备固定化小球，用无菌水冲洗并保存。
步骤3 不同C/N（碳氮比）对反硝化效率的影响研究配制不同C/N的培养液，每种培养液分两组，分别加入100粒固定化小球和0.8mL的菌液，在30℃下振荡培养48h后，测定培养液中N $%20O_%7B%203%20%7D%5E%7B%20-%20%7D$ 的去除率，结果如图。
（1）步骤1中，初筛培养基中的氮源应是______。在细菌培养过程中，需要放置未接种的培养基一起培养，其目的是______。初培结束时，选择的目标菌落周围应呈______色。
（2）步骤2中，海藻酸钠等溶液的灭菌方法是______。制作的凝胶球不宜过大，否则会使小球的______减小，影响小球内外物质交换。进而影响反硝化效率。
（3）步骤3中，若每个固定化小球包里的细菌数量为1.9×l0⁶个，则实验接种的菌液中反硝化细菌的密度约为______（保留一位小数）个•mL^-1．实验结果表明，固定化会使细菌的反硝化效率略有下降，可能的原因是______。
（4）用反硝化细菌进行污水处理过程中，有时需要向污水中加入少量淀粉。结合实验结果分析，添加淀粉的主要目的是______。

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