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(22分)细胞固定化技术是现代生物工程领域的重要内容,某科研工作者初步研究了海藻酸钠固定化技术在酿酒酵母上的应用。其实验流程如下:①酿酒干酵母活化→②海藻酸钠-酵母菌悬液的制备→③固定化酵母细胞→④无菌水洗涤→⑤发酵( 25 ℃)。请回答以下问题:
(1)步骤②中,配置海藻酸钠溶液时,最好采用 ▲ 加热的方法;固定化酵母细胞采用的方法是 ▲ ,可以通过观察步骤③形成的凝胶珠的 ▲ 来评价该实验结果。
(2)科研工作者分别研究了氯化钙浓度和海藻酸钠浓度对固定化酵母细胞发酵特性的影响,结果如表1和表2。(发酵温度 25 ℃、pH3.8、时间 11d)
表1 氯化钙浓度对固定化酵母发酵特性的影响
氯化钙 /(mol · L-1) | 0.2 | 0.8 | 1.4 | 2.0 | 2.6 |
残糖量% | 2.6 | 2.6 | 2.5 | 2.4 | 3.5 |
酒精度%(v/v) | 6.5 | 6.4 | 6.4 | 6.7 | 6.1 |
固定化酵母强度 | | | | | |
注:“ ”软,“ ”硬,“ ”较硬(以下表中同)
表2 海藻酸钠浓度对固定化酵母发酵特性的影响
海藻酸钠% | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
残糖量% | 2.5 | 2.4 | 2.8 | 3.2 | 3.8 |
酒精度%(v/v) | 6.5 | 6.7 | 6.3 | 6.4 | 5.9 |
固定化酵母强度 | | | | | |
①表1结果表明,在较低浓度范围内,随着 Ca2 浓度的增大,固定化酵母强度 ▲ ,而发酵液的残糖量及酒精度 ▲ 。
②由表 2 可见,随着海藻酸钠浓度的增加,发酵液的残糖量和酒精度的变化是 ▲ ,固定化酵母的强度差异不显著。结合表1和表2,氯化钙浓度和海藻酸钠浓度分别为 ▲ 时,固定化酵母具有理想的发酵特性和机械强度。
(3)科研工作者接着又在相同的发酵条件下,研究了固定化酵母与游离酵母3 次循环发酵的残糖量的变化,结果如下图。分析曲线可知,游离酵母在重复使用两次后,其活性 ▲ ,而固定化酵母细胞最大的优点是 ▲ 。