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          50条信息

            • 1.

              下图表示某科学家利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的相关过程,据图回答下列问题:


               


              (1)步骤①②利用的技术名称分别是                 、                     。图中造血干细胞中的遗传物质至少有         个来源。

              (2)若利用PCR技术扩增目的基因并完成图示小鼠的基因治疗,涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)和                  等。

              (3)下图所示的一个质粒分子经EcoRⅠ切割前后,分别含有      、          个游离的磷酸基团。由于DNA复制时,子链只能由5′向3′方向延伸,故利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取       作为引物。一个目的基因通过PCR技术扩增第n次时,需要        个引物。


              (4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发       色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否转录,可以采用                        的技术。

            • 2.

              科学家利用PCR技术分别从抗根结线虫的番茄和辣椒中克隆抗性基因SIMi及CaMi,并利用遗传转化方法将它们转入对根结线虫敏感的番茄中,获得抗根结线虫的番茄转基因株系应用于植物抗根结线虫育种。请回答相关问题:

              (1)PCR技术是扩增目的基因的常用手段。扩增过程中,目的基因DNA________后解旋为单链,__________与单链相应互补序列结合,在酶的作用下进行延伸。

              (2)________________是实施基因工程的核心。

              (3)将目的基因转入对根结线虫敏感的番茄中,最常用的方法是____________。通过转化,目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内_____________________。

              (4)为了检测对根结线虫敏感的番茄中是否插入目的基因,可采用______________技术。检测目的基因在分子层面是否表达则可以用___________________的方法。

              (5)为了比较两种抗性基因(SIMi和CaMi)在转基因后的抗根结线虫的效果,可分别取等量的两种成功表达的转基因番茄植株____________,比较其抗虫效果。

            • 3.

              科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,提高了光合作用过程中Rubi-sco酶对CO2的亲和力,从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题:

              (1)PCR过程所依据的原理是____________,利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成_________;扩增过程需要加入__________________________酶。

              (2)启动子是一段有特殊结构的DNA片段,其作用是______________________________。PCR定点突变技术属于__________的范畴。

              (3)可利用定点突变的DNA构建基因表达载体。常用将基因表达载体导入植物细胞,还需用到植物细胞工程中的______________技术,才能最终获得转基因植物,该技术利用的原理是________________。

            • 4.

              如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:

              (1)图中cDNA文库         基因组文库(选填“大于”或“等于”或“小于”)。

              (2)①过程提取的DNA需要         的切割。

              (3)为在短时间内大量获得目的基因,可用的技术是       ,其原理是                。该反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

              (4)目的基因获取之后,需要进行基因表达载体的构建,基因表达载体的组成必须有_________             及标记基因等,此步骤是基因工程的核心。

              (5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞,常采用的方法是           ,其能否在此植物体内稳定遗传的关键是            ,可以用                技术进行检测。

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