下列有关生物技术实践操作的叙述，正确的是

微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：

(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自___________________________的土壤。

(3)接种后，应密封培养的原因是________________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取___________就可获得高效菌株。

(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为____________个／mL。该统计结果_________(填“低于”或“高于”)实际值。

I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落．回答下列问题：

（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用______法接种．为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是________________________。

（1）转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增，该技术的原理是_______________。

（2）将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______，再将目的基因导入其中，最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

（3）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式______  （填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律，不会随______（填“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而保持了母本的遗传特性。

（4）来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，原因是 _________________。

下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的是( )

为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验：

请分析回答下列问题：

(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是________。

(2)接种微生物的方法有很多，图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是________。用该方法统计样本菌落数后，

所得数据需要乘以10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量(单位：个／ml)，这里的n＝________。

(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1：分别取________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

下列有关平板划线接种法的操作错误的是

.请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于______ (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是_____。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行____ (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和_______。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_______。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和__________________。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是______________ 。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（4）以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作,原因是_________

（1）Ⅰ号培养基中应加入     ，以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从Ⅰ号培养基中挑选     菌落接种到Ⅱ号培养基中。

（2）②过程所使用的接种方法是      。如果不经过①过程，直接将采集的样品进行接种培养，可能出现的结果是      。

（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基中接种菌种后，应该置于     的恒温培养箱中培养，培养皿要倒置的原因是     。

（4）在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，如曲线②。根据实验结果分析：80℃并不是该酶使用的最佳温度，原因      。曲线②35℃数据点是在     ℃时测得的。

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏；牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。

    (1)为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10 mL生牛奶稀释到10^－4浓度后，取0.1 mL滴在培养基上。

    ①将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是_______________。

    ②该涂布工具最合适的灭菌方法是_______________________。

    (2)图中所示方法为稀释培养法，按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为25个、23个、24个，则生牛奶中每毫升含细菌数为______个。

    (3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释平板法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动?______________________。

    (4)涂布结束后将培养皿______，在37℃______________中培养。

    (5)细菌种群进化过程中，起主要作用的变异是______。

    A．环境条件    B．基因重组    C．基因突变    D．染色体变异

    (二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转移入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：

    (1)从兔肝细胞中提取mRNA，在_________酶的作用下形成互补DNA。然后以此DNA为模板在体外利用____________反应大量扩增，得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成___________，再导入用氯化钙处理的_______________，侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是________________(A．叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织  B．愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽  C．再生的芽在细胞分裂素含量高的培养基上生根  D．愈伤组织在含合适浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。

    (2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适量浓度甲醛且密封的试管中，将试管置于__________上，进行液体悬浮培养。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是__________，从而使叶片保持正常形态。

酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制酵母菌的生长，其主要原因是