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            • 1． “CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破坏膜结构，使蛋白质变性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+，抑制DNA酶的活性。某科研小组为了寻找提取腊梅DNA的优良方法，比较了两种提取DNA的方法，主要操作如下：

              实验测定结果如下（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8，纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0）。
              CTAB SDS
              OD260 OD280 OD260/OD28 OD260 OD280 OD260/OD28
              0.003 0.018 1.833 0.006 0.005 1.200
              请回答下列问题。
              （1）与常温下研磨相比，液氮中研磨的优点是______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是______。
              （2）氯仿一异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一异戊醇，蛋白质等杂质可溶于氯仿一异戊醇，实验过程中加入氯仿一异戊醇离心后，应取①______加异丙醇（异丙醇与水互溶）并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是______。
              （3）两种方法中，______法提取的DNA较多，其可能原因是______。
              （4）两种方法中，______法提取的DNA纯度较低，其含有的主要杂质是______。
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            • 2．
              我国全面二孩政策已于2016年1月1日起正式实施．十二年前，产妇朱女士利用试管婴儿技术，成功生下一个男孩．2016年3月，朱女士决定生育第二个孩子，医院找到当年为她冷冻的“胚胎”过捡胎等程序，朱女士已成功怀孕12周．冷冻12年后复苏、植入，该“冻龄”宝宝将有望成为国内最“老”的宝宝．请回答以下相关问题：
              （1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，在取卵前通常需要注射促性腺激素，而不通过服用雌激素来首接促进更多的卵泡发育，原因是过量的雌激素会通过 ______ ，从而影响卵巢的发育．在体外受精前，医生借助 ______ 探测仪等工具用吸卵针从朱女士卵巢中吸取卵母细胞；随后将取出的卵母细胞置于与 ______ 中相似的环境，让它进一步发育成熟．受精过程中，精子顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过卵子的 ______ ，最终进入卵内完成受精作用．
              （2）胚胎的早期培养与动物细胞培养一样，都需要满足 ______ 及营养等条件．对移植的胚胎进行性别鉴定时，要先从胚胎细胞中提取DNA，再利用PCR技术扩增，最后进行基因检测．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验叙述，错误的有 ______ ．
              A．人血液中的红细胞可作为提取DNA的材料
              B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水
              C．加入冷酒精后要用玻璃棒快速的搅拌
              D．DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝
              （3）若做试管婴儿的夫妇中，妻子患有线粒体疾病（线粒体DNA缺陷），丈夫正常，则子女患病情况为 ______ ．那么这对夫妇要想获得健康的孩子，可通过特殊的设计试管婴儿技术即“三亲婴儿”（医生要去除女性捐赠者卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育）．“三亲婴儿”的获得过程，除运用胚胎工程的技术手段外，还要特别运用 ______ 技术．
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            • 3．
              为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法（通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物）、B方法（通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性）、C方法（通过高盐沉淀蛋白质）从嫩叶、块根中提取总DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等溶于氯仿-异戊醇．分析回答：
              ①将液氮冷冻的组织研磨成粉末
              ↓
              ②分别用A、B、C三种不同方法处理
              ↓
              ③DNA粗提液在65℃水浴保温60min，搅拌均匀
              ↓
              ④加氯仿-异戊醇，离心取？，加冷酒精，收集沉淀
              ↓
              ⑤加入RNA酶，37℃水浴保温20min，重复步骤④
              ↓
              ⑥将沉淀室温干燥后，溶于超纯水中，-20℃保存备用
              结果检测
              组织 方法 组别 OD260/OD230 OD260/OD280 得率/μg•mg-1
              嫩叶 A方法 A1 1.970 1.821 0.105
              B方法 B1 1.973 1.719 0.096
              C方法 Cl 1.647 1.568 0.082
              块根 A方法 A2 1.888 1.888 0.029
              B方法 B2 1.811 1.682 0.030
              C方法 C2 1.376 1.320 0.020
              注：①纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0，过低表明小分子物质残留较多；②纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8，若比值大于1.8表示存在RNA残留，若小于1.8表示存在蛋白质残留．③得率是指每毫克组织所提取的DNA量．
              （1）步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是 ______ ．步骤④“？”表示 ______ ．
              步骤⑤中加RNA酶的作用是 ______ ．
              （2）影响DNA纯度的物质主要有 ______ ．提取的DNA中RNA残留较多的方法是 ______ ．为材料提取DNA的得率较高，原因是 ______ ．
              （3）电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带．如图是上述实验中提取到的总DNA 凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物．实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象．

              ①只出现一条带的原因是 ______ ．
              ②出现“拖尾”现象的原因是 ______ ．
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            • 4．
              如图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程，请回答下列问题．

              （1）若图示为“DNA的粗提取与鉴定”的实验操作：
              ①图中实验材料A可以是下面的 ______ ．（填字母）
              a．花菜b．香蕉c．猪肝d．猪血
              ②若选用植物组织，研磨前加入的B一般为 ______ ，作用分别是 ______ ．
              ③实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL如表所示的3种溶液中，经搅拌后过滤，获得相应的3种滤液，含DNA最少的是滤液 ______ ．
              溶液种类 滤液
              1 2mol/L的NaCl溶液 e
              2 0.014mol/L的NaCl溶液 f
              3 体积分数为95%的冷酒精溶液 g
              （2）若图示为“检测生物组织中的还原糖”的实验操作：
              在检测滤液C中是否含有还原糖时，向C中加入的是 ______ 色的斐林试剂，欲得到实验结果，还需要进行的步骤是 ______ ．
              （3）若图示为“叶绿体色素的提取和分离”的实验操作：
              ①研磨前加入的B应包括 ______ ，为了防止有机溶剂的挥发，操作过程中除了加快研磨速度外，还需 ______ ．
              ②将研磨液进行过滤时，需要在漏斗基部放上 ______ ．
              难度：较易
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            • 5． 如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图，请分析回答有关问题：

              （1）正确的操作顺序是 ______ （用字母和箭头表示）．
              （2）如图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是 ______ 和 ______ ．
              （3）如图A步骤中所用酒精必须是经过 ______ 的才能使用，该步骤的目的是 ______ ．
              （4）为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加 ______ 试剂后沸水浴，如果出现 ______ 则证明该丝状物的主要成分为DNA．
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            • 6． 某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动．具体步骤如下：
              材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g．剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h．
              DNA粗提取：
              步骤一：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液（含洗涤剂和食盐），充分研磨．用两层纱布过滤，取滤液备用．
              步骤二：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上．
              步骤三：取6支试管，分别加入等量的 ______ （填溶液名称及浓度）溶液溶解上述絮状物．
              步骤四：：在上述试管中各加入4mL ______ 试剂．混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如表：
              材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄
              20℃ ++ + +++
              -20℃ +++ ++ ++++
              （注：“+”越多表示蓝色越深）
              分析上述实验过程，回答下列问题：
              （1）该探究性实验课题名称是 ______ ．
              （2）步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是 ______ ，食盐的作用是 ______ ．
              （3）步骤二中“缓缓地”搅拌，这是为了 ______ ，所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制 ______ 的活性，可以防止DNA降解．
              （4）上述实验中步骤三，步骤四的空缺依次分别为 ______ 、 ______ ．
              （5）实验表明， ______ 获取的DNA量最多．
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            • 7． 蛋白质的分离与提纯技术是研究蛋白质的重要技术，DNA的提取和分离及PCR技术是研究DNA的重要技术．根据所学的知识回答下列问题．
              （1）样品处理，红细胞的洗涤要用 ______ 反复冲洗、离心．血红蛋白粗分离阶段，若要尽快达到理想的透析效果，可以采用的方法是 ______ ．
              （2）分离蛋白质时，用凝胶色谱法将样品纯化的目的是 ______ ．
              （3）DNA粗提取时，常用鸡血作为实验材料，原因是 ______ ．实验前中，以通过 ______ 两种上法使鸡血细胞沉淀与试管底部，以便除去血清．实验中有两次使用蒸馏水，第一次使用的目的是 ______ ．
              （4）PCR反应过程中的延伸是指 ______ ，在PCR技术中所需要的引物实质上是一种 ______ ．
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            • 8．
              现代生物技术在花椰菜遗传育种工作中得到广泛应用．育种技术人员已经利用分子标记技术对花椰菜种质资源进行遗传多样性分析，并绘制了主要的花椰菜品种核酸指纹，为品种测试、新品种以及种质资源评价利用提供了重要依据．请根据相关信息回答下列问题：
              （1）目前已经建立了花椰菜稳定的遗传转化技术体系，比如将抗虫基因、豇豆胰蛋白抑制剂以及抗黑腐病等目的基因导入到受体中，获得具有较高抗性的新种质，为育种提供了良好的材料．将其目的基因导入花椰菜植株细胞的方法通常为 ______ ．
              （2）为加快花椰菜育种纯化的速度，育种技术人员利用了花药和小孢子等细胞进行培养．从细胞到形成纯合子所用生物工程技术是 ______ ．
              （3）花椰菜的花为两性花，某二倍体花椰菜品种的正常体细胞中染色体数目为18条，在研究其核酸指纹（也是单倍体基因组）时，需测定 ______ 条染色体．
              （4）育种工作者发现，利用白菜（2N=20）与花椰菜（2N=18）进行杂交，可得到白菜-花椰菜二倍体植株，但是却不可育，育种技术人员再用 ______ （化学试剂）处理白菜-花椰菜植株的 ______ 后，便可得到可育的新品种．接着育种技术人员又尝试将该新品种与白菜（2N=20）杂交，仍然可以得到种子，由该种子发育成的植株为 ______ 倍体（用具体数字表示），其染色体数目为 ______ 条．
              （5）以花椰菜为材料也可提取DNA，常用的方法为研磨法，却不能像鸡血那样，用蒸馏水使其破裂，其原因是 ______ ．
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            • 9．
              生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究，主要实验流程如图，其中SDS（十二烷基硫酸钠）具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性等作用，苯酚和氯仿不溶或微溶于水，它们的密度均大水．请分析回答：

              （1）步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是 ______ ．在常温条件下，也可向切碎的组织材料中加入一定量的 ______ ，再进行充分搅拌和研磨．
              （2）根据实验流程可推知，步骤③、④所依据的原理是 ______ ．
              （3）步骤⑤加入2～3倍体积的95%乙醇的目的是 ______ ．
              （4）下面是某同学设计的DNA鉴定实验的主要步骤：
              ①取1支20mL试管，向其中先后加入2mol•L-1的NaCl溶液5mL和少量絮状DNA沉淀，用玻棒搅拌使其溶解．
              ②向试管中加入4mL二苯胺试剂，混匀后将试管置于50～60℃水浴中加热5min，待试管冷却后，观察溶液是否变蓝．
              请指出上面实验步骤中的两个错误： ______ 、 ______ ．
              （5）兴趣小组成员还以同种苹果的不同组织器官为材料，测定不同组织细胞中DNA的含量，结果如下表（表中数值为每克生物材料干重中DNA含量）：
              组织器官 韧皮部 形成层 冬芽 秋梢嫩叶 成熟叶片
              含量/μg•g-1 80.00 150.00 160.00 120.00 70.00
              试从细胞分裂的角度，解释不同生物材料中DNA含量差异明显的原因 ______ ．
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            • 10．
              临床上常常利用血液中DNA进行身份鉴定、基因诊断等，但血液中DNA含量少、不易提取．为了从血液中获取更多的DNA，科研人员以大鼠血液为材料，尝试比较两种提取DNA的方法，主要操作如下：

              实验结果（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度．理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8）：
              提取方法 OD260 OD280 OD260/OD280 DNA含量（μg/mL血液）
              方法A 0.304 0.188 1.62 38
              方法B 0.612 0.420 1.46 76.5
              试回答下列问题：
              （1）补全相关实验步骤：① ______ ，② ______ ．
              （2）实验中利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是 ______ ．
              （3）与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的DNA总是很少，这是因为 ______ ．
              （4）两种方法中OD260/OD280均低于1.8，主要原因是 ______ ；其中方法A的OD260/OD280更接近1.8，原因是 ______ ．
              （5）根据实验结果，从人血液中提取DNA时应优先选择方法 ______ （“A”、“B”）．
              难度：较易
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