10.
家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药.
(1)进行转基因操作前,需用
酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自
cDNA文库的干扰素基因片段正确插入载体质粒的启动子和
之间.
(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞.改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含M
g2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、引物 和
.
(4)将目的基因导入动物细胞最常用的方法是
.此方法的受体细胞多是
.
(5)将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养时需要提供气体环境:95%空气+5%CO
2.O
2是______所必需的,CO
2的主要作用
;培养液应进行无菌处理.通常还要在培养液中添加一定量的______,以防培养过程中的杂菌污染.此外,应定期更换培养液,目的是
(6)人体细胞表达的干扰素与转基因家蚕细胞表达的干扰素的氨基酸序列相同,根本原因是 。