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            • 1. 请回答下列有关转基因抗病毒马铃薯的问题:
              (1)获取病毒基因常用的方法有    (写出两个即可).
              (2)获得是转基因马铃薯的核心操作是构建基因表达载体,其中与调节抗病毒基因转录的有关部分是
                  
              (3)利用农杆菌转化法将抗病毒基因导入马铃薯,需要首先将重组的载体导入    ,在将之与切成小圆片的马铃薯叶片进行培养,农杆菌侵染植物细胞后,这时插入在Ti质粒上的    中的抗病毒基因可以转移至受体细胞,并整合到马铃薯的    上.整合的过程一般发生在细胞有丝分裂的    期.
              (4)将共同培养后的马铃薯叶片转移至特定的培养基上,在    (填激素名称)的协同调控作用下,经过脱分化形成    ,再分化得到胚状体或丛芽.对获得的植株进行个体生物学水平鉴定的做法是    
            • 2. 基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导入人和动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答.某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛.请回答下列问题:
              (1)基因表达载体的构建是基因工程的核心,一个完整的基因表达载体至少包括启动子、            .启动子位于基因的    ,有了它才可以驱动基因转录.
              (2)制备基因疫苗的基因可以从基因文库中获取,基因文库实际上是含有某种生物不同基因的许多DNA片段的    群体.
              (3)检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白,在分子水平上的检测方法是    
              (4)胚胎工程最后一道工序的实质是    
              (5)为提高胚胎的利用率,可以采用胚胎分割技术,应该选用    的桑椹胚或囊胚进行分割.
            • 3. 人的内皮抑素(一种蛋白质)能诱导血管内皮细胞凋亡,进而抑制新血管的产生.临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞,使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素,抑制新生血管的形成,使肿瘤细胞进入休眠状态并诱导其凋亡.
              回答下列问题:
              (1)从肝细胞中提取总mRNA,利用逆转录酶合成    ,根据内皮抑素基因的    设计并合成引物,利用PCR技术得到大量内皮抑素基因.
              (2)在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中,以    作为工具酶,以    作为载体.
              (3)在进入临床使用前,需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测.为获得大量的血管内皮细胞,首先用    酶处理血管内皮组织,使其分散成单个细胞,制成细胞悬液,然后将其放人含    等一些天然成分的合成培养基中培养.
              (4)血管内皮细胞被重组腺病毒感染后,若通过    方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡,则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性.
              (5)临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞,使肿瘤生长受到抑制,这种治疗方法属于    (填“体内”或“体外”)基因治疗.
            • 4. HIV属于逆转录病毒,人体感染后会患艾滋病,请回答:
              (1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白时,可先提取HIV中的    ,以其作为模板,在有关酶的作用下合成目的基因.在基因工程的基本操作程序中,其中核心步骤是    .检测基因是否插入到受体基因组DNA中的具体方法是    
              (2)若使用奶牛的受精卵作为受体细胞,将目的基因导入受体细胞的最有效的方法是    .在使用培养基对受体细胞进行培养时,通常需加入    等天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒以及充足氧气的环境中,还需保证细胞生活所需的    
              (3)若想一次获得大量基因型相同的转基因奶牛,可对早期胚胎进行胚胎分割,操作时需注意    
              (4)人的免疫系统对癌细胞具有    功能,艾滋病患者由于免疫功能的缺陷,易发生恶性肿瘤.
            • 5. 中美研究人员发现了PYL9蛋白(一种提高植物抗旱性的蛋白),利用转基因技术让水稻自身产生大量PYL9蛋白,可显著提高其抗旱性.请回答下列问题:
              (1)已知PYL9蛋白的氨基酸序列,培育转基因抗旱水稻可用    方法来获得目的基因.构建基因表达载体用到的工具酶是    
              (2)导入目的基因的重组细胞可通过    技术培育成完整植株,这一过程体现了    
              (3)目的基因若在水稻细胞中表达,遗传信息流向是    ;检测水稻细胞中是否存在PYL9蛋白,在分子水平上采用的方法是    
              (4)经研究发现PYL9蛋白是位于细胞膜上的一种脱落酸受体.干旱环境中水稻老叶内脱落酸的含量增加,能加速    ,将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中,增强了幼叶和芽的存活率.PYL9蛋白的作用能体现细胞膜    的功能.
            • 6. Bt毒蛋白基因是应用最为广泛的抗虫基因.请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
              (1)要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因,可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列,设计特异性    ,再利用    技术扩增出Bt毒蛋白基因.
              (2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有    ,它能把目的基因整合到受体细胞的    上.这种将目的基因导入受体细胞的方法是    法.
              (3)若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白,在分子水平上可利用    方法进行检测.要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体生物学水平上还需要做    实验.
              (4)目前,转基因植物的安全性问题是社会争论的热点.面对转基因技术的利弊,我们应持有的正确做法是    
            • 7. 高致病性禽流感暴发的地区,家禽养殖业蒙受巨大的经济损失,同时也威胁到人类的健康.科学家致力于提高家禽对病毒的抵抗力,减轻禽流感的传播和流行.
              (1)在鸡的多个品种中都存在Mx蛋白,但只有少数品种的Mx蛋白具有抗病毒的活性.比较两种Mx蛋白,发现其差异是第631号氨基酸的种类不同,这很可能是由于Mx基因发生了碱基对的    而造成的.
              (2)研究人员利用    做探针,从某个品种的鸡体内成功提取出正常Mx蛋白的mRNA,通过    法获取cDNA,再利用某种病毒将cDNA携带进入Mx基因缺陷的另一个品种的鸡受精卵中,并将这些受精卵培育成成体.上述病毒起到了    作用.
              (3)检测发现,在由(2)获得的鸡体内cDNA成功表达了,从分子水平上说,这项检测通常采用    方法;但所合成的Mx蛋白是否具有正常活性,还需要从个体水平上进行    感染试验.
              (4)让转基因鸡的雌雄个体之间随机交配,所产生的子一代、子二代均按照孟德尔的分离定律遗传,这说明    
            • 8. 据英国《每日邮报》报道,荷兰科学家通过基因工程激素用蛛丝蛋白制成了一种高强度人造皮肤,这种“皮肤”甚至能够抵御子弹的射击而不被穿透.实验中,研究人员首选通过转基因技术培育出了一种山羊,这种山羊能够生产出具有蛛丝蛋白的羊奶,在羊奶中加入一种特殊的溶剂后,就能提取到大量的蛛丝纤维,这种蛛丝纤维甚至比著名的用于制作“防弹背心”的凯夫拉尔纤维还结实.将这些纤维纺纱编织就能制成所需要的“超强布料”.
              (1)上述转基因山羊培育过程中,肯定用到的工具酶有    
              (2)为使蛛丝蛋白基因转让山羊细胞后能够在乳腺细胞中表达,可将目的基因与    等调控组件结合.目的基因的表达载体可以用    法导入山羊的     细胞中.
              (3)若对该转基因山羊进行克隆,用该技术利用的基本原理是    ,用到的主要技术手段有    
              (4)转基因山羊的变异类型是    
            • 9. 基因工程又称为DNA重组技术,回答相关问题:
              (1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即    和从    中分离.
              (2)利用某植物的成熟叶片为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其原因是    
              (3)在基因表达载体中,启动子是    聚合酶识别并结合的部位.若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是    
              (4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的携带目的基因的金属颗粒有        颗粒.
            • 10. 尿激酶具有溶解血栓作用.科研人员利用生物工程技术将天然尿激酶的第156、178、179位的精氨酸替换为赖氨酸,第181位的精氨酸替换为组氨酸,获得新型尿激酶以提高作用效果.回答下列问题:
              (1)获得新型尿激酶的技术属于    工程.该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过    或基因合成,对    进行改造,制造一种新的蛋白质的技术.
              (2)获取新型尿激酶基因的主要途径是    .利用PCR技术扩增新型尿激酶基因,需要模板、四种脱氧核苷酸、        
              (3)构建基因表达载体后,常采用    技术将其导入动物的受精卵.体外培养早期胚胎时,需提供    气体以维持培养液的pH.
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