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            • 1． 2015年10月，我国女科学家屠呦呦等因发现能有效治疗疟疾的青蒿素而获得了“诺贝尔生理学或医学奖”．在青蒿中，青蒿素的含量很低，且受地域性种植的影响较大．研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿酸的合成途径（如下图的实线框“口”内所示）．研究发现，酵母细胞也能够产生青蒿酸合成的中间产物FPP（如下图的虚线框“”内所示）．请回答下列问题：

              （1）在FPP合成酶基因的表达过程中，完成过程①需要    酶催化．
              （2）为了提高青蒿素的产量，需要对青蒿细胞进行植物组织培养，用青蒿细胞培养到薄壁细胞的过程叫做    ，由薄壁细胞大量增殖的细胞分裂方式是    ．
              （3）根据图示的代谢过程，若科学家用基因工程技术培育能产生青蒿酸的酵母细胞，需要向酵母细胞中导入    、      等．在基因工程的操作过程中，为了目的基因在受体细胞中能稳定存在、复制、遗传和表达，使其发挥作用，需要构建    ．
              （4）实验发现，改造后的酵母菌细胞的基因能正常表达，但酵母菌合成的青蒿酸仍很少．根据图解分析，其原因可能是    ．
              （5）利用酵母细胞生产青蒿酸的明显优势有    （答对一个要点即可）．
              难度：中等
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            • 2． 2015年，屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖．工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取，产量低，价格高．基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路．科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产植株．通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变．
              （1）提取了高产植株的全部DNA后，要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术，该技术的原理是    ．
              （2）如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段，用该双链cDNA进行PCR扩增，进行了30个循环后，理论上可以产生约为    个DNA分子，该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的    ，获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列    （填“相同”或“不同”）．
              （3）将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答：

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是    ，构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是    识别结合位点．
              （4）检测目的基因是否表达出相应蛋白质，应采取    技术．目的基因导入组织细胞后，通过    技术培育出青蒿幼苗．
              难度：中等
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            • 3． 如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点．据图回答：

              （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用    限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因．筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含    的培养基上进行．能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的    ．过程①采用的操作方法通常是    ．
              （2）过程②代表的生物技术是    ．对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体．目前最常见的是经分割产生的同卵    胎．
              （3）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用    技术．
              （4）对代孕牛的要求是    ．
              难度：较难
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            • 4． 2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书．图1表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

              （1）④过程应用的主要生物技术是    ；该技术的过程主要包括    和    两个阶段，利用的基本原理是    ．
              （2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于    工程技术范畴．
              （3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图2分析：
              ①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入    ．
              ②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的    （基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于    ．第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等．
              ③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是    ．
              （4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是    ．
              难度：较难
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            • 5． 现代人们对生物工程技术发挥的作用褒贬不一，但生物工程在为人们提供需要的生物新品种或新产品方面确实发挥了重要作用．请回答下列问题：

              （1）转人生长激素基因牛发生的可遗传变异是    ，③过程用到的生物技术手段有    ．如欲得到基因型相同的两头牛犊，可在    阶段，采用    技术达到此目的，两头牛的性别    （填“相同”或“不同”）．
              （2）将prG（基因）导人浆细胞制备单克隆抗体的过程中，应进行多次    检测，Ⅲ代表的细胞具有    的特点，具有此类功能的细胞还可以通过    （技术）方法获得．
              （3）在抗虫棉培育过程中，将棉花细胞培养成抗虫棉植株所依据的原理是    ，④过程常用的方法是     法．若要获得该种抗虫棉的无病毒植株，应选用其    处的组织进行培养．
              难度：较难
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