10.
pBV220质粒是被广泛应用的大肠杆菌载体,结构如下图所示。其中PRPL是启动子,rrB是基因转录终止信号,Ampr是氨苄青霉素抗性基因,ori是质粒复制起点,EcoRⅠ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ、Pst Ⅰ均为限制性内切酶。回答下列问题:
(1)从图中可看出,pBV220作为运载体具备的条件有①___________________ ② __________________
(2)将目的基因与此质粒构建基因表达载体时,通常用图中___________两种限制酶切割此质粒,其优点是_______________。用这两种酶可以切开此质粒的__________个磷酸二酯键,并且会__________(填“消耗”或“产生”)同样数量的水分子。
(3)将构建好的基因表达载体导入大肠杆菌前,需用___________________处理大肠杆菌,使之成
为________胞,以提高转化效率。目的基因是否成功导入大肠杆菌,可采用______________进行检测。