知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．（2016春•宝应县期中）p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：
（1）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有    ．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有    ．
（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的    键切开，形成    末端．
（3）p53基因应插入载体的    之间，以便于基因的表达．
（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是    ．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要    种引物．经3次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为    ．

难度：中等

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2．回答基因工程中的有关问题：
Ⅰ．限制酶是基因工程中的重要工具酶，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图甲、图乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ
识别序列及切割位点
（1）一个图甲所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有    个和     个游离的磷酸基团？
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越    ．
（3）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止    ．
Ⅱ．原核生物（如大肠杆菌）是基因工程中较理想的受体细胞，它们具有一些其他生物没有的特点：①繁殖快②多为单细胞③    等优点．大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用    处理细胞，使之成为    细胞，然后完成转化．
Ⅲ．植物基因工程中将目的基因导入受体细胞最常用的方法是    ，且一般将目的基因插入Ti质粒的    中形成重组Ti质粒，这样可将目的基因整合到受体细胞的染色体上．若要避免基因污染，一般需将目的基因导入植物细胞的    DNA中．

难度：中等

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3．科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达．但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，据图回答：

（1）过程①表示的是采取    的方法来获取目的基因．
（2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶    （填“I”或“II”）切割目的基因；用限制酶    （填“I”或“II”）切割质粒，用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过    原则进行连接．
（3）人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是    ．
（4）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为    ．
（5）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，经过一定时间培养后，能够在含有氨苄青霉素的培养基上生长的，说明已导入了    ，反之则没有导入．

难度：中等

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4．表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ
识别序列及切割位点
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前、后，分别含有    、    个游离的磷酸基团．
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越    ．
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是    ．
（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止    ．
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入    酶，若两两相连，则连接产物中有哪几种情况？    ．
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了    ．
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在    的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测．

难度：中等

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5．口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病．科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗（主要成分：该病毒的一种结构蛋白VP1），过程如图所示．请据图回答下列问题：

（1）在上述实验过程中所涉及的生物技术工程有    、    ，如图所示②成功构建重组质粒的过程中，需要用到的工具酶有     和    ．
（2）⑤过程代表的是    ，⑥过程中重要的两种植物激素是    和    ．
（3）若要检测转化成功的蕃茄植株，除检测标记基因产物外，还可采用    技术检测目的基因在蕃茄体内是否转录．
（4）该过程运用原理有    、     等．
（5）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用    技术对目的基因进行扩增，该技术的反应体系中应含有    、酶、原料、模板等；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有    ．

难度：中等

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6．口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病．科学家尝试利用转基因番茄生产口蹄疫疫苗（其主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPl），过程如图所示．请据图回答下列问题：

（1）图示②成功构建重组质粒的过程中，需要用到的工具酶是    、    ．
（2）图示⑤⑥代表的过程分别是    、    ．
（3）若要检测转化成功的番茄植株，除检测标记基因的产物外，还可采用    技术，检测目的基因在番茄体内是否转录．
（4）图示⑤⑥⑦代表的过程所涉及的生物工程技术是    ．
（5）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用PCR技术，对目的基因进行扩增．该技术需要的条件是：引物、酶、原料和    ；然后构建基因表达载体．基因表达载体中，除了具有目的基因、启动子、终止子及复制原点之外，还需具有    ．
（6）图中将目的基因导入受体细胞的方法是    ．

难度：中等

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7．国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进展．目前，已经成功获得经纯化的抗凝血酶Ⅲ蛋白，达到国际先进水平．如图所示是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图：

（1）根据流程图分析，动物乳腺生物反应器主要利用了体外受精和    技术（写2种）．
（2）要实现①超数排卵，应对崂山奶山羊A用     激素处理，然后收集卵子．通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是    ．
（3）过程④需将抗凝血酶Ⅲ基因注人受精卵内，在显微镜下判断卵子是否受精的标志是    ．
（4）在⑤之前要检测早期胚胎是否导入抗凝血酶Ⅲ基因，要提取囊胚期的    细胞；采用    技术．

难度：中等

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8．下图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．

（1）若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段，其产物长度分为    、    、    ．若图左DNA分子中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，产物中共有    种不同长度的DNA片段．
（2）为了提高试验成功率，需要通过PCR技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝．在目的基因进行扩增时，加入的引物有A、B两种，若该目的基因扩增n代，则其中含有A、B引物的DNA分子有    个．
（3）若将图中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是    ．

（4）为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在含    的培养基上培养，得到如图示的菌落．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含    的培养基上培养，得到如图4的结果（空圈表示与图3对照无菌落的位置）．挑选目的菌的位置为    ．
（5）若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链，如考虑终止密码，则其至少含有的氧原子数为    ．

难度：中等

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9．科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达．如图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程．请据图回答：

（1）步骤①和②中常用的工具酶是    和    ．
（2）图中质粒上有抗氨苄青霉素和抗四环素两个标记基因，经过①和②步骤后，有些质粒上的    基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒，由于目的基因的分隔使得该抗性基因失活．
（3）步骤③是    的过程，为了促进该过程，应该用    处理大肠杆菌．
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选    ，能在C中生长的大肠杆菌有    类．
（5）步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示．含目的基因的菌落位于    （D、E）上，请在图中相应的位置上圈出来．    ．

难度：中等

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10．质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中．如图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程．请据图分析回答：

（1）过程②将目的基因导入质粒后，需要借助    酶使质粒与目的基因的切口黏合．
（2）过程③    （有/没有）进行碱基互补配对．
（3）目的基因在大豆细胞中的表达包括    和    两个过程．
（4）过程④得到试管苗的关键步骤是利用含有一定营养和植物激素的培养基诱导植物细胞进行    和    ．
（5）为了检测通过④过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性，可采用的方法是    ．

难度：较难

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