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          共50条信息

            • 1．

              下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

              限制酶

              BamHⅠ

              HindⅢ

              EcoRⅠ

              SmaⅠ

              识别序列及切割位点


              （1）一个图 1所示的质粒分子经BamHⅠ和HindⅢ同时切割前后，分别含有____、_____个游离的磷酸基团。
              （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。
              （3）用图中的质粒和外源 DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是             。                    
              （4）与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______________________________ 。
              （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入___________酶。
              （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_________________________。
              （7）为了从 cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_______________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
              难度：较易
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            • 2．
              水稻是重要的粮食作物之一．已知高秆（D）对矮秆（d）是显性，抗病（R）对易感病（r）是显性，控制上述两对性状的基因分别位于两对同源染色体上．现有纯合的水稻品种甲（DDRR）和乙（ddrr）．请分析回答：

              （1）在图A所示杂交过程中，F1基因型为 ______ ，播种F1，长出的植株将会产生基因型为 ______ 的花粉，将这些花粉进行离体培养，获得 ______ 幼苗后再用 ______ 试剂处理，所得全部植株中能稳定遗传并符合生产要求的个体理论上占 ______ ，此育种方法与杂交育种相比优点是 ______ ．
              （2）若将图A中F1与另一水稻品种丙杂交，后代表现型及比例如图B所示，由此判断丙的基因型是 ______ ．
              （3）运用杂交育种的方法培育符合生产要求的新品种时，按照图A程序得到F2后，应通过 ______ 的方式来逐代淘汰不符合生产要求的个体．按照现代生物进化论的观点，这种选择能定向改变种群的 ______ ，导致种群朝着一定的方向进化．
              难度：较易
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            • 3．
              为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案．请分析回答下列问题：
              （1）甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是 ______ ．②过程中可用 ______ 技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因；构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有 ______ ，它能把目的基因整合到水稻体细胞的 ______ 上．
              （2）乙方案中，在体细胞杂交前需要用 ______ 酶除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用 ______ ．通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过 ______ 两个过程，在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外还需要添加 ______ ．
              （3）与传统育种方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是 ______ ．
              难度：较易
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            • 4．

              （10分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

              (1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________________和________________。

              (2)质粒运载体用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下：

              难度：较难
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            • 5．

              继乳腺生物反应器之后，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，请回答下列问题：

              (1)人的生长激素基因能整合到小鼠染色体的DNA上，原因是____。

              (2)将人的生长激素基因导入小鼠的受体细胞时，常选用____作为受体细胞，使用____技术。

              (3)从重组细胞培养到到____个细胞的早期胚胎时可以移植，在胚胎移植前还可通过____技术获得较多胚胎。

              (4)若从早期胚胎中分离出胚胎干细胞，通过体外诱导分化，培育出____，解决临床上存在的____和器官移植后免疫排斥反应问题，还可以在添加____的培养液中维持不分化状态。

              难度：难
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            • 6．

              [生物——现代生物科技专题]

                   

               CTB是霍乱弧菌产生的肠毒素（蛋白质）结构的一部分，可用作针对霍乱弧菌的疫苗。研究人员提取了控制CTB合成的基因（ctb），构建基因表达载体（如图所示），将其导入番茄，然后用转基因番茄饲喂试验小鼠，检测疫苗的有效性。请回答相关问题：

                    （1）为了在短时间内获得大量基因，可以采用__________技术。与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程有何不同？_______________（写出一点即可。）

                    （2）使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来，原因是____________________。

                    （3）可采用__________方法将基因表达载体导人番茄细胞，然后在加入了__________的培养基中进行初步筛选，之后还需用__________方法检测ctb基因是否整合到番茄染色体的DNA上。

                    （4）提取转基因番茄不同部位的蛋白质进行检测，发现只有果实中含有CTB。ctb基因只能在果实细胞中表达，这与基因表达载体中的__________有关。

                    （5）用转基因番茄果实饲喂试验小鼠，若能在小鼠的血清中检测到__________，则说明该转基因疫苗是有效的。

              难度：较难
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            • 7．

              （生物—选修3 现代生物科技专题）

              在药品生产中，人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素，白细胞介素，凝血因子等各种高质量低成本的药品，请分析回答：

              (1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶，其中限制酶切割的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿键,其特点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

              (2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成包括＿＿＿＿＿＿＿＿和                   两个阶段。

              (3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

              (4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技术是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，检测的原理是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

              难度：难
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            • 8． 2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家．科学家把c-Myc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成诱导多能干细胞--iPS细胞，这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞．
              （1）基因工程中经常使用的工具酶是_____________________，常用的载体除了动植物病毒外还有____________和___________．
              （2）若想增强载体病毒颗粒的感染性，可利用______技术改造病毒外壳蛋白，直接对______进行操作．
              （3）应用______技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成早期胚胎，使用从______中获得的胚胎干细胞，在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进其______得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为____________．
              （4）iPS细胞在体外已成功地被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，究其本质原因是基因__________________的结果．
              难度：难
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            • 9．

              根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

              (1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。

              (2)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。

              (3)反转录作用的模板是________，产物是________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术扩增。

              (4)基因工程中除质粒外，________________和________________也可作为运载体。

              (5)若用重组质粒转化大肠杆菌，常用________处理大肠杆菌，使大大肠杆菌成为                    态细胞，以利于表达载体进入。

              难度：较难
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            • 10．

              家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力，将人的干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养可以提取干扰素用于制药。

              （1）进行转基因操作前，需用        酶处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。在动物细胞培养中常加一定浓度CO2，其主要作用是        。

              （2）在转基因操作过程中的核心步骤是        。启动子位于基因的        ，是        识别和结合的部位。

              （3）人的干扰素基因一般来自cDNA文库，其属于        基因文库。若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，从分子水平上可以采用的方法是        。

              难度：较易
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