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            • 1. 目前第二、三代病毒疫苗的研制是基于DNA重组技术而建立的.请分析回答下列问题:
              (1)第二代疫苗是以编码病毒抗原蛋白的RNA为模板,经    酶的作用获得目的基因,再利用    等工具酶构建基因表达载体.
              (2)要将重组质粒导入大肠杆菌,应先用    处理大肠杆菌,使大肠杆菌转变为    态;再将    在缓冲液中混合培养完成转化过程.
              (3)第三代疫苗即“DNA疫苗”是将编码某种抗原蛋白的DNA注射到动物体内,该DNA可在生物体内    出相应的抗原蛋白.
              (4)对于基因工程产品安全性的争论越来越激烈,目前转基因生物的安全性主要体现在食物安全方面、        三个方面.
            • 2. 小鼠的某种抗体由轻链和重链组成,科学家将编码轻链和重链的基因分别导入两个不同的烟草植物体内,然后让两株植物进行杂交就能获得可同时编码轻链和重链两种多肽的植株,即合成小鼠抗体的转基因植物.回答下列问题:
              (1)若要获取小鼠的编码轻链和重链的基因,可以先提取小鼠浆细胞中编码两条链的mRNA,然后通过     过程获取小鼠的cDNA,并利用    技术对目的基因进行扩增.
              (2)在构建基因表达载体时,需要用到的工具酶有    ,基因表达载体中的目的基因两端的序列分别是        
              (3)用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,常常将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的    
              上.检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术,一般用标记的    作探针.
              (4)若想大规模培育能合成小鼠抗体的转基因植物,可采用    技术.
            • 3. 某科研机构研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗,对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果,其有效成分是该菌的一种表面抗原蛋白质,请回答下列问题.
              (1)要获得编码该菌表面抗原的基因,可提取出该菌的mRNA,并将mRNA    .要大量获得表达特异抗原的基因,可采用    技术.
              (2)基因工程的核心步骤是构建    ,该结构除了抗原基因(目的基因)外,还必须有启动子、终止子以及    
              (3)目的基因进入受体细胞内,并且在变体细胞内稳定和表达的过程,称为    .在表达过程中,启动子需与    识别和结合,从而驱动转录过程.最终翻译是否成功,常用的检测方法是    
              (4)与传统疫苗相比,基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生    (填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”).基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的.基因治疗是把    导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的.
            • 4. Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因,因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因.请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
              (1)要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因,可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列,设计特异性    ,再利用    技术扩增出Bt毒蛋白基因.
              (2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有    ,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的    上.这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是    法.
              (3)要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体水平上还需要做    实验;若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白,在分子水平上可利用    方法进行检测.
              (4)目前,转基因植物的安全性问题是社会争论的热点.如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全;但也有人认为转基因植物的种植减少了    的使用,有利于减轻污染.面对转基因技术的利弊,我们应持有的正确做法是    
            • 5. (1)在植物基因工程中,构建重组Ti质粒时,通常要用    分别切割    和Ti质粒,再用    进行连接.
              (2)动物细胞体外培养时,要保证被培养的细胞处于    的环境,在营养方面最终需在培养基中加入    等天然成分.细胞培养需在适宜的理化条件下进行,此外还需要一定的气体环境,其中C02的主要作用是    
            • 6. 干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白,具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性.回答下列问题:
              (1)干扰素的作用机理是:干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体,激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白,其中有些蛋白可通过激活    使病毒的RNA水解;有些则可与    (细胞器)结合,通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用.
              (2)利用基因工程生产干扰素的方法之一是:利用    酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体,采用    的方法导入牛的受精卵细胞中,经胚胎早期培养至    期,移植入母体内发育成熟,即可获得能产生干扰素的转基因牛.
              (3)利用细胞工程也能生产干扰素,其设计思路是:将相应的免疫细胞和瘤细胞利用电激、PEG、    等方法诱导融合,再利用    培养基筛选出杂交瘤细胞,经细胞培养可获得大量干扰素.由于干扰素在体外保存困难,可利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→    →推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列.
            • 7. 若婴幼儿生长激素分泌不足会导致侏儒症,某科学团队利用多种现代生物技术通过奶牛乳腺生物反应器来生产人的生长激素.请回答下列问题.
              (1)鉴别受体细胞中是否含有目的基因,需借助基因表达载体中的    筛选受体细胞.   若要检测牛奶中是否含有生长激素可通过    技术检测.
              (2)若将人的生长激素基因导入牛的精子中,通常采用    法使精子获能,与发育到    期的卵母细胞进行受精作用.在胚胎的培养液中添加一定量的    ,可以防止培养过程中的细菌污染.
              (3)当胚胎发育到囊胚阶段,选取囊胚的    细胞做DNA分析,进行性别鉴定,筛选出    胚胎.为了提高胚胎的利用率,可将所选胚胎的    均等分割,再进行胚胎移植.
            • 8. 我国科学家通过基因工程成功培育出转基因抗虫棉.请回答下列问题.
              (1)基因工程常用质粒作为载体,是由于质粒具有        等特点.
              (2)利用农杆菌转化法将抗虫基因导入植物细胞,构建重组Ti质粒时,需将含抗虫基因的DNA片段插入到Ti质粒DNA的    区域上.
              (3)利用PCR技术扩增抗虫基因过程中,将温度加热至90-95℃,然后冷却至55-60℃,再加热至70-75℃的目的是    
              (4)农杆菌侵染植物细胞后,可以使抗虫基因插入到植物细胞中染色体的DNA上,则是否一定能表现出抗虫性状?    ,理由是    
              (5)可利用    技术将含有抗虫基因的植物细胞培育成抗虫植株,该技术证明了分化的植物细胞,仍然具有    
            • 9. 干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白,具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性.请分析回答:
              (1)干扰素的产生受细胞内基因的控制,通常处于抑制状态.在病毒刺激下,干扰素基因经    、翻译形成干扰素前体,进一步加工后形成成熟的干扰素,通过    方式分泌到细胞外.
              (2)某些干扰素可作用于宿主细胞膜上的相应受体,激活该细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白,其中有些蛋白可通过激活RNA酶使病毒的RNA    ,有些则可与    (细胞器)结合,通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用.
              (3)某些干扰素可抑制肿瘤细胞DNA的合成,通过减慢细胞    分裂过程抑制肿瘤.还有些干扰素可提高吞噬细胞将抗原呈递给    细胞的能力,从而在免疫调节中发挥作用.
              (4)获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取,但产量很低.科学家利用    酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子(即RNA聚合酶    的部位)等调控组件连接在一起,采用    的方法将重组DNA导入牛的    细胞中,经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟,即可获得能产生干扰素的转基因牛.大大提高了干扰素的产量.
            • 10. 日本的一个研究小组将Aequorea victoria水母中编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因导入长尾猕猴的卵母细胞中,最终获得在紫外线照射下能发绿光的“绿光猴”.请回答下列相关问题:
              (1)从水母中获取GFP基因后,可利用    技术获得大量该基因,该过程所利用的酶必须具有    的特点.
              (2)导入目的基因的卵母细胞需培养至    ,才能与获能的精子受精.精子和卵细胞间的信息交流是通过    方式实现的.
              (3)受精卵培养至    时期可进行胚胎移植,移植的胚胎在受体内存活的生理学基础是    
              (4)GFP基因能在猕猴细胞中表达,是因为不同生物共用    ,若“绿光猴”只是部分细胞合成了绿色荧光蛋白,这是     的结果.
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