3．
人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与血纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。
（1）已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的编码序列（即模板链的互补链序列）为TGT，而丝氨酸的密码子为UCU，因此突变基因编码该氨基酸的编码序列应设计为______。
（2）若获得的t-PA突变基因如图1所示，那么质粒pCLY11需用限制酶______和______切开，才能与t-PA突变基因高效连接。
（3）将连接好的DNA分子导入大肠杆菌中，含t-PA突变基因重组DNA分子的细胞应具有的性状是______。
A．新霉素抗性且呈蓝色 B．新霉素敏感且呈蓝色
C．新霉素抗性且呈白色 D．新霉素敏感且呈白色
（4）层析是蛋白质或酶分离提纯的重要步骤。在图2所示的层析装置中，层析柱内装填了特定的细小固体颗粒（称为层析介质），待分离的蛋白质或酶混合溶液流进流出层析柱，便可将目标蛋白与杂蛋白高效分离。试根据题干信息判断，为了高效分离t-PA突变蛋白，层析介质表面事先应交联或固定______。制造该性能优异t-PA突变蛋白的过程称为______工程。