I.自然界中，有许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用溥荷叶提取薄荷油。请回答有关问题：

（1）薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用______（鲜、干）薄荷叶作原料，其原因是____________________。

（2）用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是________，原理是_________________。

（3）用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是__________。常用于分离油层和水层的器皿是_________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是________，除去固体硫酸钠的常用方法是______。

II.将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。请回答下列问题：

（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用__________技术进行扩增。把基因转入农杆菌内时常用__________处理农杆菌，使之成为感受态细胞。

（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可将乙肝病毒表面抗原基因转移至草莓细胞中的________上。目的基因进入草莓细胞内并在草莓细胞内维持稳定和表达，这个过程称为____________。

（3）在基因工程操作过程中，需要用________酶和________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有_________________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。

（4）在分子水平上，可采用_________________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。

某种荧光蛋白(GFP)在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5’末端，获得了L1-GFP融合基因(简称甲)，并将其插入质粒PO。构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。

（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒PO时，使用了两种限制酶，这两种酶是___________.使用这两种酶进行酶切是为了保证___________,也是为了保证___________.

（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色的荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了______________和______________过程。

（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的______________移入牛的__________中，体外培养，胚胎移植等。

（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的_______(填”mRNA””总RNA”或”核DNA”)作为PCR模板。

控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义。目前，分离精子技术是有效的性别控制方法。例如：牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右，利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛（如下图所示）。 根据以上信息回答下列相关问题：

（1）图中过程①通常采用体外受精技术。在这个过程中获能的精子与卵母相遇时，首先快速分裂完成减数第二次分裂，当观察到卵细胞周围有_______时，标志着受精；防止多精入卵的生理反应有_______________________________________________。

（2）胚胎移植时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行___处理；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生___反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

（3）为了确保得到所需性别的试管牛，往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定，请举出一种对早期胚胎进行性别鉴定的方法（只需写出名称或简要原理）：____________________________。

（4）人们利用试管动物技术成功培育了转基因动物，在基因工程操作的基本程序中，基因工程的核心是______，科学家利用基因工程技术，使转基因动物本身变成“批量生产药物的工厂”。如建立的生产生长激素的乳房生物反应器，即：科学家将____________________等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产所需要的药物。

党的十九大报告指出要“大力度推进生态文明建设……全面节约资源有效推进，能源资源消耗强度大幅下降。重大生态保护和修复工程进展顺利，森林覆盖率持续提高。生态环境治理明显加强，环境状况得到改善”。请回答下列相关问题：

（1）生态工程是对________进行修复重建，对________进行改善，促进人和自然的和谐发展。

（2）全面节约资源有效推进，能源资源消耗强度大幅下降很大程度上得益于实行“________”的原则，从而实现废弃物的资源化。

（3）实行生态工程，很多时候还需要考虑人文关怀、贫困地区的收入等问题，才能很好的解决“前面造林，后面砍林”的现象，这遵循的是生态工程的________原理。

（4）在保护濒危植物方面，运用了很多技术，比如微型繁殖运用的是________技术，其原理是________。

（5）在处理城市生态系统垃圾时，采用了生物治理法，分解者处理垃圾的相关目的基因从分解者体内用酶切割下来，再与________相连导入受体菌。

分析材料回答下列现代生物科技方面的问题：

⑤若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是__________________。

③在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目____________（填“相同”或“不相同”），性染色体组合____________（填“相同”或“不相同”）。

近期，中国和韩国的科学家利用某项技术去掉了猪体内的肌肉生长抑制基因，然后把这些“改造过的基因”植入猪的受精卵中，进而发育成肌肉细胞生长不受限制的“肌肉猪”。回答下列问题：

（1）利用体外受精的方法获得猪的受精卵时，采集卵母细胞时，可用__________激素处理母猪，使其排出更多的卵子，然后从________中冲取卵子，与获能的精子在体外受精。

（2）“改造过的基因”需与________等拼接成基因表达载体再导入受精卵中。

（3）将具有“改造过的基因”的受精卵细胞培育成“肌肉猪”需利用_________________等胚胎工程技术。胚胎工程技术最后一道工序在生产实践中的最大意义是__________。

去年冬季我国北方再次爆发流感，专家指出接种流感病毒疫苗仍是预防的有效措施。流感病毒为RNA病毒，M基因编码流感病毒表面抗原（M蛋白）。请回答下列问题：

（1）由病毒RNA通过________________可获得病毒DNA，若要通过PCR技术扩增M基因，前提是设计M基因对应的_____________ 。

（2）构建M基因表达载体所用的工具酶是 ____________________ 。若要将M基因表达载体导入到大肠杆菌细胞内，以大量生产疫苗，通常先用钙离子处理大肠杆菌，其目的是 _______________________。检测M基因是否转录出mRNA的具体方法是使用__________________与提取出的______做分子杂交。

（3）新型疫苗—“DNA疫苗”是将含M基因的重组表达载体直接导入人体内，在人体细胞内通过M基因的表达产生__________，刺激机体通过免疫过程产生_________，以提高机体的免疫能力。

以现有大豆品种作为受体材料，利用基因工程技术，获得转基因植株，分析其对疫霉根腐病的抗病性，筛选出抗病大豆新株（品）系。请据此回答问题：

（1）基因工程的核心技术是____________ ，该过程用到的酶有_________________________。

（2）在用土壤农杆菌介导时往往要用 _____处理土壤农杆菌，使之成为________细胞，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。

（3）抗性植株的分子生物学检测是基因工程成功与否的重要一环，其中检测目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA的方法是 _________________ ，其个体生物学水平的检测方法为_____________________ 。

（4）将转基因大豆细胞培养成转基因大豆植株，需要应用的工程技术是_____________________，其依据的原理是 _______________。

基因工程是从分子水平对基因进行操作从而实现人们定向改造生物，得到人们所需要的生物性状或生物产品的技术。目的基因的获取是基因工程的第一步，常见的方法是构建基因组文库。请分析并回答下列问题：

（1）构建基因组文库的一般步骤：

①提取某种生物体内的___________，用适当的限制酶处理，得到一定范围大小的DNA片段；

②DNA片段分别与载体结合，得到重组载体；

③重组载体导入到__________的群体中储存，基因组文库构建完成。

（2）与基因组文库相比，cDNA文库的基因数相对要少。其原因是______________。

（3）载体与DNA片段结合前，需要使用同种的限制酶处理。其目的是____________ 。

（4）受体菌在导入重组载体之前，常用_________处理，提高导入的成功率。