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            • 1. 如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:

              (1)分析可知,科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的 ______ ,最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于 ______
              (2)图示工程中,将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为 ______ ,常用的方法是 ______
              (3)图示中,作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在 ______ 期,常通过 ______ (物理方法)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.
              (4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为 ______ 培养基.通常在培养基中还需要加入适量的 ______ 等天然成分.
              (5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过 ______ 方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧的实质是 ______
            • 2. 如图表示转基因马铃薯的培育过程,请回答相关问题:

              (1)如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA反转录产生的 ______ 片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做马铃薯的 ______
              (2)据图分析,构建重组质粒时,用 ______ 酶对含目的基因的DNA和质粒同时进行处理.
              (3)重组质粒中,目的基因的两端还必须有 ______ 和终止子.用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后,采用 ______ 技术检测转基因马铃薯的 ______ 上是否插入了目的基因,同时还要采用 ______  技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达.
              (4)培育愈伤组织的固体培养基中,除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外,还需添加的物质是 ______ ,添加卡那霉素的作用 ______
            • 3. 多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损.成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜.利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期.科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如图.据图回答下列问题:

              (1)若已获取PG的mRNA,可通过 ______ 方法获取PG基因.PCR技术扩增目的基因的前提是 ______ ,以便根据这一序列合成引物.
              (2)该质粒含14000碱基对(14kb),若同时使用两种限制酶切割,产生的片段有5kb、7.5kb、1.5kb,则只用限制酶BamHⅠ切割时产生的片段长度分别是 ______ ______
              (3)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有 ______ 的培养基进行筛选.如果想通过实验鉴别细胞壁是否再生,可将其置于质量分数为30%的蔗糖溶液中,观察细胞 ______ 现象进行判断.
              (4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与 ______ 互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达,使番茄果实的保质期延长.
            • 4. 如图是科学家采用不同的方法培育良种牛的过程,其中①~③是结构,A~E是良种牛,a~h为操作过程.请据图回答有关问题:

              (1)“试管牛”技术的操作流程是 ______ (用图中字母和箭头表示).
              (2)图中数字标号②代表的结构名称 ______ ,c操作时需注意将③ ______
              (3)A~E中性别一定相同的牛有 ______ (填字母),一定是雌牛的是 ______ (填字母).
              (4)图中所示的激素是 ______ ,过程h常用的方法是 ______
              (5)受体母牛必须和供体牛属于同一物种,移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 ______
            • 5. 如图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程,请据图回答下列问题.
              (1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-GATC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-GGATCC-,那么在①过程中,应用限制酶 ______ 切割质粒,用限制酶 ______ 切割抗虫基因.①过程在 ______ (填“体内”或“体外”)进行.
              (2)为在短时间内大量获得目的基因,可用 ______ 技术进行扩增,其原理是 ______
              (3)通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有 ______ 的培养基上,若大肠杆菌能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入,该培养基从功能方面属于 ______ 培养基.
              (4)⑤过程所用技术称为 ______ ,从遗传学角度来看,根本原因是根细胞具有 ______
            • 6. 登革热病毒可以感染人类并导致严重疾病,为获得适用于临床检测的病毒抗原,研究者从登革热病毒中获取其外膜抗原基因,让它在大肠杆菌中进行表达,具体过程如图.
              请回答下列问题:

              (1)登革热病毒需培养在动物细胞中,原因是 ______ .细胞培养液中常常需要添加 ______ ,以防培养过程中受污染.
              (2)①过程包括 ______ ______ 扩增,分别需要的酶是 ______ ______
              (3)②过程需要的工具酶是 ______
              (4)获得的病毒蛋白可用于检测患者血清中的 ______ (抗原/抗体),以确诊疾病.
            • 7. 转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞):

              (1)图中①过程用到的酶是 ______ ,这种酶主要有两类,一类是从T4噬菌体中分离得到的,另一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为 ______ .形成B的过程叫做 ______ ,这是基因工程的核心,除含目的基因外,还必须含有 ______ ______ ______ 等.
              (2)②过程常用 ______ 处理农杆菌,使之成为 ______ 细胞,利于完成转化过程.
              (3)图中③过程叫做 ______ ,④过程叫做 ______ ,将叶盘培养成草莓幼苗的技术是 ______
              (4)在分子水平上,可采用 ______ 的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原.
            • 8. 如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindIII、SmaI指示线所示为三种限制酶的酶切位点.

              据图回答:
              (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用限制酶 ______ ,同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 ______ 的培养基上进行.
              (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 ______ (填字母代号)
              A.启动子        B.tetR       C.复制原点       D.ampR
              (3)过程①可采用的操作方法是 ______ (填字母代号)
              A.农杆菌转化      B.大肠杆菌转化      C.显微注射      D.细胞融合
              (4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用 ______ (填字母代号)技术.
              A.核酸分子杂交   B. 基因序列分析   C.抗原-抗体杂交    D. PCR
              (5)基因工程的四个基本操作步骤是 ______ ______ ______ ______
            • 9. 黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力,是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因.科学家利用该基因.通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种.培育新品种过程中用到了PCR技术(如图所示),请回答下列问题:
              (1)通过反转录法得到 ______ 文库,从中选取抗草甘磷酶的基因.该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列,即 ______ ______
              (2)体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术,该技术所依据的原理为 ______ ,图中物质A是 ______ ,B酶是 ______ .PCR中A不能过短,主要原因是 ______
              (3)加热变性是使DNA双链打开,这一步是打开 ______ 键.在细胞内断此键用 ______  酶.
              (4)若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定,需要对玉米做 ______ 实验.
              (5)若实验结果不理想,为了提高抗草甘麟酶活性,可以通过 ______ 工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因.
              (6)第四轮循环产物中含有A的DNA片段所占的比例为 ______
              (7)PCR扩增中,理论上要获得等长的DNA片段,至少要扩增到第 ______ 次.
            • 10. 如图是利用基因工程和植物组织培养技术获得新植株的过程,请回答:

              (1)农杆菌的Ti质粒分布在细菌细胞的 ______ 中,图中A表示Ti质粒的 ______ ,它的特点是 ______ ,因为它含有控制合成 ______ ______ 的基因.
              (2)C→D过程,需要使用 ______ 处理,使D处于一种能 ______ 的生理状态.
              (3)从E到表现出新性状的植物,需要用到 ______ 技术.此技术一般用 ______ 培养基.在此培养过程中,要求无菌操作的原因是:一方面杂菌的生长会与目标培养物 ______ ;另一方面杂菌会大量产生对目标培养物 ______
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