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            • 1. 如图为蛋白质工程操作的基本思路,请据图回答下列问题:

              (1)目前蛋白质工程中难度最大的是图中编号 ______ 所示过程,其原因是 ______
              (2)实现③过程的依据有 ______ ,由③得到的基因编码区的脱氧核苷酸序列有 ______ (答“一种”或“多种”),这是因为 ______ .这属于哪种获取目的基因的方法: ______
              (3)若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质中获取的,则④过程表示 ______ .经过④过程得到目的基因,所采取的手段与基因突变相比最大的特点是 ______
            • 2. 苦荞是一种有名的经济植物,其含有的黄酮类化合物具有降血糖,血脂等功效.CHS是合成黄酮类化合物的关键酶.有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中,培育高产黄酮苦养品系.按图示回答:

              (1)过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒需要的酶是 ______
              (2)图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为 ______ ,除此以外还可以利用的方法有 ______
              (3)对过程②操作前,需先用Ca2+处理农杆菌,使其成为 ______ 细胞.通过该菌的 ______ 作用使CHS基因进入苦荞体细胞并插入到细胞的 ______ 上.
              (4)检测转基因苦荞培育是否成功,不能用抗原一抗体杂交技术进行检测的原因是 ______ ,可以比较转基因苦荞与普通苦荞的 ______ 含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定.
            • 3. 如图是两种限制酶的切割产生DNA片段末端的形式,请据图冋答:

              (1)图中Sma I限制酶识别的碱基序列是 ______ ,切割位点在 ______ 之间,两种限制酶识别并切割的位点不同,说明酶的作用具有 ______
              (2)将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子,需要的工具是 ______ ,新形成的化学键是 ______
              (3)用EcoR I将目的基因从一个DNA分子上切割下来,需要切 ______ 处,同时产生 ______ 个黏性末端.
              (4)基因工程操作中,通常是利用质粒作为载体将重组DNA分子送入细胞,质粒除了结构简单、独立于细菌拟核之外,还有哪些特点符合作为载体的条件?(请回答两点) ______
            • 4. 在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长.普通水稻体内无抗稻飞虱基因,如图为培育转基因抗稻飞虱水稻的技术流程.请据图回答:

              (1)A过程需要的酶有 ______ .质粒作为运载体必须具备的条件是 ______ .(至少写两条)
              (2)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入 ______ .D过程的方法称为 ______ .E过程必须经过 ______ 才能形成愈伤组织.H过程可利用 ______ 方法检测目的基因是否导入受体细胞.
              (3)科学家将转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养,获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占
              50%,说明转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔的 ______ 定律.若该转基因植株自交,则其后代中抗卡那霉素型与那霉素敏感型的数量比为 ______
            • 5. 科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草.如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点.请分析回答下列问题.

              (1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用 ______ 技术对目的基因进行扩增,扩增时需要在反应体系中加人DNA模板、 ______ ______ 核苷酸原料等.
              (2)用图中的质粒和目的基因构建取组成质粒,不能使用Smal酶切割,原因是 ______ .图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 ______ 酶对外源DNA和质粒进行切割.
              (3)为了确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位索标记的 ______ 作探针进行分子水平的检测,又要在个体水平上鉴定,后者的具体方法是 ______
            • 6. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示),请结合图示回答下列相关问题:

              (1)在进行细胞培养之前,要将组织分离成单个细胞,需要利用 ______ 酶处理.
              (2)用于核移植的供体细胞,一般都选用10代以内的细胞,原因是 ______
              (3)在进行原代培养时,细胞增殖还表现出 ______ ______ 等特点.
              (4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中,一般选取 ______ 时期的卵母细胞,去核常用的方法是 ______
              (5)选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因有:①卵母细胞体积大,易操作,营养物质丰富;② ______
              (6)早期胚胎培养的培养液成分比较复杂,由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入 ______
              (7)通过转基因奶牛分泌乳汁来生产人类所需药物,这类转基因动物被称为 ______
              (8)转基因奶牛的克隆成功,说明了动物 ______ 具有全能性.
            • 7. ch1L基因是蓝细菌(蓝藻)DNA上控制叶绿素合成的基因,为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞.技术路线如图甲所示,请据图分析回答问题.

              (1)与真菌相比较,蓝细菌在结构上最主要的特点是 ______
              (2)①②过程中均使用的工具酶有 ______
              (3)构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是 ______ ______
              (4)若含有ch1L基因的DNA片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示.请回答问题:
              ①构建含ch1L基因的重组质粒A时,应选用的限制酶是 ______ ,对 ______ 进行切割.
              ②同时用酶1和酶4切割图乙中的质粒,则产生含有1500对碱基和8200对碱基的两种片段;用图中四种酶同时切割此质粒,则产生含有500对碱基和8200对碱基的两种片段;若换用酶1和酶3同时切割此质粒,则产生的片段是 ______
              (5)可用PCR技术对ch1L基因扩增时,需一对引物I、II,从理论上推测,该DNA分子通过PCR扩增四次,产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为 ______
            • 8. 如图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程,请据图回答下列问题.

              (1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-,那么在①过程中,应用限制酶 ______ 切割质粒,用限制酶 ______ 切割抗虫基因.
              (2)重组质粒上的标记基因的作用是 ______ ;重组质粒导入大肠杆菌的目的是 ______
              (3)通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有 ______ 的培养基上,若大肠杆菌能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入.
              (4)加入农杆菌的目的是 ______
              (5)⑤过程从遗传学角度来看,根本原因是根细胞具有 ______ .但需要先经过 ______ 形成愈伤组织.
              (6)为确定抗虫棉是否培育成功,既要进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,即 ______
              (7)该抗虫棉的变异类型属于 ______
            • 9. 如图是利用奶牛乳汁生产人的血清白蛋白的图解,根据下图回答:

              (1)上述过程中涉及到的现代生物技术主要有: ______
              (2)在形成图中③的过程中,实现②进入③的方法目前最常用的是 ______
              (3)图中①一般经 ______ 酶处理可以得到③.
              (4)基因工程的核心步骤是 ______
              (5)重组细胞④发育至胚胎⑤的过程中,细胞分裂方式是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
              (6)小牛⑦的性别是 ______ .⑦是⑥的后代,那么⑦与⑥的遗传性状一样吗? ______ .利用核移植的方法得到的动物叫做 ______
              (7)为保证被培养的动物细胞处于无菌无毒的环境,通常要在培养液中添加一定量的 ______ ,此外应定期更换 ______
              (8)⑤能在⑥子宫中存活的生理基础是 ______
            • 10. 番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬.但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏.为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种.操作流程如图.请据图回答.

              (1)过程①需要的工具酶有 ______
              (2)在筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的 ______ 的表达.
              (3)在番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法叫做 ______
              (4)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了多聚半乳糖醛酸酶合成时的 ______ 过程,最终使番茄获得抗软化的性状.
              (5)为促使图中培养②、③过程的顺利完成,通常需要在培养基中加入的调节物质是 ______ .要快速繁殖转基因抗软化番茄植株,目前常用的科技方法是 ______
              (6)为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染,可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入到番茄植物细胞的 ______ (结构)中.
              (7)除了图示培育方法外,还可通过 ______ 技术,对多聚半乳糖醛酸酶基因进行定向改造,从而使多聚半乳糖醛酸酶的结构和功能发生特定的改变以获得抗软化的番茄品种.
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