知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．正常细胞中含有抑癌的P53基因，能表达抗病毒蛋白，帮助修复轻度变异的基因，也能使重复变异的细胞发生凋亡而避免肿瘤的发生；若它失活而不能表达，则基因突变的细胞易形成肿瘤．基因治疗肿瘤是根本的方法，腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体．野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因，以及病毒复制基因E1，因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒．图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点．

（1）人体DNA的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 ______ 连接．
（2）DNA解旋酶直接作用于脱氧核苷酸之间的 ______ 键（化学键）；DNA限制酶直接作用于脱氧核苷酸之间的 ______ 键（化学键）．
（3）构建重组腺病毒时，限制酶最好选择 ______ ，理由是：既可以去除 ______ 基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏 ______ 基因以防止其 ______ ．
（4）将目的基因与腺病毒重组时，重组的成功率较低，依然还有大量非重组的野生型病毒的DNA，这是因为 ______ ．
（5）某DNA分子片段含有1000个碱基对．经扩增后，分别只用限制酶EcoRⅠ与同时用EcoRⅠ和HalⅢ两种方法切割，其电泳结果如图丙所示，可推断限制酶HalⅢ在该DNA片段上的切点有 ______ 个．

难度：较易

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2．大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体．某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶．当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落，反之，则形成白色菌落．如图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程．

请分析并回答：
（1）已获得的目的基因可利用 ______ 技术进行扩增．
（2）目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中，需要DNA连接酶恢复 ______ 键．
（3）将试管Ⅰ中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是 ______ ；大肠杆菌需事先用Ca²⁺进行处理，目的是 ______ ．
（4）将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养，培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质碳源、氮源、无机盐、水和生长因子，还应加入IPTG、X-gal以及氨苄青霉素，其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出 ______ ．
（5）若观察到培养基上出现 ______ 色菌落，则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒．如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因，则不利于重组质粒的筛选，原因是 ______ ．

难度：较易

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3．如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了质粒和目的基因中相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注．请回答下列问题：
限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
识别序列及切割位点

（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具有的基本条件有 ______ （答出两点即可），而作为基因表达载体，除了满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子．
（2）根据表格分析，经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段 ______ （“可以”或“不可以”）与经HindⅢ酶切后的产物连接，理由是 ______ ．
（3）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用两种限制酶切割，即BelⅠ酶和 ______ ．酶切后的载体和目的基因片段，通过 ______ 酶作用后获得重组质粒．为了扩增重组质粒，需将其转入处于 ______ 态的大肠杆菌．
（4）转入了重组质粒的大肠杆菌可在添加了 ______ 的培养基表面长出菌落．若用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中 ______ ．

难度：较易

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4．如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库 ______ 基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）．
（2）①过程提取的DNA需要 ______ 的切割，B过程是 ______ ．
（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用 ______ 扩增的方法，其原理是 ______ ．
（4）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA具有 ______ 的特点．目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是 ______ ，可以用 ______ 技术进行检测．
（5）如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要通过基因工程延伸--蛋白质工程．首先要设计预期的 ______ ，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的 ______ ．

难度：中等

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5．转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点．请据图回答下列问题：

（1）质粒的化学本质是 ______ ．
（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即 ______ ；将目的基因导入受体细胞的方法是 ______ ．
（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是 ______ ，一个质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为 ______ 个．请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段： ______ ．
（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异？ ______ ．卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞．由此推断，重组质粒中应含有 ______ 基因作为标记基因．

难度：较易

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6．毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．

（1）过程①中最常用的运载工具是 ______ ，所需要的酶是限制酶和 ______ ．
（2）在过程②中，用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO₂的气体环境中，CO₂的作用是 ______ ．
（3）在过成③中，用 ______ 处理以获取更多的卵（母）细胞．成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行 ______ 处理．
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ ．在胚胎移植前，通过 ______ 技术可获得较多胚胎．

难度：中等

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7．肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．

请回答：
（1）进行过程①时，需用 ______ 酶切开载体以插入let-7基因．载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 ______ ．
（2）进行过程②时，需用 ______ 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养．
（3）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2．据图分析，可从细胞提取 ______ 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 ______ （RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的．

难度：较易

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8．人的血清白蛋白（HSA）有许多作用，如对血液中的免疫球蛋白（抗体）有保护和稳定的作用．如果免疫球蛋白缺少了这种保护，免疫力就会变得不稳定，容易引起各种疾病，所以在临床上需求量很大．白蛋白通常从人血中提取，产量受到限制．如果应用基因工程、克隆等技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能．如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解，请根据图解回答下列问题：
（1）图中①一般经 ______ 处理可以得到③．将②导入③最为有效的方法是 ______ ．
导入前，需要将②与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤是基因工程的核心，称为 ______ ．
（2）通过核移植技术能够得到胚胎④，精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎．在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括 ______ 反应和 ______ 作用．
（3）若需要迅速得到大量转基因奶牛，可采用下列处理方法：将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤，此种方法称 ______ ．进行上述操作时，应选择发育至 ______ 或囊胚阶段的胚胎进行操作，对后者操作时必须注意将 ______ ．

难度：中等

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9．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力．以下是与植物疫苗制备过程相关的图．

表一引物对序列表
　引物对A 　P₁　 AACTGAAATGTAGCTATC
　P₂　 TTAAGTCCATTACTCTAG
　引物对B 　S₁　 GTCCGACTAGTGGCTCTC
　S₂　 AGCTGGCGTTTAGCCTCC
表二：几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶 Alu EcoRI PstI SmaI
切割位点 AG↓CT G↓AATC CTGCA↓G CCC↓CCC
TC↑GA CTTAA↑G G↑ACGTC GGG↑CCC
请根据以上图表回答下列问题．
（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 ______ ．
（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定．表1根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图．请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？ ______ ．
（3）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转基因所用的细菌B通常为 ______ ，鉴定目的基因是否整合到细胞染色体上的方法是 ______ ．
（4）构建符合要求的重组质粒T时需要用到的酶是 ______ 和 ______ 酶，重组质粒T时需要具备目的基因、复制原点、 ______ 、终止子和标记基因，标记基因的作用是 ______
（5）符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断．
①采用EcoRI和PstI酶切，得到 ______ 种DNA片断．
②采用EcoRI和SmaI酶切，得到 ______ 种DNA片段．

难度：较易

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10．将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中）．

（1）过程①需用同种 ______ 酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切；用 ______ 处理农杆菌有助于②过程的完成．
（2）为筛选出含重组Ti质粒的农杆菌，须用含 ______ 的培养基对农杆菌进行培养；过程③的目的是让重组Ti质粒的 ______ 进入棉花细胞．
（3）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加 ______ 以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是 ______ ．
（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是 ______ ，种植转基因抗虫棉能减少 ______ 的使用，从而减轻环境污染．

难度：较易

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