知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1． H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的靶向治疗具有重要的意义，但H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着细胞的高密度培养以及生产能力的提高，通过基因工程以改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力，相关研究步骤如下：
①细胞培养：将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养．一段时间后用胰蛋白酶处理培养液，漂洗后调整细胞悬液浓度为1×10⁷个•mL^-1．
②细胞融合及筛选：将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEC作用下进行融合，筛选出能产生抗人肝癌单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞．
④改造H18杂交瘤细胞：利用PCR技术获得小鼠的bel-X_i基因（抗凋亡基因），构建表达载体，通过脂质体法导入H18杂交留细胞，再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞．
请分析回答：
（1）步骤①肝癌细胞培养液中加入小牛血清的目的是______，培养液中还需加入一定量抗生素的目的是______．
（2）步骤②中，肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次，其目的是______．
（3）步骤③中，除了用50%PEC促进细胞融合外，常用的生物诱导因素是______，步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交廇细胞的原理是______．
（4）与普通抗肝癌药物相比，用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是______．
（5）乙醇有诱导细胞调亡的作用，为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型，科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交廇细胞凋亡，其结果如图所示，抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是______．

难度：易

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2．流感病毒最早是在1933年由英国人威尔逊•史密斯（Wilson Smith）发现的，他称为HIN1，现有很多变种．请回答下列问题．
（1）流感病毒遗传物质的基本组成单位有______种．
（2）流感病毒抗原变异幅度大，容易形成新的亚型，此时人群普遍缺乏对它的免疫力，往往引起较大的流行．人类缺乏对新型病毒的免疫力的原因是______．
（3）如图是一种RNA流感病毒疫苗研制流程．请回答有关的问题：
将纯化的某种病毒在特定的______中培养、增殖．图中步骤①所需要的原料是______；②选择性扩增S基因的关键是找到与S基因所对应的______；检验S基因是否表达S蛋白的关键是获得与S蛋白能够特异性结合的______．
（4）若要生产抗流感病毒的单克隆抗体，需用该流感病毒对小鼠进行反复注射；从小鼠的脾脏中得到相应的B淋巴细胞；将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用______进行筛选，得到杂交瘤细胞；对上述杂交瘤细胞，还需进行______和克隆化培养，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；将杂交瘤细胞在体内或体外培养，就可以从中提取出大量的能抗该流感病毒的单克隆抗体．

难度：较易

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3．
某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

回答下列问题：

(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过______次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是______小鼠，理由是____________________________________________。

(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有______________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是_______________________。

(3)杂交瘤细胞中有________个细胞核，染色体数目最多是________条。

(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是____________________。

难度：较易

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4．研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白是一种跨膜蛋白，在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达．抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段．图1表示H蛋白的结构，胞外区具有抗原特异性，图2示抗H蛋白单克隆抗体的制作过程，图中的“+”表示含有、“-”表示没有，Ig表示抗体．

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中______（填“低表达”或“高表达”）．制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，最简便的做法是根据H蛋白______区结构特点构建目的基因，转入原核细胞表达并提纯．
（2）将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中分离______细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂是______．
（3）将融合细胞在选择培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长．将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用______技术进行抗体阳性检测，从而筛选出______细胞．
（4）在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中，为避免有害代谢产物的积累，常采取的措施是______．
（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞．这充分体现了单克隆抗体______的特点．

难度：较易

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5．
抗体的结构如右图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。

（1）抗体是由___________细胞合成并分泌的。若抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，则二者的关系式为_____________。

（2）取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_____________检测以获得具有______________________特点的杂交瘤细胞。为获得大量的单克隆抗体，将得到的杂交瘤细胞置于含5%CO₂的培养箱中培养，其中CO₂的主要作用是____________________________。

（3）由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)”的C区和___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)的V区组合而成。

（4）为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的__________序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于____________工程的产物。

难度：中等

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6．近年来，生物工程运用分子生物学的最新成就，发展出一系列的技术，可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
(1)科学家为了建立生产“干扰素”的乳房生物反应器，利用基因工程技术，将         、目的基因、复制原点和标记基因等元件构建的基因表达载体，通过       方法，导入羊的受精卵中，最终发育成能生产干扰素的转基因羊。
（2）在单克隆抗体制备过程中，诱导B细胞与骨髓细胞融合获得杂交瘤细胞，可以使用的化学试剂是          ，此过程需要两次筛选，第二次筛选出                   ，单克隆抗体的优点有                            。

（3）在胚胎工程中，通过对供体母羊注射    激素，促进其         ，从而获得大量羊的卵细胞；获取的卵细胞需要培养至_______时期，才能与获能的精子结合。

难度：较难

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