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            • 1.
              如图是科学家利用小鼠成纤维细胞获得单克隆抗体的示意图.请据图回答:

              (1)获取转录因子基因需要的工具酶是 ______ ,因成纤维细胞较小,过程①将目的基因导入小鼠成纤维细胞时常用的运载体是 ______ .
              (2)过程②称为 ______ ,在此过程中,成纤维细胞在转录因子基因的作用下,转化为iPS胚性细胞,在体外培养条件下,iPS胚性细胞能不断进行 ______ .
              (3)过程③为动物细胞融合,此过程常用 ______ 、灭活病毒、电刺激等诱导细胞融合,融合后的Y细胞具有 ______ 的特性.
              (4)对杂种细胞Y进行 ______ 和 ______ 后,才能筛选出能产生特异性抗体的杂种细胞.
            • 2.
              制备单克隆抗体的过程中,需筛选出杂交瘤细胞.一般情况下,细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径,而骨髓瘤细胞没有此辅助途径,DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断,利用这一特性可以筛选出杂交瘤细胞.
              (1)制备单克隆抗体时,选用B淋巴细胞的原因是 ______ ,选用骨髓瘤细胞的原因是 ______ .研究发现,被激活的B淋巴细胞内含有发达的粗面内质网,这与 ______ 的功能相适应.
              (2)加入适量氨基碟呤的培养基称为 ______  培养基,氨基喋呤的作用主要是为了淘汰 ______ 细胞.
              (3)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合常用的化学试剂是 ______ .对杂交瘤细胞进行体外培养需要适CO2,CO2的作用是 ______ .
            • 3.
              如图1为生产HIV单克隆抗体的过程,图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径。据图分析回答。

              (1)图1中,过程①称为 ______ 技术,过程②融合实验完成后得到的杂交瘤细胞所产生的抗体的优点是 ______ 。
              (2)图2中,过程①需要用到 ______ 酶。一个DNA片段进行扩增最简便的方法是使用PCR技术,如果这个过程中消耗了引物62个,则进行了 ______ 轮的DNA复制。
              (3)若将重组质粒导入小鼠受精卵细胞中,通常应采取 ______ 技术。
              (4)用限制酶处理DNA片段,可使特定核苷酸序列特定部位的键断开。若用X、Y两种限制酶作用于图2中的DNA片段,并进行电泳分析,其结果如图3.A至D选项中,关于两种酶切位置的判断,正确的是 ______ 。
            • 4. 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了新思想.某国家重点实验室准备探索利用基因工程生产单克隆抗体,请回答下列问题:
              (1)实验室已获得无限增殖调控基因(prG).在体外,可采用 ______ 技术大量扩增该目的基因.该技术的基本反应过程:目的基因DNA受热 ______ 后解链为单链,与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下进行 ______ ,如此重复循环多次.该技术的前提是要有 ______ ,以便根据这一序列合成引物.
              (2)该基因工程操作的核心是 ______ .本研究中,受体细胞为 ______ ,欲将目的基因转入受体细胞,常采用 ______ 方法.若实验成功,则受体细胞既能 ______ ,又能 ______
              (3)制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术,使 ______ 细胞与 ______ 细胞融合,融合成功的细胞经过筛选就是所需要的 ______ 细胞.
            • 5. 利用细胞工程技术制备抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体,其主要流程如下:

              回答下列问题:
              (1)制备抗HCG单克隆抗体过程中,用到的动物细胞工程技术有 ______ ______
              (2)细胞DNA合成有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断.在HAT培养中加入了氨基嘌呤,杂交瘤细胞能连续增殖,未融合细胞以及同种融合细胞因不能增殖而死亡.由此可判断骨髓瘤细胞DNA合成存在 ______ (填“D”、“S”或“D和S”)途径.
              (3)步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测,该过程一般在多孔细胞培养板上进行.先将细胞悬浮液稀释到7-10个细胞/ml,再在每个培养孔中滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是 ______
              (4)用抗HCG单克隆抗体作出诊断试剂,能在妊娠初期即可作出诊断,主要是因为该抗体具有 ______ 的优点.
            • 6. 请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题.
              (1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂 ______ 作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的 ______ 培养,获得纯系细胞,同时还要进行 ______ 检验,以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞.
              (2)获得杂交瘤细胞后,在体外培养时需要特别加入的天然成分是 ______
              (3)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述,正确的是 ______
              A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长
              C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物
              (4)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体,科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞,该技术的核心步骤是 ______ ,噬菌体是这些关键基因的 ______
            • 7. 2014年埃博拉病在非洲蔓延,我国派出医疗队首次在境外组建医院,帮助非洲防控埃博拉疫情.
              (1)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染,破坏吞噬细胞等,使其不能暴露该病毒的 ______ ,以致感染信息不能呈递给 ______ ,从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程,导致机体对该病毒的 ______ 免疫功能下降.因此,病毒在体内快速增殖、致病.
              (2)用大肠杆菌生产埃博拉病毒的某蛋白(目的蛋白)时,因埃博拉病毒不是逆转录病毒,可先将埃博拉病毒的RNA与逆转率病毒的RNA重组,在 ______ 的作用下合成 ______ .再用 ______  切取该目的蛋白的基因,与质粒构建 ______ ,同时用 ______ 处理大肠杆菌使其成为感受态细胞.
              (3)用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠,通过 ______ 技术获得杂交瘤细胞,用于生产单克隆抗体治疗该病.单克隆抗体的优点是 ______
            • 8. 手足口病是五岁以下儿童中常见的传染性疾病.柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71)是引起手足口病的两个最主要的病原体,感染EV71或CA16都有可能引起严重的神经系统并发症甚至导致死亡.可利用生物技术手段制备手足口病疫苗,请根据所学知识分析回答下列相关问题:
              (1)为获得大量手足口病的抗体,可将 ______ 细胞与 ______ 细胞进行细胞融合,最常用的诱导融合手段是 ______ .至少经过 ______ 次筛选后获得的杂交瘤细胞,可通过 ______ ______ 生产大量抗体.这种方法获得的抗体具有 ______ ______ ______ 的优点.若得到的抗体不易保存,可通过 ______ 工程对天然抗体进行改造,使其满足人类需要.
              (2)科学家研制手足口病基因疫苗的基本过程为:获取病毒某基因后,与 ______ 结合形成的表达载体还必须具备 ______ ______ ______ 等;注入机体基因表达后,产生病毒的 ______ (填“抗体”或“抗原”),从而使机体对该病毒产生免疫.
            • 9. 如图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:

              (1)若A、B细胞为动物细胞,从A和B细胞到C细胞的过程中,常用 ______ 作为 ______ 来诱导融合.A、B融合为C的过程说明了细胞膜有 ______ 特性.
              (2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了 ______ .这种酶可能是 ______ 酶和 ______ 酶.由此生成的A和B细胞称为 ______ .A、B到C细胞的过程中,常用的物理方法是 ______ ;融合完成的标志是 ______ ;形成的D细胞还要应用 ______ 技术把D培养成植株.
              (3)若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为B淋巴细胞,那么D细胞称为 ______ 细胞.由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程,称为 ______ 过程.这种细胞既能无限繁殖,又能产生 ______
              (4)若该过程是制备单克隆抗体的过程,在A、B到C的过程中,所形成的C有 ______ 种,用来培养的D细胞应该是 ______ .从中选择出它的方法是 ______ 培养.
            • 10. 有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交过程中要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用.下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:

              (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上.具有一对隐性纯合基因(rr或hh)的个体,在光照强度大于800lx时都不能生长.要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是 ______
              (2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是 ______ ,这种育种方法的优点是 ______
              (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞,则d细胞特点是 ______ .由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有 ______ 的特点.生产上一般不能通过直接培养浆细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是 ______
              (4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解.请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来. ______
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