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            • 1.

              为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。

              请回答:

              (1)获得大量目的基因常用________技术,其原理是_________。

              (2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为________细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有________基因。

              (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断_______(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。

              (4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。

              (5)除了基因工程外,细胞工程和胚胎工程也在人类生活中发挥了巨大作用。例如“试管婴儿”自诞生就引起了世界科学界的轰动,甚至被称为人类生殖技术的一大创举。也为治疗不孕不育症开辟了新途径。“试管婴儿”的诞生实际上结合了________、早期胚胎培养、胚胎移植等多种技术手段。再如,通过动物细胞杂交技术制备的单克隆抗体具有__________和灵敏度高等特性,因而广泛应用于疾病的检测、肿瘤的定位等方面。

            • 2.

              已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但有些淋巴细胞不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合,加促融剂促进细胞融合,获得杂种细胞,并生产单克隆抗体。请回答:

              (1)生产单克隆抗体时,不直接利用浆细胞,主要原因是_______________ 。

              (2)①过程中,常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_____________________。

              (3)②过程为_______培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入CO2的目的是__________。

              (4)④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养,也可注射到小鼠_______内培养.体内培养与体外培养相比,其优点是_____________________。

              (5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞,需在③过程向培养液中加入________________,理由是杂交瘤细胞可利用____________________途径合成DNA,从而才能在该培养液中增殖。

            • 3.

              下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题:

              (1) 图1所示过程所用的生物技术有         

              (2) 将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选:一次是通过           培养基,筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过            检测,筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。

              (3) 通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X,其原因是该抗体具有                   的特点。

              (4) 图2中的重组细胞         (填“①”或“②”)实现了基因的重组。

              (5) 图2中的早期胚胎发育到         阶段才可以移植,在移植之前,需要进行质量检查,用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是                。

              (6) 为了获得多个基因型相同的优质奶牛,可采用的技术手段是         

            • 4.

              如图所示为细胞融合技术的一些过程:

               (1) 若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为B淋巴细胞,可以用_______( 写出一种)方法诱导融合。融合后的细胞种类多样,需要用特定的选择培养基筛选既能_____又能_______的D细胞。之后将D细胞在体外大规模培养,就可以从细胞培养液可以提取大量的纯度高、______的单克隆抗体了。      

               (2) 若A、B为单倍体烟草植物的原生质体,那么已经用___________酶降解脱掉了细胞壁。D细胞成活的标志是________。利用该技术培育烟草新品种依据的生物学原理是 ________________。

              (3) 若将二倍体基因型为AaBB的白菜体细胞,与二倍体基因型为ccDd的甘蓝体细胞融合,再由融合细胞培养成新个体,完成整个过程所用到的技术是________,新个体的基因型是______,是____倍体生物。

            • 5.

              细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,请据图回答相关问题:

              (1)若a、b分别为精子和卵母细胞,则从良种母牛体内采集的卵母细胞,一般要培养到________________阶段才能进行体外受精。

              (2)若a、b表示两种植物体细胞,在融合前,往往用____________________去除细胞壁。采用化学法形成c时,一般是用________________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是______________________,这种育种方法的优点是____________________________。

              (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则d细胞的特点是______________。用特定的选择培养基筛选获得d细胞,然后经_________________筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。其中d细胞克隆化培养的方法有两种:______________,这样经克隆化培养后制备的抗体有____________________________的特点。

            • 6.

              科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答:

              ( 1 )利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体,常用聚乙二醇、________、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行________和________,经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

               ( 2 )也有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图。

              ①酶A是指________,酶B是指__________________________。

              ②图中Ⅰ表示________,对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是______________,Ⅲ所指的细胞具有的特点是_______________。

            • 7.

              应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。

              (1)要使人的生长激素基因在牛的垂体细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、_________、__________________、标记基因等部分.在③之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人生长激素基因,宜采用_________________技术.③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用______           _____技术,培育出多头相同的转基因牛犊。

              (2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是___________细胞,Ⅱ代表的细胞具有____              ________的特点.

              (3)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,则与采用叶肉细胞相比较,其优点是_______________________________,⑤过程采用的技术是___________________________。科学家预言,此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后,将出现不抗虫的植株,此现象来源于_______________。

            • 8.

              图表示单克隆抗体的制备过程,请回答下列问题:

              (1)细胞A为小鼠________中产生的________细胞,细胞B为________细胞,细胞B的突出特点是________。诱导细胞A和B融合的诱导剂不同于植物细胞的是________。

              (2)细胞D是________。从中选择出它的方法是用________培养基。获得细胞D后,常用的培养方法是________和________。

              (3)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为________。与植物细胞培养基有所不同的是,还含有________。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是________。

              (4)单克隆抗体与常规抗体相比,具有________等特点。且单克隆抗体主要有哪些用途?________(列举一方面)。

            • 9.

              下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。请据图回答下列问题:

              (1)动物细胞工程中生产单克隆抗体的基础技术是______________________________。制备单克隆抗体依据的基本原理是________________________________________。

              (2)利用小鼠制备甲型H1N1流感病毒单克隆抗体的过程中,需先给小鼠注射一种纯化的H1N1流感病毒核衣壳蛋白,再从已免疫的小鼠脾脏中获得____________________。在②过程中,常采用____________________诱导融合。再经过筛选最终可获得④,该细胞群的特点是______________________________。 

              (3)若要大量制备单克隆抗体,可将④细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖,再从________________中提取、纯化获得单克隆抗体。也可将④细胞置于培养液中进行体外培养,在培养液中通常需加入__________等天然成分。

              (4)通过上述方法得到的单克隆抗体的优点是______________________________。

            • 10. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA __         ____,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
              (2)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有 ___         _.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的 ___      ___,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为 _____     _   
              (3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或 ______进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意       ____     .转基因牛是否培育成功,可以通过 __      ____技术从分子水平进行检测.
              (4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的 ___      ___与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是 _                        _____,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
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