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            • 1. 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.

              请回答:
              (1)①代表的是 ______ 过程.为获得A基因表达载体,需用 ______ 酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是 ______
              (2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是 ______ ,加入引物的作用是 ______
              (3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制 ______ 等条件.
              (4)过程③采用的技术是 ______ ,获得的X叫 ______  细胞.
            • 2. 请根据现代生物工程技术回答下列问题:
              (1)基因工程技术中对已获得的目的基因,常采用PCR技术大量扩增.该技术的基本过程是:目的基因DNA受热变性后解链为单链, ______ 与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下进行 ______ ,如此重复循环多次.
              (2)限制酶Smal能识别如图,并在图中箭头位置切断DNA.

              用限制酶Smal切割获取的目的基因需用 ______ 酶构建基因表达载体.
              (3)培育转基因小鼠除利用基因工程技术之外还需用到 ______ ______ 等技术.
              (4)制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术,使 ______ 细胞与 ______ 细胞融合,融合成功的细胞经过筛选就是所需要的 ______ 细胞.
            • 3. 科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠-人嵌合抗体,用于癌症治疗.如图表示形成鼠-人嵌合抗体的过程.请据图回答:

              (1)科学家改造抗体属于 ______ 工程的范畴,通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠-人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,
              (2)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂 ______ 的作用下与 ______ 融合,融合后的细胞,用 ______ 筛选出 ______ ,在经过 ______ ,多次筛选,选出 ______
              (3)这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于 ______ ,可大量制备.用抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成“ ______ ”.
            • 4.

              白细胞介素-2(IL-2),在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低,获得的IL-2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题:

              (1)利用基因工程生产IL-2,过程是:

              ①从健康人体外周静脉血分离能合成IL-2的免疫细胞,从中提取________,经逆转录获取目的基因,此过程需要的原料是________。

              ②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成重组载体,该载体的化学本质是________。该步骤是基因操作的核心,称为________。

              ③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2处理,使其成为________,再在一定温度下完成转化。

              ④在培养液中培养一段时间后,经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用________技术。

              (2)利用蛋白质工程对IL-2进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→________→________→找到对应的脱氧核苷酸序列。

              (3)利用细胞工程生产IL-2,思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出________细胞,经细胞培养可获得大量IL-2。

            • 5. 生物工程在医疗卫生方面得到了广泛应用,请回答下列问题.
              (1)利用 ______ 技术制备的杂交瘤细胞,可用于制备单克隆抗体.与体内抗体相比,单克隆抗体具有理化性质单一、 ______ 、可大量制备等优点.
              (2)干扰素、胰岛素等物质可以通过工程菌来大量生产.该技术中目的基因和运载体要用同种 ______ 切割,以产生相同的 ______
              (3)在完成体外受精的过程中,对已取得的精子要进行 ______ 处理,为了获取更多的卵细胞,一般要对雌性个体注射 ______ ,使其超数排卵.
              (4)利用细胞培养技术可以获取自身健康的皮肤,用于皮肤移植.在此过程中通入CO2的目的是 ______ ,在培养液中加入 ______ 酶,可防止细胞出现接触抑制现象.
            • 6. 近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势.狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消灭狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据.我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果.
              请根据上述材料,回答下列问题:
              (1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用 ______ 培养.
              (2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备.在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是 ______
              (3)如图所示是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              ①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是 ______ 细胞,该细胞能够产生 ______ .从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是 ______
              ②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的 ______ 、聚乙二醇或电激等诱导.
              (4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有 ______
            • 7. 回答下列问题:
              如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:
              (1)OA段的培养称为 ______ 培养,AB段可能发生了 ______ 现象,需要用 ______ 酶处理,以使组织细胞分散开来.
              (2)为制备单克隆抗体,需将 ______ 注射到小鼠体内,以此获取 ______ 细胞,同时可选取图中 ______ 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取细胞的细胞膜上的 ______ 比正常细胞显著减少.
              (3)为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用 ______ 培养基达到目的.杂交瘤细胞具有 ______ (特点)
            • 8. 动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,在动物细胞工程的其他技术中都得广泛应用(如图).下面是与动物细胞工程相关的问题,请分析回答:

              (1)在进行动物细胞培养时,首先要将动物组织剪碎,然后用 ______ 处理,以分散成单个细胞,制成细胞悬液.
              (2)动物细胞培养时,要保证细胞必需的营养、适宜的温度 和pH条件,还要提供无菌、无毒和适宜的气体环境.为达到无菌、无毒的环境条件,除了要对培养液和培养器具进行消毒外,还要① ______ ,② ______ .气体环境中CO2的作用是 ______
              (3)应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞,原因是 ______
              (4)如图表示单克隆抗体的制备过程,给小鼠注射特定抗原后产生的、与骨髓瘤细胞融合的细胞是 ______ .在细胞融合的过程中,常用的化学诱导剂是 ______ ;筛选出的杂交瘤细胞所表现出的优良性状是 ______
            • 9. 近年来,有关肿瘤细胞特定分子的靶向治疗研究进展迅速.研究发现,蛋白X是细胞膜上的一种受体,由原癌基因X编码,在一些肿瘤细胞中,原癌基因X过量表达会持续激活细胞内的信号传导,启动细胞DNA的复制,导致细胞异常增殖.利用动物细胞融合技术制备的单克隆抗体,可用于诊断和治疗原癌基因X过量表达的肿瘤.请回答下列问题:
              (1)同一个体各种体细胞来源于受精卵的分裂与分化.正常情况下,体细胞核遗传信息相同的原因是 ______
              (2)通过检测原癌基因X的 ______ ______ 可判断其是否转录和翻译.检测成人多种正常组织后,发现原癌基因X只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达,这说明 ______
              (3)根据以上信息,可推测原癌基因的主要功能是 ______
              (4)制备该单克隆抗体时,免疫动物的抗原可以是 ______ .B淋巴细胞识别抗原并与之结合,之后在适当的信号作用下增殖分化为 ______ ______
              (5)用该单克隆抗体处理原癌基因X过量表达的某肿瘤细胞株,发现其增殖能力明显下降.这是因为 ______
            • 10. 某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图所示.

              若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目为40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞.
              回答下列问题:
              (1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过 ______ 次免疫后才能有符合要求的.达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是 ______ 小鼠,理由是 ______
              (2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外,可能还有 ______ ,体系中出现多种类型细胞的原因是 ______
              (3)杂交瘤细胞中有 ______ 个细胞核,染色体数目最多是 ______ 条.
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