[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜素可以预防白内障、增强视力，还可以预防夜盲症，同时也是一种常用的食用色素。可以从微生物和胡萝卜中进行提取，过程如下。请回答下列问题：

（1）若要得到纯化的酵母菌R，常采用的分离方法是________。配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是________。

（2）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是________，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________（方式）加热以防止温度过高；现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的________怍为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

去水卫矛醇是以从美登木（一种常绿灌木或小乔木）中提取的卫矛醇为原料合成的一种药物，对动物移植性肿瘤有广谱抗肿瘤活性，能抑制DNA及RNA合成，可直接杀伤慢性粘细胞白血病的幼稚粒细胞，并能显著抑制骨髓造血功能，使血红蛋白含量降低，红、白细胞数目减少。请回答下列相关问题：

（1）为获取更多的卫矛醇，科研人员对美登木进行了一系列研究工作，如图所示：

①获得C植株的技术手段是________。繁殖方式是________。如果利用此技术获得卫矛醇，也可以用________（按物理性质分）培养基培养________，然后在培养液中提取。

②利用A植株育种的优点是________。D植株的培育过程所用的主要原理有________，一般情况下其体细胞最多可有________个染色体组。

（2）为减弱在治疗用药过程中去水卫矛醇的毒副作用，可以让其和单克隆抗体相结合制成“________”。这一过程利用了单克隆抗体的________的特性，产生单克隆抗体的细胞叫________。

请回答：

⑴①代表的是______过程，若要在体外获得大量的A基因，常采用______技术，该技术必须用到______等酶。

⑵过程③采用的实验技术是______，该技术的原理为______，在此过程中特有的诱导因素为______，获得的X是______。

⑶单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是______。

⑷对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的______所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以用图中的______进行特异性结合检测。

科学家对鼠杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：

（1）生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞，主要原因是    。

（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有    、   的特性。

（3）单克隆抗体制备过程运用了    和     等动物细胞工程技术手段。

（4）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有    。

（5）在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用    处理离体组织细胞使之分散开。

（6）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于    (生物工程)的范畴。必须直接对    进行操作。

回答下列问题：

(1)对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下：

第一步：土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要________(填“消毒”或“灭菌”)。

第二步：样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度，原因是________。

第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而________则不能生长繁殖。(注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作)

(2)若对土壤悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用稀释倍数为10⁴的样液涂布到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数________。

(3)对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定

若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是________、________。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色，pH升高的原因是________。

(4)分解尿素的微生物在生态系统中的作用是________。

35 近年来，由于食品安全、环境污染等问题的加重，胃癌的发病率不断增加。常见的切除、化疗、放疗等治疗手段对病人的身体副作用较大，而“生物导弹”(借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置)的定向治疗为胃癌患者带来了福音。下图是“生物导弹”——抗人体胃癌的单克隆抗体的制各过程。

回答下列问题：

(1)幽门螺旋杆菌的感染与胃癌的发生密切相关，幽门螺旋杆菌从细胞结构上与人体细胞相比，最显著的特点是________。

(2)从免疫学的角度分析，图中实验小鼠注射的甲是________，从小鼠的________(免疫器官)中可获得相应的B淋巴细胞。

(3)诱导细胞融合形成细胞乙的原理是________。若只考虑细胞的两两融合，理论上乙有________种类型，符合要求细胞的特点是________。

(4)丙需进行克隆化培养和专一抗体检测，经多次筛选后可获得数量较多的能分泌所需抗体的丁，细胞丁可在体外条件下大规模培养，也可以注射到小鼠________内进行体内培养，从而获得大量的单克隆抗体。该抗胃癌单克隆抗体与从动物血清中分离的抗体相比，最主要的优点是________。

如图是利用影印培养技术证明大肠杆菌产生抗链霉素突变基因的实验。具体方法是：

①首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的平板1的表面，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链毒素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平扳3上出现了个别抗链霉素的菌落。

②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到平板3上那几个抗性菌落的“孪生兄弟”。

③把平扳2上与平板3上菌落相应的—个部位上的菌落挑至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。

④重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。

请根据以上材料回答下列问题：

(1)大肠杆菌的同化作用类型为________，与酵母菌相比，大肠杆菌细胞在结构上的主要特点是____________________________。

(2)从培养基的功能上看，含有链霉素的培养基属于________培养基。若在培养皿的培养基中加入伊红和美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色表现为________________________。

(3)大肠杆菌抗链霉素基因存在于细胞的________结构上，而与生长、繁殖和遗传有关的基因主要存在于________中。

(4)3号、7号、11号培养基中加入链霉素的作用是_____________________________________________________，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明了________________________________________。

40[生物——选修3：现代生物科技专题]

白细胞介素－2(IL－2)，在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白，对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低，获得的IL－2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题：

(1)利用基因工程生产IL－2，过程是：

①从建立人体外围静脉血分离能合成IL－2的免疫细胞，从中提取________，经逆转录获取目的基因，此过程需要的原料是________________。

②用限制酶处理载体和目的基因后，用DNA连接酶处理，形成重组载体，该载体的化学本质是________。该步骤是基因操作的核心，称为________________。

③若选择大肠杆菌作为受体细胞，常用的转化方法是用Ca^2＋处理，使其成为________________，再在一定温度下完成转化。

④在培养液中培养一段时间后，经进一步处理获得产物，进行产物鉴定时可采用________________技术。

(2)利用蛋白质工程对IL－2进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→________________→________________→找到对应的脱氧核苷酸序列。

(3)利用细胞工程生产IL－2，思路是：将相应免疫细胞和瘤细胞融合，筛选出________________细胞，经细胞培养可获得大量IL－2。

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与　　　　融合,形成　　　　细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于　　　　　　　　　　,可大量制备。 

(2)与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用　　　　　　　诱导融合。 

(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是　　　　　　　　　　　　　　　　。 

(4)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入鼠淋巴细胞中,这个过程中用到的工具酶有　　　　　　　　,改造抗体属于　　　　工程的范畴。