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            • 1.

              科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答:

              (1)利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体,常用聚乙二醇、________、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行________和________,经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

              (2)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,请完成设计方案:

              ①取________细胞的细胞核,移植到去核的________细胞中,构成重组细胞。

              ②将重组细胞在________条件下做大规模培养或注射到小鼠________内增殖,以获得大量单克隆抗体。

              (3)也有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。

              ①酶A是指________,酶B是指__________________________。

              ②图中Ⅰ表示________,对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是______________,Ⅲ所指的细胞具有的特点是_______________。

            • 2.

              下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图分析回答问题:

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              (1)图中A过程之前需进行的操作是_________。

              (2)图中B过程常用_________、聚乙二醇或电激等诱导完成。

              (3)用于大规模培养的“细胞X”的名称是______细胞,其特点是既能________,又能产生_______。

              (4)根据物理性质分类,图中体外培养所用的培养基类型为_________。若为合成培养基,为满足营养需要,往往还需要加入________ 。

              (5)图示表明,制备单克隆抗体是动物细胞工程中_________技术的重要应用。

            • 3.

              图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示体外受精培育优质奶牛的过程;图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程。请据图回答下面的问题。

               


              ⑴ 在图1中注射到小鼠体内的物质是__________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞,此类细胞的特点是__________________。

              ⑵ 图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和获能的过程,才能与达到__________期的卵子受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛,可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。

              ⑶ 图3中过程①是植物细胞形成__________________的阶段,该阶段所用的酶是__________________________。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________(填图中序号)。

            • 4.

              为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。

              请回答:

              (1)获得大量目的基因常用________技术,其原理是_________。

              (2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为________细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有________基因。

              (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断_______(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。

              (4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。

              (5)除了基因工程外,细胞工程和胚胎工程也在人类生活中发挥了巨大作用。例如“试管婴儿”自诞生就引起了世界科学界的轰动,甚至被称为人类生殖技术的一大创举。也为治疗不孕不育症开辟了新途径。“试管婴儿”的诞生实际上结合了________、早期胚胎培养、胚胎移植等多种技术手段。再如,通过动物细胞杂交技术制备的单克隆抗体具有__________和灵敏度高等特性,因而广泛应用于疾病的检测、肿瘤的定位等方面。

            • 5.

              下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:


              (1)图甲和图乙所示的过程中,都必须用到的动物细胞工程技术手段是______________。
              (2)③过程中至少涉及两次筛选:第一次是利用______________进行初步筛选,第二次是利用____________________的方法筛选出既能大量增殖,又能产生单一性抗体的杂交瘤细胞。

              (3) 若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状会完全像白面绵羊吗?________。原因是___________________。

            • 6.

              下图为单克隆抗体制备流程示意图。

              (1)单克隆抗体制备技术的基础是____________________________。

              (2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是________________。在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的________,以保证生命活动的正常进行。

              (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1 mL细胞稀释液,其目的______________________________。

              (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是_______________________。

              (5)通过上述过程获得的单克隆抗体与普通抗体相比,优点是______________________。

            • 7.

              已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但有些淋巴细胞不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合,加促融剂促进细胞融合,获得杂种细胞,并生产单克隆抗体。请回答:

              (1)生产单克隆抗体时,不直接利用浆细胞,主要原因是_______________ 。

              (2)①过程中,常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_____________________。

              (3)②过程为_______培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入CO2的目的是__________。

              (4)④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养,也可注射到小鼠_______内培养.体内培养与体外培养相比,其优点是_____________________。

              (5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞,需在③过程向培养液中加入________________,理由是杂交瘤细胞可利用____________________途径合成DNA,从而才能在该培养液中增殖。

            • 8.

              女性怀孕后会分泌一种糖蛋白——绒毛膜促性腺激素(HCG),尿液中会检出HCG的存在。用抗HCG单克隆抗体制备的试纸可以测试女性是否怀孕。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:

              (1)制备单克隆抗体利用的生物学技术有______________和_____________。

              (2)促进动物细胞融合得到乙,常采用的方法有_________、________(答2个)。

              (3)用特定的选择培养基对乙筛选,得到的细胞丙的特点是_____________。

              (4)对丙检测筛选得到丁,采用的方法是__________。生产的单克隆抗体可以与__________特异性结合,从而诊断早孕。

              (5)将验孕试纸标有MAX标志线的一端插入待测尿液中(尿液不能没过该线),片刻后取出平放,若尿液中含有HCG,会随尿液向右扩散,与包埋在标志线右侧区域的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合,形成的复合体继续随尿液向右扩散至检测线处,又可以与固定在该区域的抗体2结合形成新的复合体,并不断积累,从而在此处显示出颜色。对照线区域固定着另外一种抗体3,可以捕获被显色剂标记的抗体1。因而当尿液继续扩散到对照线时,也会显示出颜色。

              据此判断:①若检测线和对照线均显示颜色,表示_________;

              ②若仅有对照线显示颜色,表示_______________;

              ③若检测线和对照线均不显示颜色,表示___________。

            • 9. Ⅰ、某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
                (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其它培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量_______。
                (2)细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是_______。
                (3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长停止,这种现象叫_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用_______消化处理。
                (4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的_______。

              Ⅱ、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。

              (1)该方案能达到预期效果吗?________。原因是__________________。

              (2)图中过程②中使用的特有诱导剂是______________。如果能成功获得理想的杂交瘤细胞,该细胞的特点是  ________________________(答两点)。

              (3)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的不同,②是通过筛选获得__________,④是通过筛选获得___________________。

            • 10. 如图是制备分泌抗X(H1N1流感病毒)抗体的过程,根据图解回答问题:

              (1)给小鼠注射抗原的目的是__________________________________________   _______ 

              (2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有__________________的特性。

              (3)由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了_______  ________________________的动物细胞工程技术手段。

              (4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是还含有__________________________

              (5)在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞分散开,以利于细胞融合,可用___________ ___处理离体组织细胞使之分散。

              (6)图中有两次筛选过程,其中步骤④的目的是筛选出____________________________,步骤⑤⑥的目的是筛选出__________________

              (7)请根据以下信息,设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加入聚乙二醇促融,获得杂种细胞。

              方法:______________________________________________________________________

              原理:____________________________________________________________________  _____

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