5.
多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损.成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜.利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期.科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如图.据图回答下列问题:
(1)若已获取PG的mRNA,可通过
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获取PG基因.已知BamHI的识别序列如图2甲所示,请在图2乙相应位置画出目的基因两侧的黏性末端.
(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有
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的培养基进行筛选,理由是
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.之后,还需将其置于质量分数为0.3g/ml的蔗糖溶液中,观察细胞
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现象来鉴别细胞壁是否再生.
(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与
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互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达.若
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,则可确定转基因番茄培育成功.
(4)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株,需要用
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技术;其中,愈伤组织经
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形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加
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