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            • 1． 铁皮石斛是一种名贵中药材，有生津养胃、降血糖和增强免疫力等作用，有效成分为石斛多糖、石斛碱等，温州雁荡山素有“中国铁皮石斛之乡”的美誉．请回答：
              （1）用优良品种自然生长的茎快速繁殖铁皮石斛时，给茎消毒时无需使用的是 ______  （A．乙醇B．无菌水 C．甘露醇 D．次氯酸钠）．在细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基中培养茎的切段，待长出较多的 ______ ，将其进行 ______ （处理）后再转入 ______ 培养基中继续培养，直至长成幼苗．这种通过组织培养技术快速繁殖植物的方法，也称为 ______ ．
              （2）研究发现，铁皮石斛的生长发育与其体内的内生菌密切相关．为进一步研究内生菌作用，需要大量内生菌进行相关实验．分离内生菌时最好采用 ______  （A．G6玻璃砂漏斗过滤法 B．血细胞计数法 C．划线分离法 D．涂布分离法），再将纯化的内生菌转移到液体培养基中进行 ______ ．
              （3）研究发现，200mg/L浓度的卡那毒素能有效抑制铁皮石斛细胞的增殖与分化．科学家欲利用卡那霉素，采用农杆菌转化法对现有铁皮石斛品种进行基因改良．在基因工程操作中，导入受体细胞的 ______ 分子应同时带有目的基因和 ______ 基因，这样才能利用含有卡那霉素的培养基将成功导入目的基因的受体细胞筛选出来．
              （4）鉴定铁皮石斛的品质，可通过苯酚-浓硫酸法测定石斛多糖的含量．其原理是：石斛多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物后，与苯酚缩合生产橙黄色化合物，在490mm处测定光密度值，以不同浓度的葡萄糖溶液为标准溶液建立标准曲线，便可知道样品的石斛多糖含量．这种方法类似于泡菜汁中 ______ 含量的测定，称之为 ______ 法．
              （5）为高效提取石斛多糖，可在提取液中加入 ______ ，以提高铁皮石斛的出汁率．
              难度：较易
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            • 2． 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图．

              据图回答下列问题：
              （1）过程①所需的酶是 ______ ．
              （2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 ______ 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志．
              （3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 ______ ．原生质体经过 ______ 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织．
              （4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 ______ 植株的根尖，通过 ______ 、 ______ 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目．
              （5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．下图是用该引物对双亲及再生植株1-4进行PCR扩增的结果．据图判断，再生植株1-4中一定是杂种植株的有 ______ ．

              （6）对杂种植株进行 ______ 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株．
              难度：较易
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            • 3． 如图为利用生物技术获得生物新品种的过程．据图回答：

              （1）A→B必需的工具酶有 ______ ．
              （2）在基因工程中，B表示 ______ ．
              （3）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中④用到生物技术主要有 ______ ．
              （4）若使用棉花的体细胞为受体细胞，⑤表示的生物技术是 ______ ．请简述利用棉花受体细胞培育成转基因抗虫棉幼苗的过程： ______ ．
              （5）要确定目的基因（抗虫基因）是否导入受体细胞，检测的方法是 ______ ．目的基因（抗虫基因）是否能稳定遗传并表达，在个体水平上通过 ______ 进行检测和鉴定．
              （6）转基因工程改良动植物的品种，最突出的优点是 ______ ．
              难度：中等
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            • 4． 番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬．但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏．为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种．操作流程如图．请据图回答．

              （1）过程①需要的工具酶有 ______ ．
              （2）在筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的 ______ 的表达．
              （3）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做 ______ ．
              （4）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了多聚半乳糖醛酸酶合成时的 ______ 过程，最终使番茄获得抗软化的性状．
              （5）为促使图中培养②、③过程的顺利完成，通常需要在培养基中加入的调节物质是 ______ ．要快速繁殖转基因抗软化番茄植株，目前常用的科技方法是 ______ ．
              （6）为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染，可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入到番茄植物细胞的 ______ （结构）中．
              （7）除了图示培育方法外，还可通过 ______ 技术，对多聚半乳糖醛酸酶基因进行定向改造，从而使多聚半乳糖醛酸酶的结构和功能发生特定的改变以获得抗软化的番茄品种．
              难度：中等
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            • 5． 我国科学家张道远先生通过从耐旱灌木白花柽柳中克隆得到TSOD基因，利用转基因技术转化到棉花中，获得了具备更强抗旱性的T4代转基因棉花株系．如图为转基因抗旱棉花的培育过程示意图，请据图回答：

              （1）①过程表示用 ______ 扩增目的基因的方法．步骤③一般用 ______ 处理农杆菌，使其易吸收周围环境中的DNA分子．
              （2）将重组质粒导入棉花细胞除步骤④所示的方法外，还可采用 ______ ．如果受体细胞是动物的受精卵，则一般采用的方法是 ______ ．
              （3）外植体培养成为试管苗的过程采用了 ______ 技术，利用了 ______ 的原理，步骤⑤⑥表示 ______ ．
              难度：较易
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            • 6． 我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株．如图是细胞培养形成兰花植株示意图，请根据图回答：

              注：胚状体即等同于植物种子的胚的结构．
              （1）过程④由愈伤组织形成胚状体要经过 ______ 和 ______ 过程．
              （2）在培养过程中，除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外，还必须保证的关键条件是 ______ ．
              （3）一个兰花茎尖在一年之内可以生产出400万株兰花苗，与有性生殖相比，利用植物组织培养快速繁殖植物的优势主要体现在 ______ 和 ______ ．
              （4）用于动物细胞培养的培养液与植物组织培养的培养基相比，在成分上的主要区别是 ______ ．
              （5）过程③是 ______ ④是 ______ ，如果取的是兰花根尖细胞则试管植物叶片是 ______ 色，原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 7． 如图表示某农作物的两种育种方法．请据图回答：
              （1）④过程应用了 ______ 技术，E幼苗的获得利用了细胞的 ______ ．
              （2）过程④⑤的育种方法是 ______ ，依据的遗传学原理是 ______ ．
              （3）若C品种的基因型为AaBbdd，D植株中能稳定遗传的个体占总数的 ______ ．
              （4）⑤过程使染色体数目加倍的方法是用 ______ 处理或 ______ ，这两种方法在原理上的相似之处是 ______ ．
              （5）若c作物为水稻，非糯性和糯性是一对相对性状，经过③过程形成的花粉粒加碘液染色，显微镜下观察，花粉有一半是蓝黑色，一半是橙红色，实验结果验证了 ______ 定律．
              难度：较易
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            • 8． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10g
              尿素 1g
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？ ______ ，理由是 ______ ．
              （2）培养基中氮源是 ______ ，这种培养基在功能上属于 ______ 培养基，目的是只允许能合成 ______ 的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用 ______ 法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是 ______ 法．
              难度：中等
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            • 9． 野菊花气味芬芳，具有清热解毒的功效，可用来制备芳香油，制备原料可从通过植物组织培养技术所获得的大量菊花中选取。

              (1)菊花的组织培养需在________培养基上进行，选取________冲洗干净，用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的酒精中摇动2—3次。

              (2)外植体经过________过程培育成植株幼苗，该过程的关键激素是________

              (3)接种操作需在酒精灯火焰旁进行，每次使用完器械后，需采用________灭菌。

              (4)菊花精油具有易挥发，难溶于水，化学性质稳定的特点，适合采用________法提取。当蒸馏瓶中的原料和水的量一定时，蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和________。

              (5)如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会减少，原因是________

              难度：较难
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            • 10． 下列为生物技术在生产实践中的应用，请回答问题：
              （1）在制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素．结果发酵失败，原因是 ______ ．
              （2）纤维素分解菌可用于农作物秸秆还田，用 ______ 染色法鉴别纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会出现透明圈，其大小能反映 ______ ．
              （3）农业生产上可以利用植物组织培养的方法来获得较多优良柑橘苗． ______ 培
              养基是常用的一种培养基，能为外植体细胞提供大量元素、微量元素和有机物．在配置好的该培养基中添加的生长素和细胞分裂素是 ______ 的关键性激素．
              （4）利用培养基不仅可以进行植物组织培养，也可以分离培养大肠杆菌．与植物组织培养明显不同的是，用于大肠杆菌培养的培养基中不需要加入 ______ ．
              （5）工业上通过提取橘皮精油作为食品、化妆品的配料，提取时通常采用新鲜材料，原因是 ______ ；对于压榨后得到的糊状液体，除去其中的固体物可采用的方法是 ______ ．
              难度：较易
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