现有甲、乙两个烟草品种(2n=48)，其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：

(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为___________和____________。

(2)将叶肉细胞制成原生质体时，使用______________________________去除细胞壁。

(3)在细胞融合技术中，常用的促融剂是________________。

(4)细胞融合后诱导脱分化产生的细胞团叫_______________。

（4）某生态农业把鱼塘、农田、果园和牛羊养殖场有机地组合在一起，优化了系统结构，遵循系统学与工程学原理中的____________的原理。

​（7）从分子水平检测目的基因存在与鉴定目的基因表达的方法依次为_______________、_______________。

某二倍体植物是杂合体，如图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答。

(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的________过程，X代表的是_________，③表示的是分化(或发育)过程，④表示的是诱导生根过程。

(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中植物激素 的种类及其浓度配比，由花粉发育成的完整植株均为________植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有________________________。

(3)植株甲进行__________________处理，才能结实，产生后代(乙)，否则植株甲只有通过无性生殖的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是________植株。

兰花育性差但市场需求巨大，某生物公司欲利用现代生物技术培养兰花。回答下列相关问题：

(1)欲培养无病毒的高品质兰花宜选择____________作为外植体。培养一段时间后，会经过___________形成愈伤组织，愈伤组织的特点是_________________________。

(2)若在培养过程中先用生长素，再用细胞分裂素，则愈伤组织的生长状况是__________。愈伤组织在一定的培养条件下，又可再分化出___________，最终长成兰花小植株。

(3)若研究人员对两个品种的兰花进行体细胞杂交，首先用_________法获得原生质体，然后用___________（试剂）诱导原生质体融合。原生质体融合的原理是_______________。融合后的原生质体再生细胞壁过程与细胞内_____________（细胞器）有密切关系。

(4)在植物组织培养的过程中，由于培养细胞一直处于___________状态，因此容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学药物等）的影响产生突变，科研人员可从这些突变体中筛选出新品种兰花。

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）将重组DNA分子导入植物细胞的常用方法有______________________法。(要写出两种) 

（2）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用____________________技术，该技术的核心是________________和_________________。 

（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______________做探针进行分子杂交检测，又要将水稻___________________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

I．玉米自交系（遗传稳定的育种材料）具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株。获得抗除草剂转基因玉米自交系，技术路线如下图。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A．①③           B．①④        C．②③       D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系_______的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。

A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织

B．无农杆菌附着的转化愈伤组织

C．农杆菌附着的未转化愈伤组织

D．农杆菌附着的转化愈伤组织

（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系。

II．胚胎工程是指对动物_______________或____________所进行的多种显微操作和技术处理。此工程是以体内受精过程和早期胚胎发育为理论基础的。哺乳动物精卵细胞发生上最大的区别是卵子在        （时期）完成___________________。受精作用发生时精子首先发生__________，之后当第一个精子接触卵细胞膜时发生_________________________。受精作用的场所是_____________。受精卵形成后，开始进行旺盛的有丝分裂。经历卵裂期、_____________、________________、原肠胚，经组织器官分化，发育成完整的生物个体。其中__________出现最早的分化现象。

（2）体外重组的质粒可通过Ca²⁺参与的_______方法导入大肠杆菌细胞：而体外重组的噬菌体DNA通常需与_______组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞，在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是__________。

（3）某农业生态工程基地按照生态和经济规律，对种植业和养殖业进行了优化设计．通过套种、间种和轮种等技术的应用，增加农作物的种类，使种植的农作物为该生态系统组成成分中的消费者提供更多种类的食物。应用的生态学原理是___________________。

根据下图回答下列问题：

(1)过程①②是用____________处理细胞的细胞壁，后经③过程诱导原生质体融合，实际融合的过程中原生质体可能会形成________种融合细胞(只考虑两个细胞融合的情况)。④是____________的过程，与此过程密切相关的细胞器是________________________。

(2)在⑤过程培养中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入____________。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证________。

(3)若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功)，得到的后代应含________条染色体，还必须用________来处理幼苗，才能得到可育的番茄—马铃薯植株，此时体细胞中含有________条染色体。

(4)若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则(3)中可育杂种植株为________倍体。

如图为培育转基因抗虫棉的技术流程。请据图回答：

（1）进行过程①运用的工具酶是_____、________，限制酶的特点是_______________。

（2）基因工程核心步骤的名称是_____________，其作用__________，______________________。

（3）③过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂外，还需要添加________

（4过程③④所表达的两个重要的生理现象是_________、_________。③④合起来称之为____________，其理论基础____________。

（5）过程②采用最多的方法是___________。农杆菌中的Ti质粒上T-DNA具有___________________________的特点。把目的基因导入受体细胞，检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是__________，检测时常用的方法是__________。

2011年11月，武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内，借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的，这一成果轰动了生物界。结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题。

(1)限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C^↓AATTG—和—G^↓AATTC—。为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该怎样操作？

______________________，______________________，_________________________。

(2)②过程常用的细菌是________。

(3)③经历的生理过程主要有________和________两个阶段。培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是____________________________。

(4)基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可检测的物质有___________、__________、________。