科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关的酶切位点。请分析回答下列问题：

（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用____________技术对目的基因进行扩增，在该反应体系中需加入________、模板序列、原料及两种________。然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有__________________。

（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是____________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________________酶对外源DNA、质粒进行切割。

（3）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的__________________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是____________________。

表乙：植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况

（1）离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是__________。

（2）有植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包上人造种皮，制成人工种子，可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中[    ]___________和[     ]________过程，在此过程中被培养的细胞始终受_________的调节（[  ]填序号）。

（3）应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是_____________。

（4）从表乙的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的二种重要物质。其中，新芽形成必须的条件是________________；而在培养形成完整新个体过程中，对它们的调控关键是________________。

科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番肺和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题：

（1）过程①常用的酶是________________，细胞融合完成的标志是____________________________________。

（2）植物体细胞杂交依据的生物学原理有__________________________________________。

（3）植物原生质体融合过程常利用化学试剂__________诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____________种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到______________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。

（4）过程④中的培养基常添加的植物激素是______________________________。

（5）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含____________条染色体。

​

（1）淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜具有___________________特点。此过程中，常用的生物诱导试剂为__________________，该杂交细胞的特点是____________________________________________________。

（2）杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基成分有何主要不同？______________________________________________________________________。

（3）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了__________________________________。

（4）在单克隆抗体制备过程中，应用了细胞工程中的_________________和_______________两大技术。

番茄为雌雄同株植物，抗病（H） 对感病（h）完全显性，晚熟（R）对早熟（r）完全显性，两对性状独立遗传．如图表示番茄植株（HhRr）作为实验材料培育新品种的途径，请据图分析回答．

（1）途径1、4依据的遗传学原理分别是 、 ．

（2）通过途径2、3获得幼苗的过程都应用了 技术，该技术依据的生物学原理是 ．

（3）通过途径2获得新品种的育种方法是 ；需要适宜浓度的秋水仙素处理幼苗，为什么不能处理该幼苗形成的萌发种子？ ．

（4）A与途径3中幼苗基因型相同的概率为 ，C的基因型是 ，种植C，待其开花后取其花粉进行花药离体培养，培养所得植株中表现为早熟抗病性状的植株所占比例为 ，早熟抗病的植株中纯合子和杂合子比例为 ．

A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞)：

（1）图中①过程用到的酶是                 ,所形成的B叫做              。

（2）②过程常用        处理农杆菌,使之成为          细胞,此时利于完成转化过程。

（3）图中③过程需要用到的主要激素有                             ，而且配比不同。

（4）在分子水平上,可采用       的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。

B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。

（1）实验中，去除细胞壁需用到的酶主要有                和                  等。

（2）专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是                    。

如图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

(1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已处理，除去了                    ；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是            。融合完

成的标志是                       。

(2)若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用                技术把D培养成植株。

(3)若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物组织或胚胎，然后用        酶使其分散开来；

(4)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，图中B为                   。

(5)若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有     种，用来培养的D细胞应该是                 。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①—④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点                                    。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶           对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割，然后用                将它们连接起来。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有       作为标记基因。

（3）研究人员通常采用         法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用               技术，在分子水平检测目的基因是否转录形成了相应的mRNA。

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的       和        过程。在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入           。同时，在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证                  。

（5）与植物组织培养的培养基相比,用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外,通常还要添加                  。

下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下列问题。

（1）菊花的组织培养与月季的花药培养都需要制备________固体培养基，该培养基含有20多种营养成分，在配制培养基母液时常将其配方中的微量元素浓缩_________倍。

（2）用于培养的菊花嫩枝和月季花药都需要消毒，通常消毒所用的药剂是___________。

（3）月季花药培养选材十分重要，从花期分析需要选取________的花药；从花蕾分析需要选取______的花蕾；从花粉发育时期分析需要选取_____的花粉，从而提高诱导成功率。

（4）确定花粉发育时期的常用方法有           和                。后者可将花粉细胞核染成      色。

（5）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过__________阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于___________。

(1)玉米秸秆的主要成分是          ，酵母菌不能直接使用，要利用C₁酶和C_X酶分解成          后，再经            酶分解成葡萄糖才能供给酵母菌使用。

(2)取茎尖进行组织培养，发育成植株D，取D的花药培养成幼苗，经秋水仙素处理后发育成为植株G。从细胞分裂方式上分析，E→F过程中进行了________分裂；从育种方式上分析，D→G属于____________育种。

(3)D植株上的小孢子母细胞形成精子所经历的分裂方式是____________________。

某个时期对离体刺激最敏感，一般来说在________期，花药培养成功率最高。

(4)选取茎尖放入A瓶中培养，是因为__________________________________________。

如果选取D植株茎的切段放入A瓶培养，首先要进行____________

(5)C和F试管苗不能直接栽培到大田中，要进 行____________________________。