8．
科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关的酶切位点。请分析回答下列问题：
（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用____________技术对目的基因进行扩增，在该反应体系中需加入________、模板序列、原料及两种________。然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有__________________。
（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是____________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________________酶对外源DNA、质粒进行切割。
（3）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的__________________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是____________________。